一种ｈａＦＧＦ改构体的温控表达及其活性测定方法

摘要

本发明公开了一种ｈａＦＧＦ改构体的温控表达及其活性测定方法，采用ＰＣＲ法扩增截去其Ｎ端１９个氨基酸的ｈａＦＧＦＤＮＡ，克隆到温控表达载体ＰＢＶ２２０中，然后转化进ＢＬ２１（ＤＥ３）ＳｔａｒｐｌｙｓＳ中进行温控表达,本发明选用了３种不同的宿主菌对ａＦＧＦ进行表达研究，在ＢＬ２１（ＤＥ３）ＳｔａｒｐｌｙｓＳ中，背景蛋白较少，表达量较大，是较好的宿主菌，应用于ａＦＧＦ的温控表达，本研究将其Ｎ端截少了１９个氨基酸进行缺失表达，所得表达产物仍具有野生型的促细胞分裂活性，但降低了其免疫原性，这样就大大降低了产生抗体的应用风险，提高其应用价值。