作为肾酪氨酸激酶抑制剂的双环杂芳基环烷基二胺衍生物

摘要

本发明涉及双环杂芳基环烷基二胺衍生物、生产它们的方法、它们作为SYK抑制剂的用途以及含有它们的药用组合物。

说明书

本发明涉及双环杂芳基环烷基二胺衍生物、生产它们的方法、它们作 为药物的用途以及含有它们的药用组合物。

据述，与ZAP70一起，肾酪氨酸激酶(SYK)是酪氨酸激酶SYK家族 的一员,这些非受体型细胞质酪氨酸激酶共有一个由连接域分隔的特征双 重SH2域。

据进一步描述，SYK在B细胞活化信号的传输中起关键作用，因此， 抑制SYK对于治疗自身免疫性疾病是有效的。

目前，关于SYK在上皮细胞恶性肿瘤中的作用存在争议。多名作者提 出，异常的SYK功能会加速鼻咽癌和头颈癌的转化，而另外的作者则认为 对乳腺癌和胃癌具有肿瘤抑制剂的作用。

本发明的化合物通常对SYK显示强的抑制作用，因此，可以用于治疗 多种疾病，例如可以用于与自身免疫系统有关的疾病和/或病症。

因此，本发明提供式(I)化合物或其可药用的盐，

其中

X1为CR1；

X2为CH；

Y为CH₂或O；

A为具有8－10个环原子的双环杂芳基,其中1－3个所述环原子为选 自N、O和S的杂原子，并且其中所述杂芳基可以是未取代的，或者是在 碳原子上被R2取代的或在氮原子上被R3取代的；

R1为H、Hal或C_1-4烷基；

R2为H、C_1-4烷基、C_3-5环烷基、CN或Hal；且

R3为H或烷基。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其可药用的盐,其中

X1为CH；

X2为CH；

Y为CH₂；

A为具有8－10个环原子的双环杂芳基,其中1–2个所述环原子为选 自N、O和S的杂原子，且所述杂芳基可以是未取代的，或者是在碳原子 上被R2取代的或在氮原子被R3取代的；

R2为H、C_1-4烷基、C_3-5环烷基、CN或Hal；且

R3为H或烷基。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其可药用的盐,其中

X1为CH；

X2为CH；

Y为CH₂；

A为具有8－10个环原子的双环杂芳基,其中1－2个所述环原子为N， 且所述杂芳基可以是未取代的或在碳原子上被R2取代的；其中

R2为H、C_1-4烷基、C_3-5环烷基、CN或Hal。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其可药用的盐,其中

X1为CH；

X2为CH；

Y为CH₂；

A为未取代的或取代的吲哚部分,其中所述取代基为R2且与吲哚部分 的碳原子连接，其中R2为C_1-4烷基。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其可药用的盐,其中

X1为CH；

X2为CH；

Y为CH₂；

A为未取代的或取代的7-吲哚基，其中所述取代基为R2且与吲哚部 分的碳原子连接；其中

R2为C_1-4烷基.

在另一个实施方案中，本发明提供式(II)化合物或其可药用的盐,

其中：

Y为CH₂或O，且

R2为H、C_1-4烷基或Hal。

在另一个实施方案中，本发明提供式(II)化合物或其可药用的盐,其中

Y为CH₂；且

R2为H、C_1-4烷基或Hal。

在另一个实施方案中，本发明提供式(II)化合物或其可药用的盐,其中

Y为CH₂；且

R2为H、甲基或氟。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物、式(II)化合物或其可药 用的盐,其中所述化合物选自：

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-8-氟-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基氨 基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-8-氟-5-(喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-2H-吲唑-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H- 吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-6-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(苯并呋喃-4-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(苯并[b]噻吩-4-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲唑-4-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-3-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(8-甲基-喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-[7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-4-氧代-3,4-二氢-吡啶并[3,4-d]哒嗪 -5-基氨基]-1H-吲哚-3-甲腈,

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(7-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹喔啉-6-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮；

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-8-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮；

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨 基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(苯并[b]噻吩-4-基氨基)-3H- 吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮；

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基 氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮；和

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡 啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮。

在本文中，术语“烷基”是指具有至多20个碳原子的全饱和的支链或直 链烃基。除非另有规定外，烷基是指具有1－16个碳原子、1－10个碳原 子、1－7个碳原子或1－4个碳原子的烃基。烷基的代表性示例包括但不 限于甲基、乙基、正-丙基、异-丙基、正-丁基、仲-丁基、异-丁基、叔-丁 基、正-戊基、异戊基、新戊基、正-己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、 2,3-二甲基戊基、正-庚基、正-辛基、正-壬基、正-癸基等。

在本文中，术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘。

在本文中，术语“环烷基”是指具有3－12个碳原子的饱和的或不饱和 的单环、双环、三环或螺环烃基。除非另有规定外，环烷基是指具有3－9 个环碳原子或3－7个环碳原子的环烃基。

取代的环烷基为被1、2、3个或更多个取代基取代的环烷基，所述取 代基独立选自：羟基、巯基、氰基、硝基、氧代、烷基亚氨基、C₁-C₄-烷 基、C₁-C₄-链烯基、C₁-C₄-炔基、C₁-C₄-烷氧基、C₁-C₄-硫烷基、C₁-C₄-链 烯基氧基、C₁-C₄-炔基氧基、卤素、C₁-C₄-烷基羰基、羧基、C₁-C₄-烷氧基 羰基、氨基、C₁-C₄-烷基氨基、二-C₁-C₄-烷基氨基、C₁-C₄-烷基氨基羰基、 二-C₁-C₄-烷基氨基羰基、C₁-C₄-烷基羰基氨基、C₁-C₄-烷基羰基(C₁-C₄-烷 基)氨基、磺酰基、氨磺酰基、烷基氨磺酰基、C₁-C₄-烷基氨基磺酰基，其 中每个前述烃基(例如烷基、链烯基、炔基、烷氧基)还可以被一或多个基 团取代，所述基团在各种情况下均独立选自卤素、羟基或C₁-C₄-烷氧基。 典型的单环烃基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己 基和环己烯基等。典型的双环烃基包括冰片基、吲哚基、六氢吲哚基、四 氢萘基、十氢萘基、双环[2.1.1]己基、双环[2.2.1]庚基、双环[2.2.1]庚烯基、 6,6-二甲基双环[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基双环[3.1.1]庚基、双环[2.2.2]辛基 等。典型的三环烃基包括金刚烷基等。

除非另有定义，术语“杂芳基”是指具有1－8个杂原子的5－14元单环 -或双环-或三环-芳族环系。代表性的杂芳基为5－10元环系(例如，5－7 元单环或8－10元双环)或5－7元环系。代表性的杂芳基包括2-或3-噻吩 基；2-或3-呋喃基；2-或3-吡咯基；2-、4-或5-咪唑基；3-、4-或5-吡唑基； 2-、4-或5-噻唑基；3-、4-或5-异噻唑基；2-、4-或5-唑基；3-、4-或5- 异唑基；3-或5-(1,2,4-三唑基)；4-或5-(1,2,3-三唑基)；四唑基；2-、3- 或4-吡啶基；3-或4-哒嗪基；3-、4-或5-吡嗪基；2-吡嗪基和2-、4-或5- 嘧啶基。

术语“杂芳基”还指其中杂芳族环与一或多个芳基、环脂族或杂环稠合 的基团，其中连接的基团或点位于杂芳族环上。非限定性示例包括1-、2-、 3-、5-、6-、7-或8-中氮茚基；1-、3-、4-、5-、6-或7-异吲哚基；2-、3-、 4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基；2-、4-、5-、6-、 7-或8-嘌呤基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-或9-喹嗪基；2-、3-、4-、5-、 6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基；1-、4-、5-、6-、 7-或8-(2,3-二氮杂萘基)；2-、3-、4-、5-或6-(1,5-二氮杂萘基)；2-、3-、5-、 6-、7-或8-喹唑啉基；3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基；2-、4-、6-或7-蝶啶 基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-4aH咔唑基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、 7-或8-咔唑基(carbzaolyl)；1-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-咔啉基；1-、 2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-菲啶基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8- 或9-吖啶基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-萘嵌间二氮杂苯基；2-、3-、 4-、5-、6-、8-、9-或10-邻二氮杂菲基(phenathrolinyl)；1-、2-、3-、4-、 6-、7-、8-或9-吩嗪基；1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩噻嗪基； 1-、2-、3-、4-、6-、7-、8-、9-或10-吩嗪基；2-、3-、4-、5-、6-或1-、 3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-苯并异喹啉基(benzisoqinolinyl)；2-、3-、 4-或噻吩并[2,3-b]呋喃基；2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10-或11-7H-吡嗪 并[2,3-c]咔唑基；2-、3-、5-、6-或7-2H-呋喃并[3,2-b]-吡喃基；2-、3-、4-、 5-、7-或8-5H-吡啶并[2,3-d]-o-嗪基；1-、3-或5-1H-吡唑并[4,3-d]-唑 基；2-、4-或5-4H-咪唑并[4,5-d]噻唑基；3-、5-或8-吡嗪并[2,3-d]哒嗪基； 2-、3-、5-或6-咪唑并[2,1-b]噻唑基；1-、3-、6-、7-、8-或9-呋喃并[3,4-c] 噌啉基；1-、2-、3-、4-、5-、6-、8-、9-、10或11-4H-吡啶并[2,3-c]咔唑 基；2-、3-、6-或7-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪基；7-苯并[b]噻吩基；2-、4-、 5-、6-或7-苯并唑基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基；2-、4-、4-、5-、 6-或7-苯并噻唑基；1-、2-、4-、5-、6-、7-、8-或9-苯并氧杂基(benzoxapinyl)； 2-、4-、5-、6-、7-或8-苯并嗪基；1-、2-、3-、5-、6-、7-、8-、9-、10- 或11-1H-吡咯并[1,2-b][2]苯并氮杂基。典型的稠合杂芳基包括但不限于 2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基；1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基； 2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基；2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并[b]噻吩基； 2-、4-、5-、6-或7-苯并唑啉基；2-、4-、5-、6-或7-苯并咪唑基和2-、 4-、5-、6-或7-苯并噻唑基。

在本文中，术语“异构体”是指具有相同的分子式但是原子的排列和构 型不同的不同化合物。同样在本文中，术语“光学异构体”或“立体异构体” 是指本发明指定化合物任何可能存在的各种立体同分异构构型，包括几何 异构体。应当理解，取代基可以与碳原子的手性中心相连。术语“手性”是 指与其镜像配对物具有不重叠性的分子，而“非手性”是指与其镜像配对物 具有可重叠性的分子。因此，本发明包括化合物的对映异构体、非对映异 构体或外消旋体。“对映异构体”为彼此镜像具有不重叠性的一对立体异构 体。一对对映异构体的1:1混合物为“外消旋”混合物。在适当的时候，该 术语用于指外消旋混合物。“非对映异构体”为具有至少两个不对称原子的 立体异构体，但是它们彼此不为镜像。绝对立体化学根据 Cahn-lngold-Prelog R-S系统规定。当化合物为纯对映异构体时，每个手性 碳的立体化学可以指定为R或S。绝对构型未知的拆分的化合物可以根据 其旋转钠D线波长处的平面偏振光的方向而指定为(+)或(-)(右旋或左旋)。 本文中所述的某些化合物含有一或多个不对称中心或轴，因此可以产生对 映异构体、非对映异构体和其它根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-的立体 异构形式。

根据选择的原料和工艺，化合物可以以可能的异构体之一或其混合物 的形式存在，例如纯光学异构体；或以异构体混合物的形式存在，例如外 消旋体和非对映异构体混合物，这取决于不对称个碳原子的数目。本发明 应当包括所有此类可能的异构体，包括外消旋混合物、非对映体混合物和 光学纯形式。光学活性的(R)-和(S)-异构体可以采用手性合成子或手性试剂 制备，或者采用常规技术拆分。如果所述化合物含有双键，则取代基可以 是E或Z构型。如果所述化合物含有二取代的环烷基，则该环烷基取代基 可以是顺式-或反式-构型。本发明也应当包括所有互变异构形式。

在本文中，术语“盐”是指本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。“盐” 特别包括“可药用的盐”。术语“可药用的盐”是指能够保持本发明化合物的 生物学效能和性质的盐，其通常不是生物学或其它方面所不需要的。在多 种情况下，由于存在氨基和/或羧基或类似的基团，本发明化合物能够形成 酸和/或碱盐。

可药用的酸加成盐可以采用无机酸和有机酸形成，例如乙酸盐、天冬 氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸 氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、chlortheophyllonate、柠檬酸 盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸 盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂基硫酸 盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、 萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕 榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙 酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三 氟乙酸盐。

能够形成盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。

可以衍生成盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、 丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、 乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。药学可接受的碱加成的盐可以采用无 机碱和有机碱形成。

可以衍生成盐的无机碱包括例如铵盐和来自元素周期表I-XII族的金 属。在某些实施方案中，所述盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌 和铜；特别适合的盐包括铵、钾、钠、钙和镁盐。

可以衍生成盐的有机碱包括例如伯、仲和叔胺类、取代的胺类，包括 天然存在的取代的胺类、环胺类、碱性离子交换树脂等。某些有机胺类包 括异丙基胺、苄星青霉素、胆碱盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、 哌嗪和氨丁三醇。

本发明的药学可接受的盐可以通过常规的化学方法由碱性或酸性部分 合成。一般而言，可以通过下列方法制备此类盐：使这些化合物的游离酸 与化学计算量的适合的碱(例如Na、Ca、Mg或K的氢氧化物、碳酸盐、 碳酸氢盐等)反应制备，或通过使这些化合物的游离碱形式与化学计算量的 适合的酸反应制备。此类反应通常在水中或有机溶剂中或两者的混合物中 进行。一般而言，如果切实可行，则采用非水介质例如乙醚、乙酸乙酯、 乙醇、异丙醇或乙腈是理想的。其它适当的盐的名单可以参考例如 “Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明顿药物科学)”，第20版， Mack Publishing Company，Easton，Pa.，(1985)；Stahl和Wermuth的“药 用盐手册：性质、选择和应用(Handbook of Pharmaceutical Salts： Properties，Selection and Use)”(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。

本文给出的任何通式还应当表示这些化合物的未标记的形式和同位素 标记的形式。同位素标记的化合物具有本文给出的通式所描述的结构，但 是一个或多个原子被具有选择的原子量或质量数的原子所替代。可以掺入 本发明化合物的同位素的示例包括：氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位 素，例如分别为²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F ³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、 ¹²⁵I。本发明包括如本文所定义的不同同位素标记的化合物，例如存在放射 性同位素例如³H和¹⁴C的那些化合物和存在非放射性同位素例如²H和¹³C 的那些化合物。此类同位素标记的化合物可以用于代谢研究(使用¹⁴C)、反 应动力学研究(例如采用²H或³H)、检测或成像技术，例如正电子发射断 层成像术(PET)或单光子发射型计算机体层摄影(SPECT)，包括药物或底物 组织分布测定或用于患者的放射性治疗。具体地讲，¹⁸F或标记的化合物特 别适用于PET或SPECT研究。本发明同位素标记的化合物通常可以通 过本领域技术人员已知的传统技术制备，或者通过实施例和制备部分中公 开的方法采用适当同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂制备。

另外，由于具有较好的代谢稳定性，用较重的同位素尤其是氘(例如²H 或D)取代，能够提供某些治疗学优点，例如延长体内半衰期或减少所需剂 量或改善治疗指数。应当理解，在上下文中，氘可以被认为是本发明化合 物的取代基。可以通过同位素富集因子来定义此类较重同位素(特别是氘) 的浓度。本文使用的术语“同位素富集因子”是指特定同位素的同位素丰度 与天然丰度的比例。如果本发明化合物的取代基被指定为氘时，该化合物 针对每个指定氘原子的同位素富集因子为至少3500(每个指定的氘原子具 有52.5％的氘掺入)、至少4000(60％的氘掺入)、至少4500(67.5％氘的掺 入)、至少5000(75％的氘掺入)、至少5500(82.5％的氘掺入)、至少6000 (90％的氘掺入)、至少6333.3(95％的氘掺入)、至少6466.7(97％的氘掺入)、 至少6600(99％氘的掺入)或至少6633.3(99.5％的氘掺入)。

本发明的可药用的溶剂化物包括那些其中结晶溶剂可以被同位素取代 的那些，例如D₂O、d₆-丙酮、d₆-DMSO。

本发明化合物，即含有能够作为氢键供体和/或受体的基团的式(I)和/ 或(II)化合物，可以与适合的共晶形成体形成共晶。这些共晶可以通过已知 的共晶形成方法由本发明化合物制得。这些方法包括在结晶条件下使本发 明化合物在溶液中与共晶形成体研磨、加热、共升华、共熔或接触并且分 离出由此形成的共晶。合适的共晶形成体包括WO2004/078163中所述的那 些。因此本发明还提供了含有本发明化合物的共晶。

本文使用的术语“可药用的载体”包括任何及所有溶剂、分散介质、包 衣材料(coating)、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(如抗菌剂、抗真菌剂)、 等张剂、吸收延缓剂、盐、防腐剂、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解 剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料等以及上述组合，这均为本领域普通 技术人员所已知(参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences(雷明顿 药物科学)，第18版，Mack Printing Company，1990，第1289－1329页)。 除非某些传统的载体与活性成分不相容，否则包括其在治疗学或药用组合 物中的应用。

术语本发明化合物的“治疗有效量”是指能够引起个体的生物学或医学 反应的本发明化合物的量，例如减少或抑制酶或蛋白活性或者改善症状、 减轻病症、减缓或延迟疾病进展或预防疾病等。在一个非限制性实施方案 中，术语“治疗有效量”是指在施用给个体时对于下述各项有效的本发明化 合物的量：(1)至少部分减轻、抑制、预防和/或改善(i)由SYK介导的或(ii) 与SYK活性相关的或(iii)特征为SYK活性(正常或异常)的病症、障碍或疾 病，或(2)减少或抑制SYK的活性，或(3)减少或抑制SYK的表达。在另 一个非限制性实施方案中，术语“治疗有效量”是指在施用给细胞或组织或 非细胞生物学材料或培养基时能够有效地至少部分减少或抑制SYK活性、 或者至少部分减少或抑制SYK表达的本发明化合物的量。

本文使用的术语“个体”是指动物。所述动物可以是哺乳动物。个体也 指例如灵长类动物(如人类，男性或女性)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、 兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施方案中，所述个体是灵长类动物。 在其它实施方案中，所述个体是人类。

本文使用的术语“抑制”指减轻或抑制指定的病症、症状或障碍或疾病， 或显著降低生物学活性或过程的基线活性。

在本文中，术语任何疾病或病症的“治疗”在一个实施方案中是指减轻 疾病或病症(即减缓或阻止或减轻疾病的发展或其至少一种临床症状)。在 另一个实施方案中，“治疗”是指减轻或缓解至少一个身体参数(physical  parameter)，包括可能未被患者识别的身体参数。在又一个实施方案中，“治 疗”指身体上地(例如稳定可识别症状)、生理上地(例如稳定身体参数)或在 该两方面上调节疾病或病症。在又一个实施方案中，“治疗”指预防或延迟 疾病或病症的发病、发展或恶化。

本文使用的个体“需要”治疗是指通过此类治疗该个体将在生物学上、 医学上或生活质量上受益于此类治疗。

除非本文另行说明或上下文中有明显矛盾，在本发明上下文中(尤其在 权利要求上下文中)使用的术语“一个”、“所述”、“该”等类似术语应该理解 为包括单数形式和复数形式。

除非本文另行说明或上下文中有明显矛盾，本文所述的所有方法可以 以任何合适的顺序进行。本文提供的任何和所有的示例或示例性语言(例如 “例如”)的使用，目的仅仅是更好地说明本发明，不是对要求保护的本发明 的范围加以限定。

本发明化合物的任何不对称原子(例如碳等)可以以外消旋体或对映体 富集的形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-构型。在某些实施方案中，每个 不对称原子以(R)-或(S)-构型而言具有至少50％的对映体过量、至少60％ 的对映体过量、至少70％的对映体过量、至少80％的对映体过量、至少 90％的对映体过量、至少95％的对映体过量或至少99％的对映体过量。如 果可能，在具有不饱和双键的原子处的取代基，可以呈现为顺(Z)-或反式 (E)-形式。

因此，本文使用的本发明化合物可以为可能的异构体、阻转异构体、 旋转异构体、互变异构体或其混合物之一的形式，例如，基本上纯的几何(顺 式或反式)异构体、非对映异构体、旋光异构体(对映体)、外消旋体或其混 合物。

例如，通过色谱和/或分级结晶方法，任何得到的异构体混合物可以基 于各组分的物理化学差异而分离为纯的或基本纯的几何异构体或旋光异构 体、非对映异构体、外消旋体。

任何获得的最终产物或中间体的外消旋物可以通过以下已知方法拆分 成旋光对映体，例如通过分离用光学活性的酸或碱获得的其非对映体盐并 释放该光学活性的酸性或碱性化合物。具体地讲，因此，可以利用碱性部 分将本发明化合物拆分为其旋光对映体，例如通过对采用光学活性的酸形 成的盐进行分级结晶，所述酸例如酒石酸、二苯甲酰酒石酸、双乙酰酒石 酸、二-O,O'-对甲苯酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸。外消旋产 物还可以通过手性色谱法拆分，例如使用手性吸附剂的高压液相色谱法 (HPLC)。

此外，本发明化合物(包括其盐)还可以以其水合物的形式获得，或包含 用于其结晶的其它溶剂。本发明化合物由于自身特性可以或者通过设计可 以与可药用的溶剂(包括水)形成溶剂化物；因此，本发明意欲包括溶剂化 物和非溶剂化物两种形式。术语“溶剂化物”是指由本发明化合物(包括其可 药用的盐)与一或多个溶剂分子形成的分子复合物。此类溶剂分子是那些制 药领域中常用的，已知它们对于受体是无害的，例如水、乙醇等。术语“水 合物”是指其中溶剂分子为水的复合物。

本发明化合物，包括其盐、水合物和溶剂化物，由于自身特性或者通 过设计可以形成多晶型物。

通常，本发明化合物可以根据下文提供的流程制备:

合成方法

本发明成分，即根据式(I)或(II)所定义的化合物，可以通过实验部分(参 见下文)的反应流程1－3中明确显示的反应顺序制备。

另一方面，本发明提供了含有本发明化合物和可药用载体的药用组合 物。药用组合物可被配制用于特定的给药途径，如口服给药、胃肠外给药 和直肠给药等。另外，本发明的药用组合物可以制成固体形式(包括但不限 于胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂或栓剂)或液体形式(包括但不限于溶 液剂、混悬剂或乳剂)。该药物组合物可以经过常规的制药操作例如灭菌和 /或可含有常规的惰性稀释剂、润滑剂或缓冲剂以及辅助剂，如防腐剂、稳 定剂、润湿剂、乳化剂和缓冲剂等。

通常，药用组合物为片剂或明胶胶囊，其含有活性成分以及：

a)稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/ 或甘氨酸；

b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二 醇；对于片剂而言，还可以含有：

c)粘合剂，例如硅酸铝镁、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧 甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，还可以含有：

d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、藻酸或其钠盐，或泡腾性混合物；和/ 或

e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。

片剂可以根据本领域已知的方法进行薄膜包衣或肠溶包衣。

适于口服给药的组合物包含有效量的本发明化合物，其形式为片剂、 锭剂、水性或油性混悬剂、分散性粉末或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊、糖 浆剂或酏剂。供口服使用的组合物可以根据制备药用组合物领域中已知的 任何方法制备，该组合物可以含有一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色 剂和防腐剂的成分以便提供药学上美观或适口的制剂。片剂可以包含活性 成分以及适用于片剂生产的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂为例如惰 性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂， 例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；润滑剂，例 如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂是未包衣的或通过已知技术包衣以延 缓在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时期内提供持续作用。例如，可 以采用延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。口服使用的制剂可 以为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或 高岭土)混合；或为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油性介质(如花生油， 液体石蜡或橄榄油)混合。

某些可注射组合物是含水等渗溶液或混悬液，栓剂优选由脂肪乳或混 悬液制备。所述组合物可以被灭菌和/或含有辅助剂，如防腐剂、稳定剂、 润湿剂或乳化剂、溶解促进剂(solution promoter)、用于调节渗透压的盐和 /或缓冲剂。此外，它们还可包含其他治疗上有益的物质。所述组合物可以 分别根据常规混合、制粒或包衣方法制备，且含有约0.1－75％或含有约1 －50％的活性成分。

适用于透皮应用的组合物包含有效量的本发明化合物和合适的载体。 适用于透皮递送的载体包括可吸收的药理学上可接受的溶剂以有助于穿过 个体的皮肤。例如，透皮装置呈绷带形式，其包括背衬部分、含有化合物 和任选载体的贮库、在延长的时间内以可控且预定的速度递送化合物至个 体皮肤的任选的控速屏障以及将该装置固定在皮肤上的工具。

用于局部应用(例如用于皮肤和眼睛)的合适组合物包括水溶液、混悬 液、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂或可喷雾制剂，例如通过气溶胶等来递送。 此类局部递送系统特别适用于真皮应用，例如用于治疗皮肤癌，例如预防 性使用的防晒霜、洗剂、喷雾剂等。因此，它们特别适合在本领域所熟知 的局部制剂、包括化妆品的制剂中使用。此类制剂可以包含增溶剂、稳定 剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。

本文使用的局部应用还可涉及吸入或鼻内应用。它们可适宜地如下递 送：例如通过干粉吸入器以干粉形式(单独、混合物形式，例如含有乳糖的 干掺混物；或例如含有磷脂的混合型组分颗粒)，或通过压力容器、泵、喷 雾器、雾化器或雾化吸入器的气雾剂形式，可以使用或不使用适当的推进 剂。

本发明还提供了包含本发明化合物作为活性成分的无水药用组合物和 剂型，因为水可能促进某些化合物的降解。

本发明的无水药用组合物和剂型可以使用无水或含有低水分的成分且 在低水分或低湿度条件下制备。无水药用组合物以可以保持其无水性质的 方式制备和存储。因此，无水组合物可以使用已知的防水材料包装，从而 使它们可以盛放在合适的配方药盒内。适当包装的示例包括但不仅限于密 封箔、塑料、单位剂量容器(如小瓶)、泡罩包装和条带包装(strip pack)。

本发明还提供了药用组合物和剂型，其含有一种或多种能够降低作为 活性成分的本发明化合物分解速率的成分。在本文中被称作“稳定剂”的此 类成分包括但不限于抗氧化剂如抗坏血酸、pH缓冲剂或盐缓冲剂等。

实验部分

1.实施例中使用的分析方法

实施例中使用的液相色谱：

UPLC/MS：Waters Acquity UPLC+Waters ZQ2000MS

UV-PDA：210–450nM

MS范围：100–1200Da

柱：Acquity HSS T32.1×50mm 1.8μ，60℃

流动相：A:水+0.05％甲酸

B:乙腈+0.04％甲酸

时间[分钟] 流速[ml/min] A[％] B[％] 0.00 1.000 95 5 1.40 1.000 2 98 1.80 1.000 2 98 1.90 1.000 95 5 2.00 1.000 95 5

2.实施例中使用的制备性HPLC

柱：Waters SunFire 30×100mm,C18,5μm

流速：20ml/min

溶剂：乙腈/水/0.1％TFA(梯度洗脱)

3.实施例中使用的快速色谱

柱：Redisept 12g硅胶柱

溶剂：EtOAc/MeOH(+0.1％NH3)1:0(2min)＝>0:1(15min)梯度洗脱 缩写：

DCM：二氯甲烷

DIPEA：N,N-二异丙基乙胺

DMF：二甲基甲酰胺

DMSO：二甲基亚砜

EtOAc：乙酸乙酯

HPLC：高效液相色谱

i-PrOH：异丙醇

MeOH：甲醇

NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮

RT：室温

TFA：三氟乙酸

THF：四氢呋喃

UPLC：超高效液相色谱

在反应流程和/或整个实验部分中提及的化合物可以获自商业，或者如 果无法获得，则在现有领域中有充分的公开，因此可以通过实施相应的反 应步骤而获得。

实施例1.1

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-8-氟-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基氨 基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

实施例1.1根据下面所示流程1合成：

流程1

步骤1：在氮气环境中、于-78℃，将1.6M的n-BuLi己烷溶液(31.3ml, 50mmol)加至THF(45ml)中，随后在15分钟内滴加二异丙基胺(5.06g, 50mmol)。将反应溶液于-78℃搅拌75min。然后10分钟内滴加1A(3.0g, 14.3mmol)的THF(6ml)溶液。将获得的反应混合物于-78℃搅拌1h，然后 滴加DMF(10.0ml,129mmol)。将反应混合物于-78℃搅拌30min，于-50℃ 搅拌30min，最后温热至室温。向反应混合物中加入水，随后加入1MHCl 水溶液直到pH低于7。溶液采用EtOAc萃取，合并的有机层用盐水洗涤， 经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，获得粗品2A，为黄色油状物(4.2g，含有 一些剩余的DMF)。粗品产物无需进一步纯化可以直接用于下一步骤。 UPLC/MS测定C7H2Cl2NO3(M-H)^-的实测值为236.0；UPLC保留时间 为0.75min。

步骤2：向粗品2A(4.2g)的水(85ml)溶液中加入硫酸肼(4.65g,35.7mmol) 和乙酸钠三水合物(5.83g,42.9mmol)。将获得的反应混合物加热至回流1h 直到UPLC-MS监测反应显示原料转化完全。将反应混合物冷却至室温， 用水稀释，用EtOAc萃取。合并的有机层用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤， 经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，获得3A，为黄色固体。UPLC/MS测定 C7H2Cl2FN3O(M-H)^-的实测值为232.0；UPLC保留时间为0.73min。

步骤3：在微波瓶中，将4A(232mg,1.41mmol)和DIPEA(249mg, 1.93mmol)加至3A(1.29mmol,301mg)的i-PrOH(3ml)溶液中。将瓶上盖， 将反应混合物在氮气环境中于110℃加热15h。冷却至室温后，将反应混 合物倒入水中，用EtOA萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥， 过滤并减压浓缩。残留物用DCM研磨，过滤并真空干燥，获得粗品5A， 为棕色粉末。UPLC/MS测定C16H10ClF2N5O(M-H)^-的实测值为360.0； UPLC保留时间为1.17min。

步骤4：在微波瓶中，将6(49mg,0.23mmol)和DIPEA(30mg,0.23mmol) 加至5A(55mg,0.15mmol)的NMP(5ml)溶液中。将瓶上盖，将反应混合物 在氮气环境中于110℃加热18h。冷却至室温后，将反应混合物倒入水中， 用EtOA萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓 缩，获得粗品7A，为黑色油状物。该粗品产物无需进一步纯化可以直接用 于下一步骤。UPLC/MS测定C27H31F2N7O3(M+H)⁺的实测值为540.1； UPLC保留时间为1.33min。

步骤5：向粗品7A(82mg,0.15mmol)的DCM(10ml)溶液中加入TFA (2ml)，将获得的溶液于室温下搅拌5h。将反应混合物减压浓缩，将粗品 产物溶于MeOH，通过微孔滤器过滤，经制备性HPLC纯化，获得实施例 1.1，为黄色固体。¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.68(s,1H)； 10.94(s,1H)；10.56(s,1H)；8.23(s,1H)；7.95-7.85(bs,2H)；7.43-7.37(d,1H)； 7.32-7.26(m,1H)；7.14(s,1H)；7.08-7.02(d,2H)；3.92-3.82(m,1H)； 3.45-3.35(m,1H)；2.23(s,3H)；1.84-1.46(m,4H)；1.42-1.14(m,4H)； UPLC/MS测定C22H23F2N7O(M+H)⁺的实测值为440.1；UPLC保留时 间为0.77min。

实施例1.2根据实施例1.1所述类似方法制备。与上述反应流程的唯一 差别是在反应步骤3中采用5-氨基喹啉代替化合物4A作为反应物。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-8-氟-5-(喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.72(s,1H)；11.91(s,1H)； 9.02-8.97(dd,1H)；8.60-8.54(dd,1H)；8.39-8.45(dd,1H)；8.29(s,1H)； 7.85-7.79(m,2H)；7.75-7.65(m,3H)；7.32-7.26(d,1H)；4.12-4.06(m,1H)； 3.58-3.52(m,1H)；1.85-1.75(m,2H)；1.72-1.62(m,2H)；1.58-1.32(m,4H)； UPLC/MS测定C22H22FN7O(M+H)⁺的实测值为420.1；UPLC保留时间 为0.54min。

3-甲基-5-氟-7-氨基-吲哚的制备

将7-溴-5-氟-3-甲基-吲哚(2.5g)、Cu(0.77g)、CuBr(1.57g)和NH₃(30ml 的33％水溶液)的混合物在高压釜中于170℃加热2h。将混合物用水稀释， 用EtOA萃取。将有机相干燥，除去溶剂，获得为油状物的3-甲基-5-氟-7- 氨基-吲哚，其无需进一步纯化可以直接使用。UPLC/MS测定 C9H9FN2(M+H)⁺的实测值为165.2。

5-氟-7-氨基-吲哚的制备

将7-溴-5-氟-吲哚(1g)、Cu(0.31g)、CuBr(0.64g)和NH₃(30ml的33％ 水溶液)的混合物在高压釜中于155℃加热1.5h。将混合物用水稀释，用 EtOA萃取。将有机相干燥，除去溶剂，获得为油状物的5-氟-7-氨基-吲哚， 其无需进一步纯化可以直接使用。UPLC/MS测定C8H7FN2(M+H)⁺的实 测值为151.0。

实施例2.1

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮

实施例2.1根据下面所示流程2合成：

流程2

步骤1：4,6-二氯代-1-羟基-1H-呋喃并[3,4-c]吡啶-3-酮

于-78℃，将正-丁基锂(46.7ml)加至100ml的THF中，随后在15分钟 内加入二异丙基胺(16.65ml)。将混合物于-78℃搅拌1h，然后在10分钟内 加入2,6-二氯代烟酸(7.12g)。于-78℃持续搅拌2h，然后滴加DMF (23.26ml)，保持温度T<-70℃。将混合物于-78℃搅拌1h，温热至-50℃30 min，温热至室温。将混合物通过小心地加入2N HCl(167ml)骤冷直到达 到酸性pH。混合物用EtOAc萃取，有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。 蒸发溶剂后，粗品产物无需进一步纯化可以直接使用：棕色固体。

UPLC/MS测定C7H3Cl2N(M-H)^-的实测值为217.9；UPLC保留时间 为0.61min。

步骤2：5,7-二氯代-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

向搅拌下的4,6-二氯代-1-羟基-1H-呋喃并[3,4-c]吡啶-3-酮(9.37g)的水 (100ml)混悬液中加入硫酸肼(10.58ml)和乙酸钠(13.56g)。将反应混合物于 回流下加热并搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，用水(150ml)稀释，用 EtOAc萃取(2×75ml)。合并的有机层用饱和的Na₂CO₃溶液洗涤，经硫酸 钠干燥。蒸发至干，获得需要的产物，为棕色固体。

UPLC/MS测定C7H3Cl2N3(M+H)⁺的实测值为214.0/215.8/216.8； UPLC保留时间为0.62min。

步骤3：7-氯代-5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4- 酮

向可密封瓶中的5,7-二氯代-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮(180mg, 0.833mmol)的DMSO(1ml)溶液中加入DIPEA(0.189ml,1.083mmol)和3- 甲基-1H-吲哚-7-胺(158mg,1.083mmol)。将瓶上盖密封，将混合物在沙浴 上于140℃加热1h。将获得的混合物倒入水(20ml)中，用EtOAc(20ml)萃 取。有机相用水洗涤，然后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，然后真空浓缩。 残留物用DCM研磨，然后通过过滤收集并干燥，获得目标化合物，为深 黄色固体。

UPLC/MS测定C16H12ClN5O(M+H)⁺的实测值为326.1；UPLC保留 时间为1.10min。

步骤4：{(1S,2R)-2-[5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-4-氧代-3,4-二氢-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-7-基氨基]-环己基}-氨基甲酸叔-丁基酯

向可密封玻璃瓶中的7-氯代-5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮(177mg,0.543mmol)的NMP(1ml)溶液中加入DIPEA (0.190ml,1.087mmol)和(1S,2R)-2-氨基环己基氨基甲酸叔-丁基酯(233mg, 1.087mmol)。将瓶上盖密封，将混合物在沙浴上于120℃加热3天。将获 得的混合物倒入水(20ml)中，用EtOAc萃取(20ml)。有机相用水洗涤，然 后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物用DCM研磨，然 后通过过滤收集并干燥，获得目标化合物，为粘性固体。

步骤5(方法A)：

将粗品胶溶于DCM(4ml)/MeOH(0.5ml)，向其中加入4N HCl的二烷(1.358ml,5.43mmol)溶液。将反应混合物于室温下搅拌4h，然后真空浓 缩。获得的残留物用乙醚研磨。弃去溶剂，残留物在旋转蒸发仪上干燥。 将残留的粗品固体残留物溶于2ml NMP，通过微孔滤器过滤，经制备性 HPLC纯化。合并含有产物的组分，采用scx-2短柱处理，通过MeOH中 的1N NH₃溶液洗脱释放游离碱。除去溶剂，获得为黄色固体的目标化合 物。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.11(br.s,1H)；11.10(s,1H)； 10.39(s,1H)；7.90(s,1H),7.44-7.49(m,1H)；7.24-7.29(d,1H)；7.05(br.s,1H)； 6.93-7.00(t,1H)；6.85-7.10(br.s,1H)；3.65-3.79(m,1H)；2.88-2.95(m,1H)； 2.28(s,3H)；0.71-1.79(m,8H)；UPLC/MS测定C21H22N6O2(M+H)⁺的实 测值为404.2；UPLC保留时间为0.76min。

步骤5(方法B)：7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚-7- 基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

在20ml圆底烧瓶中，将{(1S,2R)-2-[5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-4- 氧代-3,4-二氢-吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基氨基]-环己基}-氨基甲酸叔-丁基酯 (76mg,0.150mmol)溶于DCM(1ml)，加入TFA(0.347ml,4.51mmol)获得黄 色溶液。将混合物于室温下搅拌直到反应完全(1h)。反应混合物用30ml EtOAc稀释，用20ml 5％Na₂CO₃溶液洗涤，随后用2×30ml水洗涤。水 相用30ml EtOAc再萃取。将合并的有机相干燥并蒸发，获得黄色固体。 粗品产物经快速色谱纯化，最后在t-BuOH中冷冻干燥。¹H-NMR、 UPLC/MS和UPLC保留时间如上所述。

实施例2.2–2.20根据实施例2.1所述类似方法制备。在上述反应流程 2中唯一有差别的反应物是上述化合物4的流程中列示的适当的取代的苯 胺-化合物。

实施例2.2根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用1-甲基 -1H-吲哚-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.162(br.s,1H)；11.90(s,1H)； 8.30-8.36(m,1H)；7.92(s,1H)；7.33-7.36(d,1H)；7.09-7.23(m,3H)； 6.57-6.59(d,1H)；6.05(s,1H)；3.92-4.15(m,1H)；3.81(s,3H)；3.18-3.23(m, 1H)；1.32-1.81(m,8H)；UPLC/MS测定C22H25N7O(M+H)⁺的实测值为 404.3；UPLC保留时间为0.75min。

实施例2.3根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用2-甲基 -2H-吲唑-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-2H-吲唑-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.38(s,1H)；11.97(s,1H)； 8.33(s,1H)；7.98-8.08(m,1H)；7.80(br.s,2H)；7.38(br.s,1H)；7.29-7.20(m, 2H)；6.18(s,1H)；4.31(br.s,1H)；4.22(s,3H)；3.69(br.s,1H)；1.84-1.47(m, 8H)；UPLC/MS测定C21H24N8O(M+H)⁺的实测值为405.1；UPLC保留 时间为0.64min。

实施例2.4根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用5-氟-3- 甲基-1H-吲哚-7-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-3H- 吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.32(s,1H)；11.22(s,1H)；10.56(s,1H)； 8.03(s,1H)；7.65(br.s,2H)；7.51(d,1H)；7.25(br.s,1H)；7.14(s,1H)；7.03(dd, 1H)；6.12(s,1H)；3.97(br.s,2H)；3.42(br.s,1H)；2.2(s,3H)；1.74-1.33(m, 8H)；UPLC/MS测定C22H24FN7O(M+H)⁺的实测值为422.3；UPLC保 留时间为0.75min。

实施例2.5根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹啉-6- 基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-6-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.3(br.s,1H)；11.9(s,1H)； 8.76(dd,1H)；8.56(br.s,1H)；8.25(d,1H)；8.03-7.91(m,3H)；7.52(dd,1H)； 7.30(br.s,1H)；6.18(s,1H)；4.30(br.s,1H)；3.40(br.s,1H)；1.95-1.20(m,8H)； UPLC/MS测定C22H23N7O(M+H)⁺的实测值为402.3；UPLC保留时间为 0.62min。

实施例2.6根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用苯并呋 喃-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(苯并呋喃-4-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.23(br.s,1H)；11.98(s,1H)； 8.40-8.48(m,1H)；8.02-8.03(d,1H)；7.96(s,1H)；7.18-7.34(m,3H)； 6.95-6.98(d,1H)；6.11(s,1H)；3.90-4.09(m,1H)；3.14-3.21(m,1H)； 1.30-1.79(m,8H)；UPLC/MS测定C21H22N6O2(M+H)⁺的实测值为391.2； UPLC保留时间为0.76min。

实施例2.7根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用苯并[b] 噻吩-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(苯并[b]噻吩-4-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.41(s,1H)；12.15(s,1H)； 8.07(s,1H)；7.86(d,1H)；7.78(br.s,2H)；7.71(d,1H)；7.62(d,1H)；7.40(dd, 2H)；6.18(s,1H)；4.30(br.s,1H)；3.65(br.s,1H)；1.91-1.46(m,8H)；UPLC/MS 测定C21H22N6OS(M+H)⁺的实测值为407.3；UPLC保留时间为0.79 min。

实施例2.8根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用2-甲基- 喹啉-5-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.46(s,1H)；12.27(br.s,1H)； 8.75-8.58(m,2H)；8.10(s,1H)；7.89-7.67(m,5H)；7.42(br.s,1H)；6.22(s,1H)； 4.16(br.s,1H)；3.54(br.s,1H)；2.78(s,3H)；1.96-1.35(m,8H)；UPLC/MS 测定C23H25N7O(M+H)⁺的实测值为416.1；UPLC保留时间为0.50min。

实施例2.9根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用1H-吲 哚-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.15(br.s,1H)；11.89(s,1H)； 11.18(s,1H)；8.25-8.30(d,1H)；7.92(s,1H)；7.34-7.37(t,1H)；7.03-7.22(m, 3H)；6.58-6.62(m,1H)；6.05(s,1H)；3.96-4.10(m,1H)；3.17-3.22(m,1H)； 1.31-1.80(m,8H)；UPLC/MS测定C21H23N7O(M+H)⁺的实测值为390.2； UPLC保留时间为0.67min。

实施例2.10根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用1H-吲 唑-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲唑-4-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):13.20(br.s,1H)；12.20(s,1H)； 8.22-8.35(m,1H)；8.19(s,1H)；7.98(s,1H)；7.13-7.47(m,3H)；6.13(s,1H)； 3.90-4.19(m,1H)；3.15-3.28(m,1H)；1.22-1.84(m,8H)；UPLC/MS测定 C20H22N8O(M+H)⁺的实测值为391.1；UPLC保留时间为0.59min。

实施例2.11根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹啉-3- 基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-3-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.2(br.s,1H)；11.9(s,1H)； 8.96(br.s,2H)；8.02(s,2H)；7.88(br.s,1H)；7.68-7.58(m,2H)；7.30(br.s,1H)； 6.2(s,1H)；4.20(br.s,1H)；3.40(br.s,1H)；1.90-1.20(m,8H)；UPLC/MS 测定C22H23N7O(M+H)⁺的实测值为402.1；UPLC保留时间为0.67min。

实施例2.12根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用1H-吲 哚-7-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.09(br.s,1H)；11.09(s,1H)； 10.75(s,1H)；7.89(s,1H)；7.40-7.44(d,1H)；7.33-7.37(d,1H)；7.26-7.28(t, 1H)；6.88-7.05(br.s,1H)；6.94-6.99(t,1H)；6.45-6.48(m,1H),6.01(s,1H)； 3.62-3.74(m,1H)；2.88-2.92(m,1H)；1.05-1.59(m,8H)；UPLC/MS测定 C21H23N7O(M+H)⁺的实测值为390.1；UPLC保留时间为0.70min。

实施例2.13根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用8-甲基- 喹啉-5-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(8-甲基-喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.40(s,1H)；12.00(s,1H)； 9.00(dd,1H)；8.56(d,1H)；8.36(br.s,1H)；8.06(s,1H)；7.84-7.56(m,4H)； 7.32(br.s,1H)；6.16(s,1H)；4.07(br.s,1H)；3.50(br.s,1H)；2.72(s,3H)； 1.84-1.55(m,8H)；UPLC/MS测定C23H25N7O(M+H)⁺的实测值为416.1； UPLC保留时间为0.60min。

实施例2.14根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用7-氨基 -1H-吲哚-3-甲腈替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-[7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-4-氧代-3,4-二氢-吡啶并[3,4-d]哒嗪 -5-基氨基]-1H-吲哚-3-甲腈

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.28(s,1H)；11.96(br.s,1H)； 10.96(s,1H)；8.20(s,1H)；8.01(s,1H)；7.56(br.s,2H)；7.49(d,1H)；7.40(d, 1H)；7.24(dd,1H)；7.16(br.s,1H)；6.09(s,1H)；3.61(br.s,1H)；3.14(br.s, 1H)；1.58-1.17(m,8H)；UPLC/MS测定C22H22N8O(M+H)⁺的实测值为 415.0；UPLC保留时间为0.64min。

实施例2.15根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用7-甲基 -1H-吲哚-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(7-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.19(br.s,1H)；11.81(s,1H)； 11.19(s,1H)；8.15-8.19(d,1H)；7.92(s,1H)；7.34-7.37(t,1H)；7.12-7.23(br.s, 1H)；6.83-6.86(d,1H)；6.59-6.62(m,1H)；6.01(s,1H)；3.98-4.13(m,1H)； 3.21-3.27(m,1H)；2.46(s,3H)；1.17-1.78(m,8H)；UPLC/MS测定 C22H25N7O(M+H)⁺的实测值为404.1；UPLC保留时间为0.68min。

实施例2.16根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹啉-5- 基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-5-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.45(s,1H)；12.21(s,1H)； 9.08-8.89(dd,1H)；8.65(d,1H)；8.58(br.s,1H)；8.09(s,1H)；7.92-7.76(m, 5H)；7.37(br.s,1H)；6.21(s,1H)；4.15(br.s,1H)；3.53(br.s,1H)；1.84-1.35(m, 8H)；UPLC/MS测定C22H23N7O(M+H)⁺的实测值为402.3；UPLC保留 时间为0.62min。

实施例2.17根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法A进行。上述反应流程中的唯一区别是采用2-甲基 -1H-吲哚-4-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(2-甲基-1H-吲哚-4-基氨基)-3H-吡啶 并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.15(br.s,1H)；11.75(s,1H)； 10.99(s,1H)8.17-8.26(s,1H)；7.09-7.22(m,1H)；6.94-7.00(m,2H)； 6.29-6.32(m,1H)；6.05(s,1H)；3.97-4.13(m,1H)；3.19-3.24(m,1H)；2.45(s, 3H)；1.22-1.79(m,8H)；UPLC/MS测定C22H25N7O(M+H)⁺的实测值为 404.1；UPLC保留时间为0.67min。

实施例2.18根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹喔啉 -6-基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹喔啉-6-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.35(br.s,1H)；8.95(d,2H)； 8.80(s,1H)；8.04(br.s,2H)；7.85(s,1H)；6.20(s,1H)；4.24(br.s,1H)；3.44(br.s, 1H)；1.95-1.20(m,8H)；UPLC/MS测定C21H22N8O(M+H)⁺的实测值为 403.1；UPLC保留时间为0.62min。

实施例2.19根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹啉-7- 基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.25(br.s,1H)；11.88(s,1H)； 8.83(dd,1H)；8.76(d,1H)；8.28(d,1H)；7.96(s,1H)；7.94(s,1H)；7.72(dd, 1H)；7.36(dd,1H)；7.30-7.22(m,1H)；6.16(s,1H)；4.18(br.s,1H)；3.20(br.s, 1H)；1.85-1.20(m,8H)；UPLC/MS测定C22H23N7O(M+H)⁺的实测值为 402.1；UPLC保留时间为0.54min。

实施例2.20根据实施例2.1所述类似方法制备。BOC-去保护通过实施 例2.1步骤5所示方法B进行。上述反应流程中的唯一区别是采用喹啉-8- 基胺替代在反应步骤3中作为反应物的化合物4。

7-((1R,2S)-2-氨基-环己基氨基)-5-(喹啉-8-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):13.03(s,1H)；12.21(s,1H)； 9.05(br.s,1H)；8.95(dd,1H)；8.39(dd,1H)；8.02(s,1H)；7.84(br.s,2H)； 7.68-7.51(m,3H)；7.35(br.s,1H)；6.21(s,1H)；4.40(br.s,1H)；3.74(br.s,1H)； 1.93-1.42(m,8H)；UPLC/MS测定C22H23N7O(M+H)⁺的实测值为402.3； UPLC保留时间为0.74min。

实施例3.17-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚 -7-基氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

根据下面的流程3合成实施例3.1。

流程3

步骤1－步骤3，如实施例2.1所述。

步骤4：{(3R,4R)-4-[5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-4-氧代-3,4-二氢-吡 啶并[3,4d]-哒嗪-7-基氨基]-四氢-吡喃-3-基}-氨基甲酸叔-丁基酯

向在微波管中的5,7-二氯代-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮(100mg)的 NMP(1ml)溶液中加入DIPEA(0.107ml)和((3R,4R)-4-氨基-四氢-吡喃-3- 基)-氨基甲酸叔-丁基酯(133mg)，盖上管帽，于100℃的沙浴中加热3天， 冷却至室温，反应混合物用30ml EtOAc稀释，用盐水(2×50ml)洗涤，水 相用EtOAc(30ml)再萃取，干燥合并的有机相，蒸发至干燥，得到黄色固 体。通过快速色谱纯化。

步骤5:7-((3R,4R)-3-氨基四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-5-(3-甲基-1H-吲哚 -7-基氨基)吡啶并[4,3-d]哒嗪-4(3H)-酮

向{(3R,4R)-4-[5-(3-甲基-1H-吲哚-7-基氨基)-4-氧代-3,4-二氢-吡啶并 [3,4-d]哒嗪-7-基氨基]-四氢-吡喃-3-基}-氨基甲酸叔-丁基酯(76mg)的DCM 溶液中加入TFA(0.347ml)，于RT将反应混合物搅拌1h，用EtOAc(30ml) 稀释，用5％Na₂CO₃溶液(20ml)和水(2×30ml)洗涤，水相用EtOAc(30ml) 再萃取，干燥合并的有机层，蒸发得到黄色固体，粗品产物经制备性HPLC 纯化，得到为黄色固体的产物。

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆):12.12(br.s,1H)；10.96(s,1H)；10.35(s, 1H)；7.91(s,1H)；7.23-7.43(m,2H)；6.88-7.11(m,3H)；6.00(s,1H)； 3.62-3.86(m,2H)；3.51(d,1H)；3.18(d,1H)；3.10(br.s,1H)；2.62-2.76(m,1H)； 2.28(d,3H)；1.54-1.70(m,1H)；1.49(br.s,1H)；1.41(d,1H)；UPLC/MS测 定C21H23N7O2(M+H)⁺的实测值为406.2；UPLC保留时间为0.67min。

根据实施例3.1所述的类似方法，制备实施例3.2。上述反应流程中的 唯一不同之处在于，在反应步骤3中采用苯并[b]噻吩-4-基胺代替化合物4 作为反应物。

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(苯并[b]噻吩-4-基氨基)-3H- 吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后，对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.43(s,1H)；12.08(s,1H)； 8.37(br.s,1H)；8.08(s,1H)；7.94(br.s,2H)；7.86(d,1H)；7.73(d,1H)；7.60(d, 1H)；7.56(br.s,1H)；7.43(t,1H)；6.15(s,1H)；4.26(br.s,1H)；3.99(dd,1H)； 3.91(d,1H)；3.70(br.s,1H)；3.68-3.57(m,2H)；2.03(qd,1H)；1.76(d,1H)； UPLC/MS测定C20H20N6O2S(M+H)⁺的实测值为409.3；UPLC保留时 间为0.69min。

根据实施例3.1所述的类似方法，制备实施例3.3。上述反应流程中的 唯一不同之处在于，在反应步骤3中采用5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基胺代替 化合物4作为反应物。

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(5-氟-3-甲基-1H-吲哚-7-基 氨基)-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后，对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.34(s,1H)；11.08(s,1H)； 10.58(s,1H)；8.04(s,1H)；7.82(br.s,3H)；7.38(br.s,2H)；7.15(s,1H)；7.08(dd, 1H)；6.09(s,1H)；3.83-3.98(m,2H)；3.69(d,1H)；3.62-3.22(m,3H)；2.28(s, 3H)；1.91(dd,1H)；1.62(d,1H)；UPLC/MS测定C21H22FN7O2(M+H)⁺的实测值为424.2；UPLC保留时间为0.72min。

根据实施例3.1所述的类似方法，制备实施例3.4。根据实施例2.1步 骤5所述的方法A进行BOC-去保护。上述反应流程中的唯一不同之处在 于，在反应步骤3中采用1H-吲哚-7-基胺代替化合物4作为反应物。

7-((3R,4R)-3-氨基-四氢-吡喃-4-基氨基)-5-(1H-吲哚-7-基氨基)-3H-吡 啶并[3,4-d]哒嗪-4-酮

经制备性HPLC纯化后，对化合物进行鉴定。

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d6,25℃):12.15(br.s,1H)；11.00(s,1H)； 10.75(s,1H)；7.92(s,1H)；7.35-7.39(d,1H)；7.29-7.34(d,1H)；7.25-7.28(t, 1H)；7.00-7.14(br.s.,1H)；6.95-7.00(t,1H)；6.45-6.48(m,1H),6.01(s,1H)； 3.52-3.75(m,2H)；3.45-3.54(m,1H)；3.10-3.19(m,2H)；1.35-1.69(m,2H)； UPLC/MS测定C21H23N7O(M+H)⁺的实测值为392.1；UPLC保留时间为 0.58min。

生物药学部分

游离形式或可药用盐形式的本发明化合物如在下面实验中所述具有有 价值的药理学性质，因此可以适用于治疗。

SYK酶试验

在微流控芯片迁移试验(chip based microfluidic mobilitiy shift assay) 中对多个本发明化合物进行试验。所有试验均在384孔微量板中进行。每 个试验板含有8-点系列稀释的40个试验化合物以及4份8-点系列稀释的 星孢菌素作为参比化合物，还有16个高-和16个低的对照。液体处理和培 养步骤在配备Innovadyne Nanodrop Express的Thermo CatX工作站上进 行。在移液步骤之间，采用洗涤缓冲液在洗涤循环中清洁管头。通过每孔 加入50nl化合物的90％DMSO溶液制备试验板。通过逐步向每孔中加入 4.5μl的肽/ATP-溶液(50mM HEPES,pH 7.5、1mM DTT、0.02％Tween 20、0.02％BSA、0.6％DMSO、10mMβ-甘油磷酸盐和10μM原钒酸钠、 1mM MgCl₂、3mM MnCl₂、4μM ATP、4μM肽 (5-Fluo-Ahx-GAPDYENLQELNKK-Amid))和每孔4.5μl的酶溶液(50mM HEPES,pH 7.5、1mM DTT、0.02％Tween 20、0.02％BSA、0.6％DMSO、 10mMβ-甘油磷酸盐和10μM原钒酸钠、1mM MgCl₂、3mM MnCl₂、昆虫 细胞自身产生的4nM SYK(SYK(2-635))启动激酶反应。将激酶反应物于 30℃温育60分钟，最后通过每孔加入16μl中止溶液(100mM HEPES pH 7.5、5％DMSO、0.1％Caliper涂层试剂(coating reagent)、10mM EDTA 和0.015％Brij35)结束反应。将酶反应结束的板转移至Caliper LC3000工 作站以读板。采用Caliper微流控迁移技术分离磷酸化和未磷酸化的肽。 简而言之，将获自激酶反应结束的样品施用于芯片。通过恒定的缓冲液流 动使得分析物转运通过芯片，底物肽的迁移通过其标记的荧光信号监测。 磷酸化的肽(产物)和未磷酸化的肽(底物)通过其电荷/质量比在电场中分 离。通过形成的磷-肽的量计算激酶活性。通过非线性回归分析采用不同化 合物浓度的抑制百分比的值确定IC₅₀值。

化合物稀释液的制备

将试验化合物溶于DMSO(10mM)并转移至1.4mL具有独特的2D矩 阵的平底或V-形Matrix试管中。如果不即时使用，将储备液于+2℃储存。 在试验过程中，将瓶解冻，通过扫描仪鉴定，由此产生的工作表(working  sheet)用于指导随后的工艺步骤。

在96孔板中制备化合物稀释液。这种格式能够分析最多40个不同的 试验化合物，每个化合物8个浓度(单点)，包括4个参比化合物。稀释方 案包括“预稀释板”、“主板(master plates)”和“试验板”的产生。

预稀释板：96孔聚丙烯板用作预稀释板。制备共4种预稀释板，包括 10种试验化合物，每一种化合物在板上的位置为A1-A10，还包括位于A11 的一种标准化合物以及位于A12的一种DMSO对照。所有稀释步骤均在 Hamilton STAR机器手上进行。

主板：将4种“预稀释板”中的30μL的各个化合物稀释液，包括标准 化合物和对照，转移至384孔“主板”，分别包括在90％的DMSO中的下 列浓度：1’810、362、72.5、54.6、14.5、2.9、0.58和0.12μM。

试验板：然后，通过HummingBird 384-通道分配器，将“主板”中的 50nL每种化合物稀释液移液至384-孔“试验板”中。这些板可以直接用于试 验，进行该试验的总体积为9.05μL。这使得化合物在试验中的终浓度为 10、2.0、0.4、0.08、0.016、0.0032、0.00064和0.000128μM，DMSO的 终浓度为0.5％。

在该测定中，本发明化合物显示如下表所示的IC₅₀值：

实施例 IC50[μM] 1.1 0.002 1.2 0.044 2.1 0.0016 2.2 0.0006 2.3 0.0011 2.4 0.0013 2.5 0.0016 2.6 0.002 2.7 0.0021

2.8 0.0023 2.9 0.0027 2.10 0.0052 2.11 0.0054 2.12 0.007 2.13 0.007 2.14 0.008 2.15 0.009 2.16 0.009 2.17 0.016 2.18 0.026 2.19 0.042 2.20 0.045 3.1 0.009 3.2 0.0018 3.3 0.002 3.4 0.032

[μM]表示微升

用途部分

因此，总的来讲，本发明化合物可以用于预防或治疗其中例如SKY抑 制能够起作用的病症或疾病，例如B淋巴细胞、骨髓细胞、中性粒细胞、 肥大细胞、血小板和/或嗜酸性粒细胞介导的疾病或病症，例如急性或慢性 器官或组织异种-或同种移植的排斥反应、动脉粥样硬化、由于血管损伤例 如血管成形术导致的血管闭塞、再狭窄、高血压、心力衰竭、慢性阻塞性 肺病、CNS疾病例如阿尔茨海默病或肌萎缩侧索硬化症、癌症、感染性疾 病例如AIDS、感染性休克或成人呼吸窘迫综合症、局部缺血/再灌注损伤 例如心肌梗塞、中风、内脏局部缺血、肾衰竭或出血性休克或外伤性休克。

本发明成分也可以用于治疗和/或预防急性或慢性感染性疾病或病症 或者自身免疫性疾病，例如类风湿性关节炎、骨关节炎、系统性红斑狼疮、 桥本氏甲状腺病、多重硬化症、重症肌无力、糖尿病(I和II型)及其相关疾 病、自身免疫和炎性疾病的血管临床表现(脉管炎)、呼吸道疾病例如哮喘 或炎性肝损伤、炎性肾小球损伤、免疫介导的疾病或病症的皮肤临床表现、 炎性和高增生性皮肤病(例如银屑病、过敏性皮炎、过敏性接触性皮炎、刺 激下接触性皮炎和湿疹性皮炎、脂溢性皮炎)、炎性眼病例如干燥综合征、 角膜结膜炎或葡萄膜炎、炎性肠病、克隆病或溃疡性结肠炎。免疫和/或特 发性血细胞减少症、过敏、创伤愈合、移植物抗个体病。

本发明化合物还可以用于预防或治疗肿瘤，例如脑和其他中枢神经系统 肿瘤(例如脑膜瘤、脑瘤、脊髓瘤、脑神经瘤和其它中枢神经系统部位的肿 瘤)；头颈癌；乳腺肿瘤；消化系统肿瘤(例如心脏、纵膈和胸膜肿瘤及其它 胸腔器官肿瘤，血管肿瘤和与血管组织相关的肿瘤)；排泄系统肿瘤(例如肾、 肾盂、输尿管、膀胱、其它和未指定的泌尿器官)；胃肠道肿瘤(例如食管、 胃、小肠、结肠、结直肠、直肠乙状结肠、直肠、肛门和肛管)，与肝脏和 肝内胆管、胆囊、其它和未指定胆管部位有关的肿瘤、胰腺、其它消化器官 肿瘤)；头颈；口腔(唇、舌、牙龈、口底、上颚和口腔其它部位、腮腺和唾 液腺其它部位、扁桃体、咽部、鼻咽部、梨状隐窝、下咽部以及唇、口腔和 咽部的其它部位)；生殖系统肿瘤(例如外阴、阴道、子宫颈、子宫体、子宫、 卵巢以及与女性生殖器官有关的其它部位、胎盘、阴茎、前列腺、睾丸以及 与男性生殖器官有关的其它部位)；呼吸道肿瘤(例如鼻腔和中耳、副鼻窦、 喉部、气管、支气管和肺，例如小细胞肺癌或非小细胞肺癌)；骨骼系统肿 瘤(例如四肢的骨和关节软骨、骨关节软骨和其它部位)；皮肤肿瘤(例如皮肤 恶性黑素瘤、非黑素瘤皮肤癌、皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、间皮瘤、 卡波氏肉瘤)；与其它组织有关的肿瘤，包括外周神经系统和植物神经系统、 结缔组织和软组织、腹膜后腔和腹膜、眼和附件、甲状腺、肾上腺和其它内 分泌腺体以及相关结构、淋巴结的继发性和未指定恶性肿瘤、呼吸系统和消 化系统的继发性恶性肿瘤以及其它部位的继发性恶性肿瘤、血液和淋巴系统 肿瘤(例如霍奇金病、非霍奇金病、伯基特淋巴瘤、AIDS-相关性淋巴瘤、恶 性免疫增生性疾病、多发性骨髓瘤和恶性血细胞肿瘤、淋巴性白血病、急性 或慢性骨髓性白血病、急性或慢性淋巴细胞性白血病、单核细胞白血病、未 指定细胞类的其它白血病例如弥漫性大B细胞淋巴瘤、未指定细胞类型的白 血病，淋巴、血液和相关组织的其它和未指定恶性肿瘤，例如弥漫性大细胞 淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤或皮肤T-细胞淋巴瘤)。骨髓癌包括例如急性或慢性 骨髓性白血病。

在上文中和后面提及肿瘤、肿瘤性疾病、癌或癌症时，同样也包括在原 发器官或组织和/或任何其它部位的转移，无论所述肿瘤和/或转移的部位为 何。

剂量、给药：

对于上述应用而言，需要的剂量当然取决于给药方式、待治疗的具体 疾病以及需要的疗效。通常，日剂量为约0.02－25mg/kg体重可以获得系 统性的满意效果。在大型哺乳动物例如人类中，指定的日剂量的范围通常 为约0.2mg至约2g，其可以便利地给药，例如以每天至多4次的分剂量给 药，或者以缓释形式给药。用于口服给药的适当的单位剂型通常可以含有 约0.1－500mg活性成分。

本发明化合物可以通过任何常规途径给药，特别是胃肠外途径，例如以 注射用溶液剂或混悬剂的形式给药；肠内途径，例如口服途径，例如以片剂 或胶囊剂的形式给药；局部途径，例如以洗剂、凝胶剂、软膏或霜剂的形式 给药；或者通过鼻腔途径；或以栓剂形式给药。局部给药可以例如给药于皮 肤。局部给药的其它形式可以用于眼部。含有本发明化合物以及至少一种可 药用的载体或稀释剂的药用组合物以常规方式通过与可药用的载体或稀释 剂混合而生产。

本发明化合物可以以例如上述游离形式或可药用盐形式给药。此类盐 可以通过常规方式制备，其通常具有与游离化合物相同级数的活性。

组合产品

本发明化合物可以作为单一的活性成分给药，或者与其它用于治疗肿 瘤疾病、炎性疾病的药物或者免疫调节方案一起施用。例如，本发明化合 物可以与在上述各种疾病中有效的活性成分组合使用，例如环孢菌素、雷 帕霉素或其免疫抑制类似物或衍生物，例如环孢菌素A、环孢菌素G、Isa tx247、FK-506、西罗莫司或依维莫司；糖皮质激素，例如泼尼松；环磷酰 胺；硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；金盐、柳氮磺胺吡啶、抗疟药；来氟米特；咪 唑立宾；麦考酚酸；麦考酚酸酯；15-脱氧金瓜菌素；能够促进淋巴细胞寻 靶活性的EDG受体激动剂，例如FTY720或其类似物；免疫抑制多克隆 抗体，例如白细胞受体的多克隆抗体，如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、 CD25、CD28、CD40、CD45、CD58、CD80、CD86、CD152、CD137、 CD154、ICOS、LFA-1、VLA-4或其配体；或其他免疫调节化合物，例如 CTLA4Ig。

本发明化合物也可以有益地与其它抗增生性药物组合使用。此类抗增 生性药物包括但不限于芳香酶抑制剂、抗雌激素药物、拓扑异构酶I抑制 剂、拓扑异构酶II抑制剂、胃管活性剂、烷化剂、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、 法呢基转移酶抑制剂、COX-2抑制剂、MMP抑制剂、mTOR抑制剂、抗 肿瘤抗代谢物、铂化合物、降低蛋白激酶活性的化合物和其它抗血管生成 的化合物、促性激素释放素激动剂、抗雄激素药物、bengamides、二膦酸 盐类、抗增生性抗生素和替莫唑胺()。

本文中使用的术语“芳香酶抑制剂”是指能够抑制雌激素产生的化合 物，即可以将底物雄烯二酮和睾酮分别转化为雌酮和雌二醇的化合物。该 术语包括但不限于甾体类，尤其是依西美坦和福美司坦；特别是非甾体类， 尤其是氨鲁米特、伏氯唑、法曲唑、阿那曲唑，更特别是来曲唑。含有作 为芳香酶抑制剂的抗肿瘤药的本发明的组合产品特别可以用于治疗激素受 体阳性的乳腺肿瘤。

本文中使用的术语“抗雌激素药”是指能够在雌激素受体水平上对抗雌 激素作用的化合物。该术语包括但不限于他莫昔芬、氟维司群、雷洛昔芬 和盐酸雷洛昔芬。

本文中使用的术语“拓扑异构酶I抑制剂”包括但不限于拓扑替康、伊 立替康、9-硝基喜树碱和大分子喜树碱共轭物PNU-166148(WO99/17804 中的化合物A1)。

本文中使用的术语“拓扑异构酶II抑制剂”包括但不限于蒽环霉素类 (antracyclines)多柔比星(包括脂质体制剂，例如CAELYX^TM)、表柔比星、 伊达比星和奈莫柔比星；蒽醌类化合物米托蒽醌和洛索蒽醌；鬼臼毒素类 依托泊苷和替尼泊苷。

术语“微管活性剂”是指微管稳定和微管去稳定药物，包括但不限于紫 杉烷类紫杉醇和多西他赛；长春花生物碱类如长春花碱特别是硫酸长春花 碱、长春新碱特别是硫酸长春新碱以及长春瑞滨、圆皮海绵内酯和埃博霉 素例如埃博霉素B和D。

本文中使用的术语“烷化剂”包括但不限于环磷酰胺、异环磷酰胺和美 法仑。

术语“组蛋白脱乙酰酶抑制剂”是指能够抑制组蛋白脱乙酰酶并且具有 抗增生活性的化合物。

术语“法尼基转移酶抑制剂”是指能够抑制法尼基转移酶并且具有抗增 生活性的化合物。

术语“COX-2抑制剂”是指能够抑制环氧酶2型酶(COX-2)并且具有抗 增生活性的化合物,例如塞来昔布()、罗非昔布()和罗美昔 布(COX189)。

术语“MMP抑制剂”是指能够抑制基质金属蛋白酶(MMP)并且具有抗 增生活性的化合物。

术语“抗肿瘤抗代谢物”包括但不限于5-氟尿嘧啶、替加氟、卡倍他滨、 克拉屈滨、阿糖胞苷、氟达拉滨磷酸盐、氟尿苷、吉西他滨、6-巯基嘌呤、 羟基脲、甲氨蝶呤、依达曲沙及其盐，还包括ZD 1694(RALTITREXED^TM)、 LY231514(ALIMTA^TM)、LY264618(LOMOTREXOL^TM)和OGT719。

本文中使用的术语“铂化合物”包括但不限于卡铂、顺铂和奥沙利铂。

本文中使用的术语“能够降低蛋白激酶活性的化合物和其它抗血管生 成的化合物”包括但不限于能够降低下列激酶活性的化合物：例如血管内皮 生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、c-Src、蛋白激酶C、血小板源 生长因子(PDGF)、Bcr-Abl酪氨酸激酶、c-kit、Flt-3和胰岛素样生长因子 I受体(IGF-IR)和细胞周期依赖性激酶(CDKs)；还包括具有不同于降低蛋 白激酶活性的其它作用机制的抗血管生成的化合物。

本文中使用的术语“促性激素释放素激动剂”包括但不限于阿巴瑞克、 戈舍瑞林和戈舍瑞林乙酸盐。戈舍瑞林公开于US 4,100,274。

本文中使用的术语“抗雄激素药物“包括但不限于比卡鲁胺 (CASODEX^TM)，例如根据US 4,636,505中所公开的方法配制。

术语“bengamides”是指具有抗增生活性的bengamides及其衍生物。

本文中使用的术语“二膦酸盐类”包括但不限于依曲膦酸、氯膦酸、替 鲁膦酸、帕米膦酸、阿仑膦酸、伊班膦酸、利塞膦酸和唑来膦酸。

本文中使用的术语“抗增生性抗生素”包括但不限于曲妥珠单抗 (Herceptin^TM)、曲妥珠单抗-DM1、埃罗替尼(Tarceva^TM)、贝伐单抗(Avastin ^TM)、利妥昔单抗PRO64553(抗-CD40)和2C4抗体。

根据上述，本发明提供：

(1)式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用的盐，特别是用作药物。

(2)式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用的盐，用作SYK抑制剂，例 如用于上文中列举的任一具体适应症。

(3)药用组合物，例如用于上文中列举的任一具体适应症，该药用组合 物含有式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用的盐与一或多种可药用的稀释 剂或载体。

(4)在需要的个体中治疗上文中列举的任一具体适应症的方法，该方法 包括给予有效量的式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用的盐。

(5)式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用的盐在制备用于治疗或预防 SYK酪氨酸激酶活化起作用或与之有关的疾病或病症(例如如上所讨论的那 些疾病或病症)的药物中的用途。

(6)组合产品，该组合产品含有式(I)化合物、式(II)化合物或其可药用 的盐和至少一种第二种药物，所述第二种药物可以选自上文中列举的抗肿瘤 药、抗炎药、免疫调节药和抗增生性药。