基于高等真菌灵芝功能基因编辑的调节灵芝酸产量的方法

摘要

一种基于高等真菌灵芝功能基因编辑的调节灵芝酸产量的方法，包括一个U6基因启动子(pU6‑3)以及通过结合HDV核酶构建了能内源表达gRNA的CRISPR‑Cas9质粒，该质粒能用于高等真菌标记基因和功能基因的高效编辑，且其编辑效率远高于已报道的编辑效率。基于功能基因cyp5150l8中断的突变体，发现突变体中四种灵芝酸均比野生型的含量降低。本发明开发了一套能广泛用于有效编辑高等真菌的功能基因的CRISPR‑Cas9系统。