叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体的研究

摘要

卡巴他赛（cabazitaxel），是法国赛诺菲-安万特公司研发的新一代紫杉烷类抗癌药，水溶性差。作用机制与紫杉醇和多西他赛相同，同属于微管蛋白抑制剂，目前上市的商品为Jevtana?，作为二线疗法治疗前列腺癌。Jevtana?中含有的吐温-80和乙醇（用于增加卡巴他赛溶解度），在临床应用中引起了许多不良反应。本课题在传统脂质体的基础上，通过加入长循环和靶向材料，开发一种靶向长循环脂质体，在解决卡巴他赛溶解性低的同时，提高卡巴他赛的生物利用度，降低不良反应，提高治疗效果。本课题主要研究内容如下：
　　(1)利用高效液相色谱仪建立了卡巴他赛脂质体含量测定方法，同时建立了包封率的测定方法，为后面制剂制备、评价等提供方法学基础。
　　(2)以包封率为指标，选择脂质体的制备方法。以选择的制备方法为基础，以包封率、粒径等为指标，通过对磷脂和胆固醇比例、水化温度、水化介质和药脂比的优化，冻干保护剂的选择等，得到最终的优化处方及制备工艺。优化处方及制备工艺为：磷脂和胆固醇的质量比为6:1，水化温度为30℃，水化介质为pH6.5PBS，药脂比为1:18.7，叶酸-PEG-PC用量为3％（摩尔比），PEG2000-PC用量为2%（摩尔比），蔗糖用量为7%。采用薄膜分散法将得到的处方按最佳工艺条件制备即得叶酸靶向长循环脂质体。
　　(3)叶酸靶向脂质体的理化性质及体外释放考察结果：叶酸靶向长循环脂质体的粒径为120nm左右，PDI为0.222左右，含量为0.99mg/ml，包封率为94.8%，体外释药缓慢，能够在较长时期内稳定储存。体外抗肿瘤研究结果：在肿瘤细胞增殖抑制、摄取、凋亡等实验中，叶酸靶向长循环脂质体与普通脂质体和原料药相比，能够更快地进入肿瘤细胞，在细胞中积累，诱导细胞凋亡。小鼠体内药代动力学研究结果表明：叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体在小鼠体内的消除半衰期是注射液组的3.230倍，是普通脂质体组的1.726倍，同时药时曲线下面积（AUC）值也显著提高，是注射液组的3.862倍，普通脂质体组的1.781倍。
　　综上，本课题成功地制备了叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体，其制备工艺简单，储存稳定，体外抗肿瘤效果优良，在小鼠体内能够较长时间存在，生物利用度高。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

1 绪论

1.1 我国肿瘤发病现状及趋势

1.2 抗肿瘤药的作用机制

1.3 新型抗肿瘤药物载体概述

1.4 卡巴他赛概述

1.5 本课题研究的主要内容

2 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体的处方前研究

2.1 仪器与试剂

2.2 卡巴他赛含量测定方法的建立

2.3 包封率测定方法的建立

2.4 小结

3 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体的制备与处方工艺优化

3.1 仪器与试剂

3.2 脂质体的制备方法筛选

3.3 脂质体处方工艺优化

3.4 脂质体处方及制备工艺的确定

3.5 小结

4 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体的理化性质及体外释放考察

4.1 仪器与试剂

4.2 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体理化性质考察

4.3 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体体外释放考察

4.4 小结

5 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体体外抗肿瘤研究

5.1 仪器与试剂

5.2 溶液的配制及基本操作方法

5.3 肿瘤细胞增殖抑制效果考察

5.4 肿瘤细胞摄取效果考察

5.5 肿瘤细胞凋亡效果考察

5.6 肿瘤细胞周期影响考察

5.7 小结

6 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体小鼠体内药动学考察

6.1 仪器与试剂

6.2 血浆卡巴他赛高效液相色谱含量检测方法的建立

6.3 叶酸靶向卡巴他赛长循环脂质体小鼠体内药动学性质考察

6.4 小结

全文总结

创新点和不足

参考文献

个人简历

致谢