一种多肽探针及其在翻译后修饰的结合蛋白鉴定中的应用

摘要

本发明提供了一种基于光交联和纳米金属颗粒自组装技术的多肽探针，其上修饰了具有蛋白翻译后修饰的多肽，将亲和识别与富集捕获过程一体化，实现了对蛋白翻译后修饰结合蛋白或其复合物的便捷高效地识别和鉴定。本发明在纳米金属颗粒上引入光交联基团，不仅使得多肽和结合蛋白之间的弱作用力转化为光交联基团形成的强共价键作用，可承受较强烈的洗脱条件，可捕获较低丰度以及瞬态相互作用的蛋白；而且避免了光交联基团修饰对多肽骨架的影响，较好的保持了多肽骨架的原始结构和识别特性，大大降低了对相应结合蛋白结合特异性的影响。本发明还提供了所述多肽探针的制备方法，及其在翻译后修饰的结合蛋白鉴定、蛋白修饰间相互作用的鉴定、新的蛋白修饰结合蛋白的发现中的应用。