转导SV40LT抗原基因构建先天性心脏病室间隔缺损细胞模型及其细胞库

摘要

本发明涉及用于医学研究领域的SV40LT抗原基因转导先天性心脏病室间隔缺损细胞模型及其细胞库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子，经感受态大肠杆菌纯化后导入经胶原酶II消化的离体传代、呈对数生长的先天性心脏病室间隔缺损细胞，使重组子与DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞SV40大T基因检测、mRNA产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40LT转导先天性心脏病室间隔缺损体外研究细胞模型，为在体外从细胞水平长期研究其发病机制奠定基础。