Roc突变体蛋白的结晶方法

摘要

本发明公开了一种Roc突变体蛋白的结晶方法。所述方法先对目标Roc蛋白的基因序列进行表面工程突变构造K1460A和K1463A两个非功能区域突变得到Roc突变体蛋白，在蛋白样品中加入二磷酸鸟苷，然后按比例将Roc突变体蛋白样品和包含晶种的结晶缓冲液进行混合，利用microbatch板进行晶体筛选，得到稳定、完整的单个Roc突变体蛋白晶体。本发明通过在Roc蛋白溶液及Roc突变体蛋白溶液中添加二磷酸鸟苷，增强了Roc蛋白在结晶过程中的稳定性，避免Roc蛋白在长时间的结晶过程中出现沉淀，并且对需要结晶的Roc蛋白的非功能区域位点进行表面工程突变，使得蛋白结晶过程无需进行繁琐的结晶条件优化就可得到单片完整分辨率高的晶体，对深入研究蛋白结构和功能具有重要意义。