一种胞内外分泌4-α-糖基转移酶的基因工程菌及其发酵方法和应用

摘要

本发明公开了一种胞内外分泌4‑α‑糖基转移酶(4GT)的基因工程菌(重组大肠杆菌)，属于酶基因工程和酶工程领域。所述基因工程菌通过将来源于嗜热栖热菌HB8的编码4GT的基因通过质粒pET‑32a(+)导入到宿主细胞大肠杆菌中得到。本发明构建的基因工程菌株的胞外4GT酶活可达到167.47U/mL。该重组酶的最适温度为60℃，最适pH为7.0，所述4GT具有转苷活性，能使淀粉中支链淀粉的侧链长度延长，适合食品、化妆品和医药等工业应用的需要，能用于高支化淀粉的工业生产。本发明的优点在于以大肠杆菌为宿主，4GT不仅在其胞内进行了表达，而且在其胞外也能高效表达，这不仅减少了杂蛋白对4GT酶活及4GT纯化时的干扰，也可简化生产4GT的流程。