一种基于氧化石墨烯纳米靶向载体复合物的Caspase-3荧光检测方法

摘要

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种基于氧化石墨烯(GO)纳米靶向载体复合物的Caspase‑3荧光检测方法。本发明主要是在GO表面修饰靶向识别分子和荧光素(FAM)标记的Caspase‑3特异识别肽段制备GO纳米靶向载体复合物，Caspase‑3会引起底物肽段被切割FAM从GO表面脱落荧光恢复。实验用FAM标记的Caspase‑3特异性底物肽(Pep)、壳聚糖(CS)和Toll样受体4抗体蛋白(Anti‑TLR4)共价修饰于GO表面，构建用于凋亡关键节点蛋白Caspase‑3检测的GO纳米靶向载体复合物(GO/CS/Pep/Anti‑TLR4)；Caspase‑3存在时会识别GO/CS/Pep/Anti‑TLR4上Pep含有的序列肽段并特异性切割，FAM从GO表面脱落荧光恢复，通过荧光分光光度计检测荧光强度，绘制Caspase‑3浓度与荧光强度之间的标准关系曲线，依据检测所得荧光强度计算实际样品中Caspase‑3浓度。该方法灵敏性高、特异性强。