基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因特定突变检测试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因cDNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：sDPlaseI连接酶，sDPlaseI连接酶缓冲液，耐热RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中sDPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括反转录、耐热RNase酶消化、sDPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。