一种牙鲆精子介导转基因过程中保持精子活力的方法

摘要

本发明提供一种牙鲆精子介导转基因过程中保持精子活力的方法，是利用脂质体将外源DNA包裹起来形成两者的复合物，然后将精子12000rpm高速离心15min，去除精清，再将复合物与精子共同孵育，从而用于精子介导的转基因实验和生产中。脂质体与外源质粒形成复合物的N/P参数为5，形成脂质体-DNA复合物的时间为15min，外源质粒的浓度为100ng/μl，每10μl精子与10μg外源质粒混合，混合的时间在10min至50min。通过与质粒直接与精子混合作为比较，本发明的优点为，利用脂质体将外源质粒包裹起来，有效避免外源质粒对精子的损伤，利用细胞转化的原理，即脂质体和精子质膜间的静电作用，提高外源基因的导入率，操作简便，处理时间的跨度广，便于实际操作。