转导cas9基因到哺乳动物细胞进行基因编辑的方法

摘要

本发明提供了一种利用昆虫杆状病毒转导cas9基因到哺乳动物细胞进行基因编辑的方法，该方法通过构建含有gRNA、cas9、筛选标记的基因片段、哺乳动物细胞可识别的启动子、转录终止子序列的重组Bacmind质粒，并将其转染sf9细胞，包装获得重组杆状病毒，用其对哺乳动物细胞进行cas9的转导。利用杆状病毒可将大DNA导入哺乳动物细胞，降低cas9/筛选标记基因导入哺乳动物细胞的难度，本发明方法对于cas9的转导效率优异；本发明接近单细胞转导方法，无需反复大量稀释筛选即可找到成功编辑的克隆；所用携带有gRNA/cas9基因的杆状病毒，滴度高，易于保存、复制，可高效重复利用，便于开展相关工作。