一种卡巴他赛长循环脂质体注射剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种卡巴他赛长循环脂质体注射剂及其制备方法，该卡巴他赛脂质体注射剂包括卡巴他赛或其药学上可接受的盐、生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺和磷脂。可通过薄膜法制备而成。该脂质体不仅毒性降低、临床使用简便、生物利用度提高，而且具有良好的储存和使用稳定性。

说明书

技术领域

本发明涉及一种卡巴他赛脂质体组合物及其制备方法，具体涉及一种卡巴他赛长循环脂 质体注射剂及其制备方法。

背景技术

“卡巴他赛”是指化学名为(2α，5β，7β，10β，13α)-4-乙酰氧基-13-({(2R，3S)-3-[(叔丁氧羰基) 氨基]-2-羟基-3-苯基丙酰基}氧基)-1-羟基-7，10-二甲氧基-9-氧代-5，20-环氧紫杉-11- 烯-2-基苯甲酸-丙-2-酮(1∶1)的药物物质。卡巴他赛(当前由Sanofi-Aventis销售)是白色至 类白色粉末，其化学式为C₄₅H₅₇NO₁₄·C₃H₆O，并且分子量为894.01(丙酮溶剂合物)/835.93(不 含溶剂)。

卡巴他赛(cabazitaxel)为紫杉烷类抗肿瘤药，是一种新的微管抑制剂，能够与微管蛋白 结合，促进微管的组装并抑制其分解，从而稳定微管，具有抑制有丝分裂期和分裂间期的肿 瘤细胞功能，起到抗肿瘤作用。该药不仅对多西他赛敏感型肿瘤有效，而且对其他化疗药物 (包括多西他赛)不敏感的肿瘤模型也表现出了活性。

卡巴他赛制剂原研厂法国Sanofi-Aventis公司研制的卡巴他赛注射液的商品名为Jevtan。 该注射液先将药物溶解于吐温-80(Tween-80)中，临床使用前，用13％乙醇稀释至10mg/ml， 而在给药前，进一步用5％葡萄糖或者生理盐水稀释至临床使用浓度，稀释后注射液需在4小 时内使用，否则将会产生沉淀。

发明申请CN 103768018A公开了一种不使用吐温-80进行药物溶解的卡巴他赛脂质体注 射剂及其制备方法，该卡巴他赛脂质体注射剂包括卡巴他赛、磷脂、胆固醇、甘露醇或葡萄 糖，四者的重量比为1∶20～100∶0.25～5∶10～60。该方法毒性较低，临床使用简便。

卡巴他赛组合物的现有技术中使用的脂质体，存在着体外稳定性稳定较差和载药量较低 的缺点：传统组成的脂质体很快离开血流，聚集于肝脏的Kupffer细胞和脾脏的巨噬细胞 (RES)中。分散在脂质体磷脂双分子层中的卡巴他赛容易受载药量、温度等因素的影响， 在体系中析出；同时在稳定范围的卡巴他赛脂质体中，一般药物与磷脂材料的摩尔比为1∶30， 而对于载药量过低这一技术问题而言，现有技术中还没有技术方案可以很好的解决。

多孔的肿瘤微细血管系统允许那些通常被排除在细胞间隙之外的微粒进入组织，快速离 开血液循环并被RES捕获的脂质体不能通过这一途径向肿瘤递送药物，长循环脂质体则是合 理的选择。

为了提高卡巴他赛脂质体在血浆中和体内稳定性的最好的措施，就是设计制备长循环脂 质体，这是由于长循环脂质体由于长循环材料PEG化材料的修饰和保护作用，干扰体内血液 中的调理和脂质交换，从而可明显提高脂质体体内稳定性、延长体内循环时间。为了达到制 备长循环脂质体的目的，关键是对PEG材料的选择和应用。有研究表明，有人采用聚乙二醇 或聚山梨醇酯或者PEG(PEG即聚乙二醇)化胆固醇来作为长循环材料，均没有取得很好的 效果。

由此可见，如何选择卡巴他赛长循环脂质体的基本制备材料，对于卡巴他赛脂质体的生 产和使用有着极为重要的作用，而如何提供一种能够弥补上述提到的卡巴他赛脂质体技术方 案的不足，也是医药领域需要继续解决的技术问题。

本发明针对上述缺陷，提供了一种卡巴他赛长循环脂质体注射剂，与现有技术相比，本 发明克服了脂质体的如上缺陷，提供一种具有良好稳定性，在储存期内足够稳定的卡巴他赛 脂质体。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种性质稳定、可临床应用的卡巴他赛长循环脂质体注射剂。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种卡巴他赛长循环脂质体注射剂，包括卡巴他赛或其药学上可接受的盐、生育酚聚乙二 醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺和磷脂，四者的重量比为1∶2～ 5∶2～10∶10～50。

进一步地，卡巴他赛或其药学上可接受的盐、生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂 酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺和磷脂的重量比为1∶2.5～4.5∶4～6∶40～50。

在一种方案中，卡巴他赛长循环脂质体注射剂，其特征在于所述的磷脂选自1-油酰-2-羟 基磷脂酰甘油、二硬酯酰磷脂酰甘油或二者的组合。

上述卡巴他赛长循环脂质体注射剂中卡巴他赛的量优选7mg/mL至约11mg/mL。

生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺中所含的聚乙 二醇的分子量为800～2000。

本发明的第二个目的在于提供一种巴他赛长循环脂质体注射剂的制备方法：将卡巴他赛 或其药学上可接受的盐、生育酚聚乙二醇琥珀酸脂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来 酰亚胺和磷脂溶于有机溶剂中，减压蒸去有机溶剂，使组合物在烧瓶底部形成一均匀类脂膜， 加入注射用水，匀化，整粒即得；或者减压蒸去有机溶剂后，加入葡萄糖或麦芽糖水溶液形 成混悬液，匀化，整粒，即得。

其中所述的有机溶剂选自乙醇、甲醇、氯仿或丙酮中一种或几种；葡萄糖或麦芽糖水溶 液的浓度为6％。

本发明提供的卡巴他赛长循环脂质体的配方与工艺既可使脂质体达到高的包封率，包封 率大于95％。

本发明的卡巴他赛脂质体注射剂为细胞毒类抗癌药物，可用于转移性激素难治性前列腺 癌等疾病，使用剂量为每3周25mg/m²滴注1小时。

本发明提供的卡巴他赛脂质体注射剂，不仅临床使用简便、生物利用度提高，而且在储 存期内足够稳定，使用稳定性较好，解决了脂质体不稳定的问题。与原研制剂相比，该脂质 体注射剂不使用吐温-80，降低了卡巴他赛注射液的毒性，提高了安全性；只需采用葡萄糖/生 理盐水一步稀释后即可注射，将卡巴他赛脂质体注射剂在加入注射用水后重新分散后，能以 任意比例溶于输液稀释给药，大大简化了临床使用；该脂质体中的药物持续释放，延长了在 血液中的循环时间，提高了药物有效成份的利用率。

具体实施方式

以下实施例进一步描述本发明，但是，这些实施例仅是用于说明本发明，而不是对本发 明范围的限制。

实施例1

处方(100ml容量)

制备工艺：

将处方量的卡巴他赛、生育酚聚乙二醇2000琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇 1200-马来酰亚胺和1-油酰-2-羟基磷脂酰甘油置于置于500ml圆底烧瓶中，以150ml无水乙醇 溶解后，55～60℃恒温水浴上旋转蒸发仪在100rpm并减压的条件下蒸去乙醇，使组合物在烧 瓶底部形成一均匀类脂膜，另将6％麦芽糊精水溶液加入到上述圆底烧瓶中，在50℃下用旋转 蒸发仪转动洗膜，直至类脂薄膜水合变成白色脂质体悬液，依次经0.45μm、0.22μm、滤膜整 粒(各3次)，将最终分散物分装入西林瓶中，然后冷冻干燥即得。

实施例2

处方(100ml容量)

将处方量的卡巴他赛、生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇1200- 马来酰亚胺和1-油酰-2-羟基磷脂酰甘油置于置于500ml圆底烧瓶中，以150ml氯仿溶解后， 55～60℃恒温水浴上旋转蒸发仪在100rpm并减压的条件下蒸去氯仿，使组合物在烧瓶底部形 成一均匀类脂膜，加入10ml去离子水，超声10min，0.45μm、0.22μm、滤膜整粒，既得含卡 巴他赛的长循环脂质体。

实施例3

处方(100ml容量)

制备工艺：

将处方量的卡巴他赛、生育酚聚乙二醇2000琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇 1200-马来酰亚胺和二硬酯酰磷脂酰甘油置于置于500ml圆底烧瓶中，以150ml丙酮/甲醇(1∶ 1)溶剂溶解后，55～60℃恒温水浴上旋转蒸发仪在100rpm并减压的条件下蒸去溶剂，使组合 物在烧瓶底部形成一均匀类脂膜，另将6％麦芽糖溶液加入到上述圆底烧瓶中，在50℃下用旋 转蒸发仪转动洗膜，直至类脂薄膜水合变成白色脂质体悬液，依次经0.45μm、0.22μm、滤膜 整粒(各3次)，将最终分散物分装入西林瓶中，然后冷冻干燥即得。

实施例4卡巴他赛长循环脂质体的组合物的稳定性试验

该试验旨在考察实施例中制备的长循环脂质体样品的贮存稳定性和使用稳定性。

将实施例1、、3制得的干燥的卡巴他赛长循环脂质体组合物在40℃下贮存1个月至3个 月。在贮存后，使用HPLC测试制剂的稳定性。

将实施例1、2、3制得的干燥的卡巴他赛长循环脂质体组合物分别加入5ml注射用水重组， 按照中药典2005版二部附录XIX E中方法，测得样品的包封率。

分别以5％葡萄糖或0.9％氯化钠注射液稀释后10小时观察各样品有无沉淀析出。

卡巴他赛长循环脂质体的组合物的稳定性试验试验结果如下表1所示：

表1卡巴他赛长循环脂质体的组合物的稳定性

试验结果发现，以5％葡萄糖或0.9％氯化钠注射液将干燥后的脂质体组合物稀释后10小 时均无沉淀析出。卡巴他赛长循环脂质体组合物的包封率较高，在储存的过程中含量和包封 率均未明显下降，具有较好的贮存稳定性和使用稳定性。

实施例5卡巴他赛长循环脂质体药动学参数

将实施例1、2、3的卡巴他赛脂质体制剂用0.9％氯化钠注射液稀释，活性物质浓度为 7mg/mL，分别标记为样品1、样品2和样品3备用。参考JEVTANA说明书制备卡巴他赛注射 液标记为样品4备用。

将上述各制剂样品通过大鼠尾静脉给药(n＝6)，分别于给药前后0h、0.083h、0.25h、0.5h、 1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、18h、24h大鼠眼眶取血0.5ml至1.5mlEP管中，肝素抗凝。 4℃，10000rpm离心分离血浆。上述含药血浆经处理后，用HPLC/MS/MS测定血浆药物浓度， 绘制血药浓度-时间曲线。药动学数据经DAS软件包进行分析，其药动学参数如下表2所示：

表2卡巴他赛长循环脂质体药动学参数

试验结果表明，本发明的卡巴他赛长循环脂质体制剂，经尾静脉给药后，在大鼠体内的 滞留时间(t_1/2Z)是市售卡巴他赛注射液的5倍，同时血浆曲线下面积(AUC)也较后者提高了 1倍以上，AUC显著提高，半衰期明显延长。