一种基于illumina测序平台的大片段DNA文库的构建方法

摘要

本发明涉及高通量测序技术领域，公开了一种基于illumina测序平台的大片段DNA文库的构建方法，包含以下步骤：(1)将基因组DNA随机打断；可交换先后顺序的(2)和(3)：(2)末端补平，两端加生物素标记的环化接头；(3)分离DNA片段；(4)环化，并除去未环化的DNA片段；(5)随机打断环化的DNA；(6)分离带有生物素标记的DNA片段；(7)将带有生物素标记的DNA片段进行末端补平；(8)末端加A碱基；(9)连上测序接头；(10)PCR扩增富集，形成测序文库。本发明采用Cre重组酶系统环化DNA片段，环化时间只需1小时，大大缩短了文库的构建时间，成功构建了大片段DNA文库，使得测序中基因组的拼接达到精细图或完成图的标准。