公开/公告号CN104136441A
专利类型发明专利
公开/公告日2014-11-05
原文格式PDF
申请/专利权人 SK化学公司;
申请/专利号CN201380011513.6
申请日2013-02-28
分类号C07D491/02(20060101);C07D491/107(20060101);A61K31/527(20060101);A61P35/00(20060101);
代理机构11002 北京路浩知识产权代理有限公司;
代理人谢顺星;张晶
地址 韩国京畿道
入库时间 2023-12-17 02:14:13
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2017-06-20
专利权的转移 IPC(主分类):C07D491/02 登记生效日:20170601 变更前: 变更后: 申请日:20130228
专利申请权、专利权的转移
2016-09-28
授权
授权
2015-03-11
实质审查的生效 IPC(主分类):C07D491/02 申请日:20130228
实质审查的生效
2014-11-05
公开
公开
技术领域
本发明涉及促性腺激素释放激素(GnRH)受体拮抗剂、其制备方 法以及包含该促性腺激素释放激素受体拮抗剂的药物组合物。
背景技术
促性腺激素释放激素(称为促黄体激素释放激素)是由下丘脑分 泌的十肽，其影响位于垂体前叶的受体，以刺激促黄体激素(LH)和促 卵泡激素(FSH)的生物合成和分泌。促黄体激素调节男性和女性中性 腺类固醇的合成。其参与男性精子和女性卵泡的发育。因此，GnRH 受体激动剂或拮抗剂作为用于激素相关疾病，特别是前列腺癌、乳腺 癌、子宫内膜异位、子宫肌瘤、性早熟等以及不育的治疗剂受到了广 泛关注。
目前使用的治疗剂有两种不同的作用方式。在一种作用方式中， 治疗剂用作需要连续施用的GnRH拮抗剂，其消耗促性腺激素并下调 受体，由此在开始连续施用的大约2-3周后会引起抑制甾体类激素。 然而，不可避免的是在开始时经受超激动作用(superagonism)，因此 在该方式下，存在患者必须经受初始副作用的不便之处。
在另一种作用方式中，其直接用作GnRH拮抗剂，从而可以从发 作时抑制促性腺激素。该机制会直接降低促性腺激素的水平，而不会 引起初始的副作用。然而，临床研究发现，GnRH拮抗剂显示相对较 低的生物利用度，以及由组胺释放引起的不良副作用。尽管已报道过 肽类拮抗剂具有低组胺释放特性，但由于有限的生物利用度，其仍然 必须通过肠胃外给药途径(例如静脉注射、皮下注射和肌内注射)来递 送。
因此，已建议非肽类拮抗剂来克服与肽类GnRH拮抗剂相关的限 制(Sarma,PKS,Expert Opin.Ther.Patents 16(6):733-751,2006)。然而， 尽管在本领域有深入研究，但仍存在对具有良好生物利用度的低分子 量GnRH受体拮抗剂的需求。
发明概述
因此，本发明的目的在于提供用作GnRH受体拮抗剂的化合物。
本发明的另一目的在于提供包含该化合物的药物组合物。
本发明的又一目的在于提供使用该化合物预防或治疗性激素相 关疾病的方法。
本发明的再一目的在于提供该化合物用于制备预防或治疗性激 素相关疾病的药物的用途。
解决问题的方案
根据本发明的一个方面，提供了式(I)的化合物，或其立体异构 体、前药或药学上可接受的盐：
其中，
A为CR8aR8b、O、S或NR9；
R1和R2可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、(C1-C10)烷基、 取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、取代的(C3-C10)环烷基、(C6-C12) 芳基、取代的(C6-C10)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12) 芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、取代的(C1-C20)杂芳基、(C1-C20) 杂芳基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂 环、取代的(C1-C20)杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20) 杂环基(C1-C10)烷基、或-(CR1aR1b)s-R12；
R3a和R3b可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、(C1-C10)烷 基、取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、取代的(C3-C10)环烷基、 (C1-C10)烷氧基、(C1-C10)烷硫基、(C1-C10)烷基氨基、(C6-C12)芳基、 取代的(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12)芳基 (C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、取代的(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳 基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、 取代的(C1-C20)杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20)杂 环基(C1-C10)烷基、-COOR13或-CONR13R14；
R3a和R3b和与其连接的碳原子一同形成同素环、取代的同素环、 杂环或取代的杂环；或者R3a和与其键合的碳，连同R1和与其键合的 氮原子一起形成杂环或取代的杂环；
R4为-(CR9aR9b)r-Z-Y；
n为整数2、3或4；
s为整数1、2、3或4；
r为整数0、1或2；
Z代表直接键或-O-、-S-、-NR11-、-SO-、-SO2-、-OSO2-、-SO2O-、 -SO2NR11-、-NR11SO2-、-CO-、-COO-、-OCO-、-CONR11-、-NR11CO-、 -NR11CONR11a-、-OCONR11-或-NR11COO-；
Y为氢、卤素、(C1-C10)烷基、取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷 基、取代的(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、取代的(C6-C12)芳基、(C6-C12) 芳基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、 取代的(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基或取代的(C1-C20) 杂芳基(C1-C10)烷基；
R6为氢、(C1-C10)烷基、取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、取 代的(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、取代的(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳 基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、 取代的(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基或取代的(C1-C20) 杂芳基(C1-C10)烷基；
R9为氢、(C1-C10)烷基或(C1-C10)酰基；
R12为-CO2R13、-COOH或酸等排物；
R1a和R1b可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、(C1-C10)酰 基、羟基、卤素、氰基、(C1-C10)烷基、取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10) 环烷基、取代的(C3-C10)环烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10)烷硫基、 (C1-C10)烷基氨基、-COOR13-或CONR13R14-；或者R1a和R1b与其所连 接的原子一同独立地形成同素环、取代的同素环、杂环或取代的杂环；
R5a、R5b、R7a、R7b、R8a和R8b可以是相同或不同的，其各自独 立地为氢、(C1-C10)酰基、羟基、氨基、卤素、氰基、(C1-C10)烷基、 取代的(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、取代的(C3-C10)环烷基、(C1-C10) 芳基、取代的(C1-C10)芳基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10)烷硫基、(C1-C10) 烷基氨基、-COOR13、或-CONR14R15；并且
R9a、R9b、R11、R11b、R13、R14和R15可以是相同或不同的，其各 自独立地为氢、(C1-C10)烷基、(C6-C12)芳基或(C6-C12)芳基(C1-C10)烷 基；
其中，杂环(heterocyclic ring)、杂环(hetercycle)、杂环基烷基、 杂芳基和杂芳基烷基含有选自N、O和S的至少一个杂原子；并且
“取代的”指的是用选自下组的至少一个取代基进行替换：卤素、 乙炔、乙烯基、羟基、氰基、硝基、氨基、(C1-C10)烷基氨基、二(C1-C10) 烷基氨基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10) 烷硫基、卤代(C1-C10)烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、 (C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、(C1-C20) 杂环基(C1-C10)烷基、-NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)NRaORb、 -NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、 -OC(＝O)Ra、-C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、-ORa、-SRa、-SORa、 -S(＝O)2Ra、-OS(＝O)2Ra和-S(＝O)2ORa，其中Ra和Rb可以是相同或不 同的，其各自独立地为氢、(C1-C10)烷基、卤代(C1-C10)烷基、(C3-C10) 环烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、 (C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷 基或-(CH2)zC(＝O)Rc，z为整数1、2、3或4，且Rc为羟基、(C1-C10) 烷基、(C3-C10)环烷基或(C1-C10)烷氧基。
根据本发明的另一方面，提供了用于预防或治疗性激素相关疾病 的药物组合物，其包含式(I)的化合物，或其立体异构体、前药或药学 上可接受的盐。
根据本发明的又一方面，提供了预防或治疗个体中性激素相关疾 病的方法，其包括对有需要的个体施用有效量的式(I)的化合物或立体 异构体、前药或药学上可接受的盐。
根据本发明的再一方面，提供了式(I)的化合物或立体异构体、前 药或药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗性激素相关疾病的药 物中的用途。
本发明的化合物能有效抑制GnRH受体，由此可以用于预防或 治疗性激素相关疾病，例如子宫内膜异位症、闭经、月经不调、子 宫肌瘤、子宫纤维瘤、多囊卵巢病、红斑狼疮、多毛症、性早熟、 矮小症、痤疮、脱发、性腺激素依赖性肿瘤(如前列腺癌、乳腺癌、 卵巢癌、子宫癌、垂体肿瘤等)、产生促性腺激素的垂体腺瘤、睡眠 呼吸暂停、肠易激综合征、经前期综合征、良性前列腺增生、避孕 和不育，以及阿尔茨海默病。
发明详述
以下给出本发明的详细说明。
本文所用的术语“非芳香族”是指不含有4n+2个电子共轭的芳 香性或者饱和的化学基团。
本文所用的术语“烷基”是指含有1至10个碳原子的不饱和或 饱和的直链或支链非环脂肪族烃。术语“低级烷基”除了含有1至6 个碳原子外，与“烷基”具有相同的含义。术语“高级烷基”除了含 有2至10个碳原子外，与“烷基”具有相同的含义。饱和直链烷基 的代表性实例包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基等； 饱和支链烷基的代表性实例包括异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、 异戊基等。不饱和烷基在相邻碳原子之间包括至少一个双键或三键 (也分别被称为“烯基”或“炔基”)。直链或支链烯基的代表性实例 包括乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、 2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基 等；直链或支链炔基的代表性实例包括乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、 2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基等。
本文所用的术语“环烷基”是指含有3至10个碳原子的饱和或 不饱和非芳香碳环体系。饱和环烷基的代表性实例包括环丙基、环丁 基、环戊基、环己基等；不饱和环烷基的代表性实例包括环戊烯基、 环己烯基等。在本发明的说明书中环烷基也称作“同素环(homocycle)” 或“同素环(homocyclic ring)”。
本文所用的术语“芳基”是指芳族碳环基团，如苯基或萘基。
本文所用的术语“芳基烷基”是指至少一个氢原子被芳基替代的 取代的烷基，如苄基、-(CH2)2苯基、-(CH2)3苯基、-CH(苯基)2等。
本文所用的术语“杂芳基”是指包含选自氮、氧和硫原子的至少 一个杂原子和至少一个碳原子的5-10元芳香杂环，其包含单环或双 环体系。杂芳基的代表性实例包括呋喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯 并噻吩基、吡咯基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基、吡啶基、喹啉 基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、苯并噁唑基、吡唑基、咪唑基、 苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡 嗪基、三嗪基、噌啉基、酞嗪基和喹唑啉基。
如本文所用，术语“杂芳基烷基”是指至少一个氢原子被杂芳基 取代的取代的烷基，如-CH2吡啶基-CH2嘧啶基等。
如本文所用，术语“杂环”(也称为“杂环(heterocyclic ring)”) 是指饱和、不饱和或芳族4-7元单环或7-10元双环杂环，其包含独 立地选自氮、氧和硫原子的1-4个杂原子(其中氮和硫杂原子可以任 选地被氧化，且氮原子可以可选地被季铵化)。上述杂环中的任一个 包括与苯环稠合的双环。杂环可以通过任意的杂原子或碳原子连接。 杂环包括上面定义的杂芳基。因此，除了上面列举的杂芳基外，杂环 还包括吗啉基、吡咯烷酮基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、乙内酰脲 基、戊丙酰胺基(valerolactamyl)、环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、四氢 呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢 噻喃基等。
本文所用的术语“杂环烷基”是指至少一个氢原子被杂环取代的 取代的烷基，如-CH2吗啉基等。
本文所用的术语“同素环(homocycle)”(也称为“同素环 (homocyclic ring)”)是指含有3-7个碳原子的饱和或不饱和(除芳族基 团外)的碳环，如环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环己 烯等。
本文所用的术语“取代的”是指其中任一基团(即烷基、芳基、 芳烷基、杂芳基、杂芳基烷基、同素环、杂环和/或杂环基烷基)的至 少一个氢原子被取代基取代的任意基团。在酮取代基(-C(＝O)-)的情况 下，两个氢原子被取代基取代。
在本发明的范围内，当至少一个基团被取代基取代时，该“取代 基”包括卤素、乙炔、乙烯基、羟基、氰基、硝基、氨基、(C1-C10) 烷基氨基、二(C1-C10)烷基氨基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C1-C10) 烷氧基、(C1-C10)烷硫基、卤代(C1-C10)烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12) 芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20) 杂环、(C1-C20)杂环(C1-C10)烷基、-NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、 -NRaC(＝O)NRaORb、-NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、 -C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-OC(＝O)Ra、-C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、 -ORa、-SRa、-SORa、-S(＝O)2Ra、-OS(＝O)2Ra和-S(＝O)2ORa。
而且，所述取代基还可以被所述取代基中的至少一个取代，因此 其包括取代的烷基、取代的芳基、取代的芳基烷基、取代的杂环和取 代的杂环基烷基。
在以上之中，Ra和Rb可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、 (C1-C10)烷基、卤代(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12) 芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20) 杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基或-(CH2)zC(＝O)Rc(其中z是整数1、 2、3或4；且Rc为羟基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基或(C1-C10)烷 氧基)。
本文所用的术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
本文所用的术语“卤代烷基”是指至少一个氢原子被卤素替代的 取代的烷基，如三氟甲基等。
本文所用的术语“烷氧基”是指通过氧桥连接的烷基(即-O-烷基)， 如甲氧基、乙氧基等。
本文所用的术语“烷硫基”是指通过硫桥连接的烷基(即-S-烷基)， 如甲硫基、乙硫基等。
本文所用的术语“烷基磺酰基”是指通过磺酰基桥连接的烷基(即 SO2-烷基)，如甲基磺酰基、乙基磺酰基等。
本文所用的术语“烷基氨基”和“二烷基氨基”是指分别通过氮 桥连接的一个和两个烷基(即-N-烷基)，如甲氨基、乙氨基、二甲氨基、 二乙氨基等。
根据本发明的一个实施方案，其中A为O、CH2、NR9或S的式 (I)的化合物可以由选自式(Ia)至(Id)的结构表示：
其中，
R1、R2、R3a、R3b、R4、R5a R5b、R6、R7a、R7b、R9和n与式(I)中所定 义的具有相同含义。
根据本发明的一个实施方案，其中R6是取代的苄基的式(I)的化 合物可以由选自式(Ie)的结构表示：
其中，
A为O、CH2、NR9或S；
R9为氢或(C1-C10)烷基；
R1、R2、R3a、R3b、R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b和n与式(I)中所 定义的具有相同含义；且
X为选自下组的至少一个取代基：卤素、乙炔、乙烯基、羟基、 氰基、硝基、氨基、(C1-C10)烷基氨基、二(C1-C10)烷基氨基、(C1-C10) 烷基、(C3-C10)环烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10)烷硫基、卤代(C1-C10) 烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、(C1-C20) 杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基、 -NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)NRaORb、-NRaC(＝O)NRaRb、 -NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-OC(＝O)Ra、 -C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、-ORa、-SRa、-SORa、-S(＝O)2Ra、 -OS(＝O)2Ra和-S(＝O)2ORa；
其中Ra和Rb可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、(C1-C10) 烷基、卤代(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳 基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20) 杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基或-(CH2)zC(＝O)Rc，z为整数1、2、 3或4，且Rc为羟基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基或(C1-C10)烷氧基。
根据本发明的一个实施方案，式(I)的化合物可以选自式(II)至 (VI)：
其中，
R1、R2、R3a、R3b和R4与式(I)中所定义的具有相同含义；且
X与式(Ie)中所定义的具有相同含义。
根据本发明的一个实施方案，其中n为2、R3a为H、R3b为芳香 环或取代的芳香环且R6为取代的苄基的式(I)的化合物可由下式(VII) 的结构表示：
其中，
A为O、S、CH2或NR9；
R9为H或(C1-C10)烷基；
R1、R2、R4、R5a、R5b、R7a和R7b与式(I)中所定义的具有相同含 义；且
X和X'各自独立地为选自下组的至少一个取代基：卤素、乙炔、 乙烯基、羟基、氰基、硝基、氨基、(C1-C10)烷基氨基、二(C1-C10)烷 基氨基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10)烷 硫基、卤代(C1-C10)烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、 (C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、(C1-C20) 杂环基(C1-C10)烷基、-NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)NRaORb、 -NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、 -OC(＝O)Ra、-C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、-ORa、-SRa、-SORa、 -S(＝O)2Ra、-OS(＝O)2Ra和-S(＝O)2ORa；
其中Ra和Rb可以是相同或不同的，其各自独立地为氢、(C1-C10) 烷基、卤代(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳 基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20) 杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10)烷基或-(CH2)zC(＝O)Rc，z为整数1、2、 3或4，且Rc为羟基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基或(C1-C10)烷氧基。
在式(I)的化合物的优选实施方案中，
A为CH2、O、S或NR9，其中R9为氢或甲基；
n为整数2；
R1和R2各自独立地为氢、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、取代的 (C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20) 杂芳基(C1-C10)烷基或-(CH2)s-R12；
s为整数1、2、3或4；
R3a和R3b各自独立地为氢、(C6-C12)芳基、取代的(C6-C12)芳基、 (C1-C20)杂芳基或取代的(C1-C20)杂芳基；
R4为氢、(C6-C12)芳基、取代的(C6-C12)芳基、(C1-C20)杂芳基、 取代的(C1-C10)杂芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12)芳 基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、取代的(C1-C20)杂芳基 (C1-C10)烷基、(C1-C10)烷基、取代的(C1-C10)烷基、-C(＝O)R11、-SO2R11或–C(＝O)OR11；
R6为(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、取代的(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、 (C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基或取代的(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基；
R5a、R5b、R7a、R7b、R8a和R8b各自独立地为氢；
R11为氢、(C1-C10)烷基、(C6-C12)芳基或(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基； 且
R12为-COOH或选自下组的酸等排物：
其中“取代的”意指被选自下列的至少一个取代基取代：卤素、 乙炔、乙烯基、羟基、氰基、硝基、氨基、(C1-C10)烷基氨基、二(C1-C10) 烷基氨基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)环烷基、(C1-C10)烷氧基、(C1-C10) 烷硫基、卤代(C1-C10)烷基、-NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)NRaORb、 -NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、 -OC(＝O)Ra、-C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、-ORa、-SRa和-S(＝O)2Ra，
其中Ra和Rb各自独立地为氢、(C1-C10)烷基、卤代(C1-C10)烷基、 (C3-C10)环烷基、(C6-C12)芳基、(C6-C12)芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂 芳基、(C1-C20)杂芳基(C1-C10)烷基、(C1-C20)杂环、(C1-C20)杂环基(C1-C10) 烷基或-(CH2)zC(＝O)Rc，z为整数1、2、3或4，且Rc为羟基、(C1-C10) 烷基、(C3-C10)环烷基或(C1-C10)烷氧基。
本发明的式(I)的化合物可以选自：
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟 甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)- 二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-甲基-1H- 螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-甲氧基 乙基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-新戊基 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-((R)-2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-(1-甲基 吡咯烷-2-基)乙基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二 酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(吡啶-2- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(吡啶-3- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(吡啶-4- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-氟吡 啶-3-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((2-氯吡啶-3-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((6-氯吡啶-3-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-甲基 吡啶-3-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((6-(三氟 甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)- 二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-甲基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-甲氧基 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲腈；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(三氟 甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(三氟 甲氧基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲酸 甲酯；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)-N-甲基 苯甲酰胺；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲硫 基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-羟基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲基 磺酰基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(苯并[b]噻吩-7-基甲基)-1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(苯并[c][1,2,5]噁二唑-4-基甲 基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-甲基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-甲氧基 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-羟基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-氟代苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-2-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲腈；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(2,3-二氟苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-(三氟 甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-2-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)-6-氟代 苯甲腈；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)-2-氟代 苯甲腈；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2,6-二氟苄基)-1'-(3-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-(三氟 甲氧基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-2-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲酸 甲酯；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(2-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(2-氟-3-甲氧基苄基)-1-(2-氟-6-(三氟 甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-5-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)呋喃-2- 甲酰胺；
(R)-5-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)-N-甲基 呋喃-2-甲酰胺；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2,6-二氟苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃 -2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2,6-二氟苄基)-1H-螺 [呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2,6-二氟苄基)-2,4-二氧代 -2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲腈；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-苯乙基 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(呋喃-2- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-甲基 呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((5-氯代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟 -6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二 酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((6-羟基 吡啶-3-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(4-甲基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(4-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-4-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲腈
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(4-(三氟 甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-4-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲酸 甲酯；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(4-氟代苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(4-羟基苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(4-甲氧基 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(吡嗪-2- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((1-甲基 -1H-吡唑-5-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二 酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(噻唑-4- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(噻唑-5- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(噻唑-2- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(噁唑-4- 基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(异噁唑 -3-基甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-1'-乙酰基-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-异丁酰基 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-羧酸乙酯；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(甲基磺酰 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃 [3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-(甲基 磺酰基)乙基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-3-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲酰 胺；
(R)-4-((3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)甲基)苯甲酰 胺；
(R)-N-(2-(3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二 氧代-2,3,4,7-四氢-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-1'-基)乙基)-N-甲 基甲磺酰胺；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(2-吗啉代 乙基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-(3-(三氟甲基) 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基) 氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2,6-二氟苄基)-2,4-二氧代-1'-(3-(三氟甲基)苄 基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨 基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-甲基呋喃-2-基)甲 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-((5-氯代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-(3-氰基-2-氟代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2,6-二氟苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2- 基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙 基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2,6-二氟苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-(3-氰基苄基)-1-(2,6-二氟苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-(3-氰基苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲基氨基甲酰基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲硫基)苄基)-2,4-二 氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨 基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酰胺；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟 甲基)呋喃-2-基)甲基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)- 二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮；
(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁 酸；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲硫 基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6,7- 二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄 基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(三氟 甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((5-氯代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟 -6-(三氟甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二 酮；
(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟 甲基)呋喃-2-基)甲基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)- 二酮；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-(甲硫基)苄基)-2,4-二 氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁酸；
(R)-4-((2-(1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7- 四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄基)-2,4-二氧代 -1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁 酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-(3-(三氟甲基) 苄基)-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨 基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-((5-氯代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯 乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(S)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸；
(S)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁酸；
(R)-3-(2-((3-(2H-四唑-5-基)丙基)氨基)-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧 啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(R)-2-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)乙基甲氧基氨基甲酸酯；
(R)-N-(3-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟 甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丙基)-N-羟基甲酰胺；
4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基) 呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基)丁酸；
4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋 喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(5-甲基噻吩-2-基)乙基)氨基)丁酸；
4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋 喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(5-甲基呋喃-2-基)乙基)氨基)丁酸；
4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋 喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(3-羟基苯基)乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸；
4-((2-(1'-((5-乙炔基呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(5-甲基呋喃-2-基)乙基)氨基)丁酸；
4-((2-(1'-(苯并呋喃-2-基甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二 氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(5-甲基呋 喃-2-基)乙基)氨基)丁酸；
(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲 基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)-N-羟基丁酰胺；
(R)-2-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸；
4-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)丁酸；
2-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸；
(R)-4-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)丁酸；
3-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丙酸；
2-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)乙酸；
3-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丙酸；
3-(2-氨基-2-(3-氨基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-(2-氨基-2-(3-硝基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-(2-氨基-2-(4-硝基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-(2-氨基-2-(4-氨基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-(2-氨基-2-(2-氨基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
3-(2-氨基-2-(2-硝基苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮；
(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃 -2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-(3-(3-甲氧基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯；
1-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)-3-甲基脲；以及
N-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)乙酰胺。
可以通过包括以下实施例部分示出的方法的公知有机合成方法 制备本发明的化合物。
根据反应式1示出的流程可制备用于制备式(I)的化合物(其中A 为O、S或取代的N)的中间体化合物(iv)。
[反应式1]
其中，
R4、R5a、R5b、R7a和R7b与式(I)中定义的具有相同含义。
如反应式1所示，可以在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中用碱(例 如NaH)处理磷酰基乙酸三乙酯并搅拌，随后向其中加入R4-取代的 4-哌啶酮来制备化合物(i)。然后使化合物(i)与化合物(i-a)反应，以制 备化合物(ii)。使化合物(ii)进行脲和HCl的处理，随后加热以制备化 合物(iii)。最后，化合物(iii)可在NaOH水溶液和醇的混合溶剂中进 行尿嘧啶环化反应，以生成中间化合物(iv)。
根据反应式2所示的流程使用在上述反应中制得的化合物(iv)可 制备本发明的式(I)的化合物。
[反应式2]
其中，
R1、R3a、R3b、R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b和A与式(I)中定义 的具有相同含义。
如反应式2所示，可用R6-X和碱处理化合物(iv)以生成化合物 (v)。然后，用N-保护的甲磺酸盐(化合物(v-a))和碱处理化合物(v)， 随后对混合物加热以获得化合物(vi)。化合物(vi)可进行脱保护，以从 其除去保护基团1(PG1)来制备化合物(vii)，使用R4-卤化物或R4-醛 试剂对所得化合物(vii)进行烷基化或还原胺化，以制备引入R4的化 合物(viii)。最后，可对化合物(viii)进行脱保护，去除去保护基团 2(PG2)，产生化合物(ix)(即式(I)的化合物)。
上述反应式2中用作中间体的化合物(v)可以通过反应式3所示 的流程制备。
[反应式3]
其中，
R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b和A与式(I)中定义的具有相同含义。
如反应式3所示，在R6-胺和酸(例如乙酸)的存在下对化合物(ii) 加热，以生成烯胺化合物(化合物(iii-a))，随后使其与氯羰基异氰酸 酯反应，以制备脲化合物(化合物(iii-b))。然后，使脲化合物与NaOH 水溶液反应，以获得尿嘧啶化合物(v)。
上述反应式2中用作中间体的化合物(viii)可以通过反应式4所 示的流程制备。
[反应式4]
其中，
R1、R3a、R3b、R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b、n和A与式(I)中定 义的具有相同含义。
如反应式4所示，通过使化合物(v)脱保护制备的化合物(x)可以 与R4-卤化物或R4-醛反应以对其引入R6基团，然后在适合的甲磺酸 盐化合物(化合物(v-a))和碱的存在下通过加热使所得化合物(化合物 (xi))烷基化，以生成化合物(viii)。
此外，使用化合物(ix)根据反应式5所示的流程可制备本发明中 式(I)的化合物。
[反应式5]
其中，
R1、R2、R3a、R3b、R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b、n和A与式(I) 中定义的具有相同含义。
如反应式5所示，可在碱的存在下使用烷基卤(R2-X)使化合物(ix) 进行烷基化，以制备化合物(xii)，随后对其水解或脱保护以生成化合 物(xiii)。或者，可使用R2-醛对化合物(ix)进行还原胺化，以获得化 合物(xiii)。
同时，根据反应式6所示的流程可制备R3a为H且R3b为芳环或 取代的芳环的式(I)的化合物。
[反应式6]
其中，
R1、R4、R5a、R5b、R6、R7a、R7b、n和A与式(I)中定义的具有 相同含义。
如反应式6所示，可对化合物(xiv)进行脱保护，用于从其除去 保护基团1(PG1)，以制备化合物(xv)，随后使化合物(xv)烷基化或还 原胺化，用于对其引入酸-前驱体酯，以制备化合物(xvi)。最后，可 对化合物(xvi)进行脱保护和水解，生成化合物(xvii)(即式(I)的化合 物)。
同时，根据反应式7所示的流程可制备用于制备A为CH2的式 (I)的化合物的中间体化合物(ii)。
[反应式7]
其中，
R4、R5a、R5b、R7a、R7b和A与式(I)中定义的具有相同含义。
如反应式7所示，例如可使化合物(xviii)烷基化，用于对其引入 R4，以制备化合物(xix)，随后将其水解，以生成化合物(xx)。可将化 合物(xx)加入1,1'-羰基咪唑(CDI)并搅拌，以制备混合物，将通过向 乙腈(ACN)中加入氯化镁、三乙胺(TEA)和丙二酸单乙酯钾盐制备的 溶液加入所得混合物中以生成化合物(xxi)。用三乙胺和4-乙酰氨基 苯磺酰叠氮处理由此获得的化合物(xxi)，以制备化合物(xxii)，随后 在室温下使化合物(xxii)与醋酸铑(II)二聚体反应，以获得化合物(ii)。
然后，可以使由此获得的中间体化合物(ii)进行如反应式1所示 的用于制备中间体化合物(iv)的相同流程，随后进行如反应式2所示 的流程，以获得本发明的化合物。
本发明的式(I)的化合物可以游离酸或游离碱的形式使用。或者， 本发明的化合物可以是酸加成盐或碱加成盐的形式。本发明化合物 的酸加成盐可根据本领域熟知的方法由有机酸或无极酸形成。
适合的有机酸的实例包括：马来酸、富马酸、苯甲酸、抗坏血 酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、水 杨酸、柠檬酸、葡糖酸、乳酸、扁桃酸、桂皮酸(sinnamic)、天冬氨 酸、硬脂酸、棕榈酸、乙醇酸、谷氨酸、苯磺酸。合适的无机酸的 实例包括盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。碱加成盐的实例包括： 用羧酸盐阴离子形成的盐；用有机和无机阳离子如选自碱金属和碱 土金属(例如锂、钠、钾、镁、钡和钙)、铵离子及其取代的衍生物(例 如二苄基铵、苄基铵、2-羟基乙基铵)的阳离子形成的盐。因此，术 语式(I)的“药学上可接受的盐”应理解为涵盖本领域中所有可用的 盐形式。
而且，前药也包含在本发明的范围内。前药是指所有共价连接 的载体，一旦施用于患者，其能够通过使共价键断裂在体内释放式(I) 的化合物。通常，通过修饰官能团制备前药，并且这种修饰可通过 常规操作或通过代谢在体内消除，以产生活性化合物。例如，前药 包含与用于当施用于患者时通过裂解形成羟基、氨基或疏基的基团 键合的化合物。本发明的代表性实例包括但不限于，用于式(I)的化 合物的醇和胺官能团的醋酸盐、甲酸盐和苯甲酸盐衍生物。另外， 在羧酸(-COOH)的情况中，前药可包含酯的形式，如甲基酯、乙基酯 等。
本发明也涉及式(I)的化合物的立体异构体。式(I)的化合物可具 有手性中心，因此以外消旋体的形式存在，或以对映体或非对映体 的外消旋混合物的形式存在，其均落入本发明的范围内。此外，式(I) 的化合物可具有轴手性，呈阿托异构体(atropisomer)形式。而且，该 化合物的一些晶体可显示多晶型物，其也在本发明的范围内。此外， 式(I)的化合物可以与水或任何有机溶剂形成溶剂合物，所有溶剂合 物也都落入本发明的范围内。
而且，本发明提供了用于预防或治疗性激素相关疾病的药物组 合物，其包含作为活性成分的式(I)的化合物或其立体异构体、前药 或药学上可接受的盐。该药物组合物还可包含药学上可接受的载体 或媒介。
所述性激素相关疾病选自：子宫内膜异位症、闭经、月经不调、 子宫肌瘤、子宫纤维瘤、多囊卵巢病、红斑狼疮、多毛症、性早熟、 矮小症、痤疮、脱发、性腺激素依赖性肿瘤(例如前列腺癌、乳腺癌、 卵巢癌、子宫癌、垂体肿瘤等)、产生促性腺激素的垂体腺瘤、睡眠 呼吸暂停、肠易激综合征、经前期综合征、良性前列腺增生、避孕 和不育(例如辅助生殖技术，如体外受精)，以及阿尔茨海默病。
本发明的化合物的日剂量应根据各种相关因素来确定，包括待 治疗的个体、疾病或病症的严重性、施用率、医生的判断等。可将 作为活性成分的本发明的化合物以0.01-100mg/kg(体重)、优选 0.2-50mg/kg(体重)的范围，每日2次或按时或不按时地通过口服或 肠胃外给药的方式施用于包括人的哺乳动物。
可根据常规方法配制本发明的药物组合物，其可以制备成口服 制剂的形式，如片剂、丸剂、粉剂、胶囊剂、糖浆剂、乳剂、微乳 剂及其他口服制剂，或者配制成肠胃外制剂，如肌内给药、静脉给 药或皮下给药制剂。
用于口服制剂的载体的实例可包括纤维素、硅酸钙、玉米淀粉、 乳糖、蔗糖、葡萄糖、磷酸钙、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、明 胶、滑石、表面活性剂、悬浮剂、乳化剂、稀释剂及其他载体。用 于可注射制剂的载体的实例可包括水、盐水、葡萄糖溶液、葡萄糖 溶液类似物、醇类、乙二醇类、醚(例如聚乙二醇400)、油类、脂肪 酸、脂肪酸酯、甘油酯、表面活性剂、助悬剂、乳化剂及其他载体。
而且，本发明提供了预防或治疗个体的性激素相关疾病的方法， 包括对有需要的个体施用有效量的式(I)、其立体异构体、前药或药 学上可接受的盐。
此外，本发明提供了式(I)的化合物或其立体异构体、前药或药 学上可接受的盐在制备用于治疗或预防性激素相关疾病的药物中的 用途。
下文中，通过以下实施例更详细地描述本发明，但提供这些实 施例仅用于说明的目的，本发明并不限于此。
实施例1:(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-(3-氟代苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二 酮的合成
步骤A.2-(1-苄基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1)的制备
将氢化钠(60％分散于矿物油)(2.53g,634mmol)加入无水四氢呋 喃(80mL)，并将所得混合物在冰浴中搅拌10min(分钟)。然后，在 相同温度下缓慢加入磷酰基乙酸三乙酯(12.6mL,63.4mmol)。所得溶 液在室温下搅拌30min，并在冰浴中冷却，随后加入将1-苄基-4-哌 啶酮(10.5g,52.8mmol)稀释于无水四氢呋喃(20mL)中制备的溶液。 所得溶液在室温下于氮气氛下搅拌30min。在冰浴中冷却反应溶液， 并加入饱和氯化铵水溶液以完成反应。用乙酸乙酯对水层萃取两次。 分离有机层，用MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层 析(洗脱液：己烷/乙酸乙酯＝5/1～3/1)纯化浓缩物，并在真空下干燥， 以产生呈清澈液体的标题化合物(13.5g，产率：98％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.26(3H,td),2.31(2H,m),2.51(4H, m),2.98(2H,m),3.51(2H,s),4.13(2H,q),5.63(1H,s),7.25(1H,m), 7.29-7.33(4H,m)
步骤B.8-苄基-3-氧代-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵烷-4-羧酸乙酯(2)的制备
将氢化钠(60％分散于矿物油)(27.8g,0.694mol)加入1,4-二氧己 环(800mL)，并将所得混合物在冰浴中搅拌10min。然后，在相同温 度下缓慢加入羟基乙酸乙酯(72.3g,0.694mol)。所得溶液在室温下搅 拌2小时，向其中缓慢加入步骤A中制备的2-(1-苄基哌啶-4-亚基) 乙酸乙酯(1)(120g,0.463mol)。将所得溶液在80℃下加热并搅拌15 小时。随后，在冰浴中冷却反应溶液，并加入饱和氯化铵水溶液(200 mL)以完成反应。向混合物中加入饱和氯化钠水溶液(500mL)，在减 压下除去1,4-二氧己环。用乙酸乙酯对水层萃取四次。分离有机层， 用MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：己 烷/乙酸乙酯＝3/1～0/1)纯化浓缩物，并在真空下干燥，以产生呈亮 黄色液体的标题化合物(94.0g，产率：64％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.12(3H,t),2.10(2H,td),2.21 (2H,td),2.53-2.55(2H,m),3.40(2H,d),3.91(2H,s),4.00(2H,q),4.06 (1H,q),7.18-7.21(1H,m),7.24-7.29(4H,m).
步骤C.8-苄基-3-脲基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵-3-烯-4-羧酸乙酯(3)的制备
将在步骤B中获得的8-苄基-3-氧代-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵烷 -4-羧酸乙酯(2)(145g0.457mol)加入乙醇(457mL)，并在室温下将浓 HCl(190mL,2.29mol)缓慢加入其中。在100℃下加热并搅拌所得溶 液，冷却至0℃，缓慢加入10N NaOH水溶液(229mL,2.29mol)。 所得溶液在室温下搅拌30min，并单独放置20min。过滤由此获得 的固体，并用乙醇(2000mL)洗涤，以获得呈白色固体的标题化合物 (110g，产率：67％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.22(3H,t),1.36(2H,d),2.12 (2H,m),2.18(2H,m),2.58(2H,m),3.42(2H,s),4.17(2H,q),4.91(2H, s),5.39(1H,s),7.19-7.21(1H,m),7.24-7.29(4H,m),9.35(1H,s)
步骤D.1'-苄基-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(4)的制备
将在步骤C中获得的8-苄基-3-脲基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵-3- 烯-4-羧酸乙酯(3)(129g,0.359mol)加入乙醇(850mL)，并在室温下向 其中缓慢加入5N NaOH水溶液(71.8mL,0.359mol)。在70℃下加热 并搅拌所得溶液，搅拌1小时，冷却至0℃，缓慢加入浓HCl(30.0mL, 0.359mol)。所得溶液在室温下搅拌30min，并单独放置20min。过 滤由此获得的固体，并用乙醇(500mL)和乙腈(500mL)洗涤，以获得 呈白色固体的标题化合物(111g，产率：99％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.50(2H,d),2.00-2.20(4H,m), 2.65(2H,m),3.46(2H,s),4.65(2H,s),7.23(1H,m),7.30(4H,m), 10.95(1H,s),11.25(1H,s)
步骤E.1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]2,4(3H,7H)-二酮(5)的制备
将在步骤D中获得的1'-苄基-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮(4)(130g,0.416mol)和碳酸钾(114g,0.832mol) 悬浮于1-甲基-2-吡咯烷酮(325mL)，并向其中缓慢加入2-氟-6-(三氟 甲基)苄基溴(107g,0.416mol)。将所得混合物搅拌2小时，并加入乙 酸乙酯(1300mL)和去离子水(1300mL)。分离有机层，并用乙酸乙酯 (650mL)进一步萃取水层一次。用饱和氯化钠水溶液(2000mL)洗涤 有机层一次，用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将甲基叔丁 基醚(MTBE,300mL)加入浓缩过程获得的固体中，搅拌2小时，随 后过滤。用MTBE(200mL)洗涤过滤得到的固体，以获得呈白色固体 的标题化合物(92.7g,产率：46％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.56(2H,d),2.25(2H,m),2.35(2H, m),2.75(2H,m),3.50(2H,s),4.66(2H,s),5.12(2H,s),7.21-7.24(1H, m),7.27-7.30(3H,m),7.33-7.34(2H,m),7.47(1H,m),7.54(1H,d), 8.11(1H,s)
步骤F.(R)-(2-(1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(6)
将步骤E中得到的1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]2,4(3H,7H)-二酮(5)(9.40g,19.2mmol)、 (R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-苯乙基甲磺酸酯(12.1g,38.4mmol)、 碳酸钾(12.1g,38.4mmol)和四丁基溴化铵(620mg,1.92mmol)悬浮 于丙酮(250mL)，并加热至70℃，随后搅拌15小时。将反应溶液冷 却至室温，并过滤以除去固体。在减压下从滤液中除去丙酮，用乙 酸乙酯(200mL)稀释该溶液。用饱和碳酸氢钠溶液(200mL)洗涤所得 溶液两次，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱 液：己烷/乙酸乙酯＝9/1～1/1)纯化残余物，并在真空下干燥，以获 得呈乳白色泡沫的标题化合物(11.8g，产率：87％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.35(9H,s),1.54(2H,m),2.25-2.30 (2H,m),2.40(2H,m),2.77(2H,m),4.02(1H,d),4.27(1H,t),4.71(2H, m),5.01(1H,m),5.05(1H,d),5.24(1H,d),5.64(1H,d),7.21-7.37 (11H,m),7.46(1H,m),7.55(1H,d).
步骤G.(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(7)的制备
将步骤F获得的(R)-(2-(1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4- 二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基) 氨基甲酸叔丁酯(6)(11.8g,16.6mmol)溶于甲醇(250mL)，加入 Pd/C(2.40g,20％w/w)，为混合物充氢气，并搅拌15小时。使用硅 藻土垫(Celite pad)过滤所得混合物。在减压下浓缩滤液，真空下干 燥，以获得呈乳白色标题化合物(7.70g,产率：75％)。
步骤H.(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(8)
将步骤G中获得(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲 酸叔丁酯(7)(30mg,0.0485mmol)与3-氟苄基溴(9L,0.0727mmol)和 N,N-二异丙基乙胺(17L,0.0970mmol)一起加入二氯甲烷溶液(2mL) 中，随后在室温下搅拌15小时。浓缩反应溶液，并用MPLC(乙酸 乙酯/己烷＝1/4～1/1)纯化，以获得呈无色油状的标题化合物(31mg,产 率：88％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.58-7.22(m,9H),7.09-7.14(m,2H), 6.92(m,1H),5.64(d,1H),5.29-4.99(m,3H),4.72(m,2H),4.28(m,1H), 4.03(m,1H),3.52(s,2H),2.76(m,2H),2.26-2.47(m,4H),1.57(t,2H), 1.36(s,9H)
步骤I.(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(9)的制备
将步骤H获得的(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-(3-氟代苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(8)(31mg,0.0427mmol)加入二氯甲烷(2mL) 和三氟乙酸(0.1mL)中，在室温下搅拌混合物2.5小时。用饱和 NaHCO3(水溶液)中和反应溶液，并用二氯甲烷萃取。用MgSO4干燥 有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/二氯甲烷＝0/100～1/9)纯化，以获得 呈白色无定形固体的标题化合物(21mg,产率：79％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.57-7.08(m,11H),6.92(m,1H), 5.15(d,2H),4.70(s,2H),4.35(m,1H),4.19(m,1H),4.05(m,1H),3.51(s, 2H),2.74(m,2H),2.25-2.46(m,4H),1.55(m,2H)；MS(ESI)m/z627.8 (MH+)
同时，通过以下步骤制备作为中间体的1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟 甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(5)。
步骤A.8-苄基-3-((2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵-3-烯-4-羧酸乙酯(3a)
将8-苄基-3-氧代-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵烷-4-羧酸乙酯(2)(560 mg,1.76mmol)和(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)甲胺(375mg，1.94mmol)溶 于甲苯(1mL)中，加入乙酸(111μL,1.94mmol)，并在70℃下搅拌 12小时。将所得溶液冷却至室温，用二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸 氢钠水溶液洗涤。用二氯甲烷再萃取水层一次，收集有机层，并在 减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：己烷/乙酸乙酯＝2/1)纯化残余 物，并在真空下干燥，以获得呈乳白色油状的标题化合物(864mg， 产率：99％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.26(3H,t),1.48(2H,m),2.31(4H, m),2.73(2H,m),3.53(2H,s),4.16(2H,q),4.41(2H,d),4.81(2H,s), 7.21-7.35(5H,m),7.42-7.49(3H,m)
步骤B.8-苄基-3-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)脲基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]葵-3-烯-4-羧酸乙酯(4a)
将8-苄基-3-((2-氟-6-(三氟甲基)苄基)氨基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5] 葵-3-烯-4-羧酸乙酯(3a)(6.5g,0.013mol)溶于二氯甲烷(60mL)，冷却 至0℃，并在氮气氛下缓慢加入N-(氯甲酰)异氰酸酯(1.8mL,0.021 mol)，随后在室温下搅拌2小时。将反应溶液冷却至0℃，再加入 N-(氯甲酰)异氰酸酯(1.0mL,0.012mol)，并在室温下搅拌2小时。再 将反应溶液冷却至0℃，缓慢加入饱和碳酸氢钠水溶液，并从其中分 离有机层。用二氯甲烷再萃取水层一次，收集有机层，并在减压下 浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝98/2～95/5)纯化残余 物，并在真空下干燥，以获得呈黄色泡沫的标题化合物(2.6g，产率： 37％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.18(3H,t),1.70-1,76(2H,m), 2.05-2.10(1H,m),2.18-2.27(3H,m),2.65(1H,m),2.73(1H,m), 3.43-3.49(2H,m),4.03-4.19(2H,m),4.76(1H,d),5.52(1H,d),6.26 (1H,s),7.20-7.30(6H,m),7.45(1H,m),7.53(1H,m),7.73(1H,s)
步骤C.1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(5)的制备
将8-苄基-3-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)脲基)-1-氧杂-8-氮杂螺 [4.5]葵-3-烯-4-羧酸乙酯(4a)(2.6g,4.86mmol)溶于乙醇(60mL)，并 向其中缓慢加入1N NaOH(48mL,48.6mmol)，随后在70℃下搅拌 12小时。浓缩反应溶液，用二氯甲烷稀释，并通过加入1N HCl水溶 液中和。分离有机层，用二氯甲烷萃取水层两次。收集有机层，用 Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：二氯 甲烷/甲醇＝97/3～90/10)纯化浓缩液，并在真空下干燥，以获得呈乳 白色固体的标题化合物(1.67g，产率：70％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.50(2H,d),2.17(4H,m), 2.67(2H,m),3.46(2H,s),4.83(2H,s),4.98(2H,s),7.24(1H,m),7.32(4H, m),7.60(3H,m),11.29(1H,s)
实施例1-1至1-75
除了使用用于引入下表1所示的相应的R4基团的R4-卤化物或 R4-醛试剂来代替实施例1步骤H中的3-氟苄基溴以外，按照与上面 实施例1所述的相同方法制备实施例1-1至1-75的化合物。
[表1]
按照以下方法制备用于制备实施例1-1至1-75的化合物所需的 中间体。
中间体的制备
2-(N-甲基甲磺酰氨基)乙基甲磺酸酯的合成
将2-(甲基氨基)乙醇(300mg,4mmol)与二氯甲烷(8mL)混合，并 向其中加入三乙胺(1.23mL,8.8mmol)。在室温下将甲磺酰氯(0.68 mL,8.8mmol)逐滴地缓慢加入混合物，并在氮气氛下反应16小时。 通过向反应溶液中加入水(10mL)以完成反应。用二氯甲烷(10mL) 萃取混合物两次，并从中分离有机层。向有机层加入硫酸钠，并搅 拌约5min，随后过滤。浓缩滤液，并在真空下干燥，以获得呈无色 油状的标题化合物(875mg,产率：94％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.38(t,J＝5.4Hz,2H),3.53(t,J＝ 5.3Hz,2H),3.08(s,3H),2.99(s,3H),2.88(s,3H).
2-(甲基磺酰基)乙基甲磺酸酯的合成
将2-(甲基磺酰基)乙醇(497mg,4mmol)与二氯甲烷(8mL)混合， 并向其中加入三乙胺(0.62mL,4.4mmol)。在室温下向其中逐滴缓慢 加入甲磺酰氯，并在氮气氛下使混合物反应16小时。通过向反应溶 液中加入水(10mL)以完成反应。用二氯甲烷(10mL)萃取该溶液两 次，向由此获得的有机层中加入硫酸钠，并搅拌大约5min，随后过 滤。浓缩滤液，并在真空下干燥，以获得呈无色油状的标题化合物(540 mg,产率：67％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.70–4.62(m,2H),3.68(s,1H), 3.48–3.42(m,2H),3.13–3.08(m,3H),3.04(d,J＝0.9Hz,3H).
2-(溴甲基)-6-(三氟甲基)吡啶的合成
将2-甲基-6-(三氟甲基)吡啶(100mg,0.620mmol)溶于CCl4(3mL)，向其中加入N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)(110mg,0.620mmol)和 1,1'-偶氮(环己烷甲腈)(VAZO,8mg,0.031mmol)，随后在90℃下加热 并搅拌15小时。过滤反应溶液，并在减压下浓缩滤液。用MPLC (Hex/EA＝5:1)纯化所得残余物，以获得呈白色固体的标题化合物 (42.5mg,产率：28.4％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.60(2H,s), 7.61(1H,d),7.68(1H,d),7.90(1H,t)
实施例2:(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)- 基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(10)的合成
<方法1>
将(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(1-16)(93 mg,0.145mmol)溶于甲醇(2.9mL)(其可根据底物用二氯甲烷或二氯 乙烷替代)，并在搅拌下向其中逐滴缓慢加入15％琥珀半醛水溶液 (148mg,0.218mmol)。将三乙酰氧基硼氢化钠(307mg,1.45mmol)加 入混合物，并在氮气氛下搅拌2小时。浓缩反应溶液，加入二氯甲 烷(10mL)和饱和碳酸氢钠溶液(10mL)，以分层。用二氯甲烷(10mL) 对有机层萃取两次。向有机层加入硫酸钠并搅拌约5min，随后过滤。 浓缩滤液，通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝10/1～5/1)纯化所 得残余物，并在真空下干燥，以获得呈白色泡沫的标题化合物(10)(65 mg，产率：62％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.55(d,J＝7.9Hz,1H),7.45(td,J ＝8.4,5.3Hz,1H),7.41–7.36(m,3H),7.36–7.31(m,3H),7.30–7.27 (m,1H),7.24–7.18(m,3H),5.22–5.06(m,2H),4.85–4.75(m,2H), 4.38(dd,J＝13.7,10.6Hz,1H),4.27(dd,J＝10.6,4.3Hz,1H),3.99 (dd,J＝13.6,4.3Hz,1H),3.50(s,2H),2.81–2.64(m,3H),2.56–2.41 (m,2H),2.40–2.23(m,4H),1.76–1.52(m,3H).
<方法2>
并且，通过以下方法制备实施例2的化合物。
步骤A.(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸乙酯(11)
将(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(1-16)(200 mg,0.30mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(1mL)，依次加入N,N-二异丙 基乙胺(DIPEA,68μL,0.39mmol)和4-溴-丁酸乙酯(52μL,0.36 mmol)，随后在55℃下搅拌12小时。将反应溶液冷却至室温，用己 烷/乙酸乙酯(1/1)的混合溶液稀释，并用氯化铵饱和水溶液洗涤，以 分离有机层。用己烷/乙酸乙酯(1/1)的混合溶液再萃取水层一次，收 集有机层，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇 ＝98/2～95/5)纯化所得残余物，并在真空下干燥，以获得呈白色泡沫 的标题化合物(150mg，产率：64％)。
步骤B.(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(10)的制备
将(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁乙酯(100mg,0.13mmol)溶于乙醇(1mL)，并向其中缓慢加入1N NaOH的水溶液(380μL,0.39mmol)。在室温下搅拌混合物1小时， 并浓缩。用1N HCl的水溶液中和所得残余物，用二氯甲烷稀释，并 从中分离有机层。用Na2SO4干燥有机层，过滤，并在减压下浓缩， 以获得呈白色泡沫的标题化合物(60mg,产率：90％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.55(d,J＝7.9Hz,1H),7.45(td,J ＝8.4,5.3Hz,1H),7.41–7.36(m,3H),7.36–7.31(m,3H),7.30–7.27 (m,1H),7.24–7.18(m,3H),5.22–5.06(m,2H),4.85–4.75(m,2H), 4.38(dd,J＝13.7,10.6Hz,1H),4.27(dd,J＝10.6,4.3Hz,1H),3.99 (dd,J＝13.6,4.3Hz,1H),3.50(s,2H),2.81–2.64(m,3H),2.56–2.41 (m,2H),2.40–2.23(m,4H),1.76–1.52(m,3H).
<方法3>
并且，通过以下方法制备实施例2的化合物。
步骤A.(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁腈(13)的制备
将(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(1-16)(10g, 15mmol)溶于乙腈(200mL)，然后将NaI(6.2g,45mmol)、K2CO3(6.8g, 45mmol)和4-溴丁腈(2.3mL,22.5mmol)依次加入混合物中，随后在 95℃下搅拌12小时。将所得溶液冷却至室温，过滤，并在减压下浓 缩，以从中除去乙腈。用二氯甲烷稀释所得溶液，用饱和氯化铵水 溶液洗涤，并分离有机层。在减压下浓缩有机层，通过硅胶层析(洗 脱液：二氯甲烷/甲醇＝98/2～95/5)纯化所得残余物，并在真空下干 燥，以获得呈白色泡沫的标题化合物(8.2g，产率：75％)。
步骤B.(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(10)的制备
将(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基) 丁腈(7.1g,9.7mmol)溶于乙酸(215mL)，并用冰水冷却该混合物。向 混合物中缓慢加入水(130mL)和浓硫酸(130mL)。在室温下搅拌所得 混合物1小时，并在80℃下搅拌12小时。将所得溶液冷却至室温， 并向其中缓慢加入5N NaOH溶液，以调节pH为6。用乙酸乙酯(1,500 mL)萃取该溶液，用无水MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。用 乙酸乙酯(70mL)稀释所得溶液，搅拌，并加入1N HCl醚溶液(22mL, 22mmol)。过滤形成的白色沉淀，并用醚(50mL)洗涤。将过滤的固 体溶于水(200mL)，并向其中加入2N NaOH溶液，以调节pH为6。 用乙酸乙酯(150mL)萃取所得溶液三次，用无水MgSO4干燥，过滤， 并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：乙腈/甲醇＝3/1)纯化所得 残余物，并在真空下干燥，以获得呈白色泡沫的标题化合物(5.3g， 产率：73％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.67(4H,m),2.30-2.58(7H,m), 2.63-2.87(3H,m),3.61(2H,s),4.00(1H,dd),4.27(1H,dd),4.38(1H,dd), 4.78(2H,s),5.13(2H,m),6.29(1H,d),6.72(1H,d),7.25-7.48(7H,m), 7.55(1H,d)
此外，在真空下干燥硅胶层析纯化过程中获得的(R)-4-((2-(1'-(3- 氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酰胺(化合物14)， 产生呈白色泡沫的标题化合物(400mg,产率：5％)。
实施例2-1至2-15
除了使用包含下表2中所示的相应R4基团的各化合物代替实施 例1-16中的化合物作为起始材料以外，按照与上面实施例2所述的 相同方法制备实施例2-1至2-15的化合物。
[表2]
实施例3:(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮 (26)的合成
步骤A.3-(1-苄基哌啶-4-基)丙酸乙酯(15)的制备
将3-(哌啶-4-基)丙酸乙酯(5g,26.989mmol)加入乙腈(150mL)， 然后向其中加入三乙胺(8.3mL,59.376mmol)，随后搅拌。随后，在 冰浴中将苄基溴(6.45mL,53.978mmol)加入所得溶液中。将混合物加 热至室温，搅拌过夜，并在减压下浓缩。用蒸馏水(500mL)稀释浓缩 的反应溶液，用乙酸乙酯(300mL)萃取两次。用MgSO4干燥有机层， 浓缩，并用MPLC(乙酸乙酯/己烷＝1/4～1/1)纯化，以获得呈黄色油 状的标题化合物(2.75g,产率：37％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.31-7.21(m,5H),4.12(q,2H),3.48(s, 2H),2.86(m,2H),2.30(m,2H),1.92(m,2H),1.57(m,4H),1.28-1.20(m, 3H),1.25(t,3H)
步骤B.3-(1-苄基哌啶-4-基)丙酸(16)的制备
将步骤A中制备的3-(1-苄基哌啶-4-基)丙酸乙酯(15)(2.75g, 9.982mmol)溶于甲醇(10mL)，向其中加入1N NaOH水溶液(30mL, 29.947mmol)，并在室温下搅拌过夜。在冰浴中用1N HCl的水溶液 中和所得溶液，并在减压下浓缩反应溶液。用甲醇/二氯甲烷(1/9)稀 释浓缩液，并用MgSO4干燥。在减压下浓缩滤液，以获得呈白色固 体的标题化合物(粗制,2.38g)。
MS(ESI)m/z248.4(MH+)
步骤C.5-(1-苄基哌啶-4-基)-3-氧代戊酸乙酯(17)的制备
将丙二酸单乙酯钾盐(2.57g,15.113mmol)加入氯化镁(1.64g, 17.272mmol)和三乙胺(3.1mL,22.310mmol)的悬浮液中，并在室温 下搅拌2小时，以制备反应溶液1。将步骤B中制备的3-(1-苄基哌 啶-4-基)丙酸(16)(1.78g,7.197mmol)加入N,N,-二甲基甲酰胺(50 mL)，向其中加入1,1'-羰二咪唑(1.28g,7.917mmol)，并在室温下搅 拌2小时，以制备反应溶液2。
将反应溶液1加入反应溶液2，并在室温下搅拌过夜。用乙酸乙 酯稀释所得溶液，并用蒸馏水洗涤数次。用MgSO4干燥有机层，浓 缩，以获得呈黄色油状的标题化合物(粗制，2.02g)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32-7.21(m,5H),4.19(q,2H),3.50(s, 2H),3.43(s,2H),2.88(m,2H),2.55(t,2H),1.94(m,2H),1.56(m,4H), 1.31-1.24(m,3H),1.27(t,3H)
步骤D.5-(1-苄基哌啶-4-基)-2-二氮杂-3-氧代戊酸乙酯(18)的制备
将步骤C中制备的5-(1-苄基哌啶-4-基)-3-氧代戊酸乙酯(17) (2.14g,6.751mmol)连同三乙胺(1.04mL,7.426mmol)加入乙腈(70 mL)，搅拌，随后向其中加入4-乙酰氨基苯磺酰叠氮(1.622g,6.751 mmol)。将混合物搅拌过夜，在减压下浓缩，并加入二乙醚，随后搅 拌。过滤反应溶液，浓缩，并用MPLC(乙酸乙酯/己烷＝1/4～1/1)纯 化，以获得呈黄色油状的标题化合物(2.05g,产率：88％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.31-7.20(m,5H),4.29(q,2H),3.47(s, 2H),2.85(m,4H),1.92(m,2H),1.55(m,4H),1.32(t,3H),1.32-1.23(m, 3H)
步骤E.8-苄基-2-氧代-8-氮杂螺[4.5]葵烷-1-羧酸乙酯(19)的制备
在氮气氛下，将通过把步骤D制备的5-(1-苄基哌啶-4-基)-2-二 氮杂-3-氧代戊酸乙酯(18)(1.43g,4.164mmol)加入二氯甲烷(30mL) 制得的溶液加入醋酸铑(II)二聚体(92mg,0.208mmol)和二氯甲烷(25 mL)的悬浮液中，随后在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩反应溶液， 并用MPLC(乙酸乙酯/己烷＝1/4～2/3)纯化，以获得呈黄色油状的标 题化合物(不纯的，985mg)。
MS(ESI)m/z316.7(MH+)
步骤F.8-苄基-2-脲基-8-氮杂螺[4.5]葵-1-烯-1-羧酸乙酯(20)的制备
将在1,4-二氧己环(0.2mL,0.793mmol)中的4.0M HCl加入通过 把步骤E中制备的8-苄基-2-氧代-8-氮杂螺[4.5]葵烷-1-羧酸乙酯(19) (50mg,0.159mmol)和尿素(95mL,1.585mmol)加入乙醇(2mL)中 制得的溶液中，并于100℃在回流条件下搅拌混合物5小时。将反应 溶液冷却至室温，并用2N NaOH的水溶液中和。过滤由此获得的固 体，并用乙醇洗涤，在真空下干燥，以获得呈白色固体的标题化合 物(22mg，产率：40％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H),7.34-7.20(m,5H), 6.73(br s,2H),4.17(q,2H),3.44(s,2H),2.96(t,2H),2.66(d,2H),2.26(m, 2H),2.01(m,2H),1.68(t,2H),1.26(t,3H),1.11(d,2H)
MS(ESI)m/z358.4(MH+)
步骤G.1'-苄基-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮(21)的制备
将在步骤F中制备的8-苄基-2-脲基-8-氮杂螺[4.5]葵-1-烯-1-羧酸 乙酯(20)(15mg,0.0437mmol)加入乙醇(1mL)，并向其中加入2N NaOH的水溶液(0.16mL,0.320mmol)，使反应在70℃下进行1小时。 将反应溶液冷却至室温，并用1N HCl水溶液中和，然后在减压下浓 缩。用10％甲醇/二氯甲烷稀释浓缩液，并用Na2SO4干燥。在减压下 浓缩滤液，并干燥，以获得呈白色固体的标题化合物(13mg,产率： 96％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.34-7.21(m,5H),3.43(s,2H), 2.68(d,2H),2.57(t,2H),2.24(m,2H),1.97(m,2H),1.84(t,2H),1.22(d, 2H)
MS(ESI)m/z312.7(MH+)
步骤H.1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮(22)的制备
使用1'-苄基-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮 (21)(30mg,0.0963mmol)重复实施例1中用于制备化合物5的步骤(实 施例1的步骤E)，以获得呈白色固体的标题化合物(23mg,产率： 48％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),7.54-7.20(m,8H),5.22(s, 2H),3.50(s,2H),2.81(d,2H),2.62(t,2H),2.53(m,2H),1.98(m,4H), 1.29(d,2H)
步骤I.(R)-(2-(1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(23)
使用1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶 -5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮(22)(20mg,0.0410mmol)重复实施例1中 用于制备化合物6的步骤(实施例1的步骤F)，以获得呈白色固体的 标题化合物(14mg,产率48％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.41-7.23(m,13H),5.81(d,1H), 5.26(m,2H),4.99(m,1H),4.27(m,1H),4.02(m,1H),3.52(s,2H), 2.84-2.57(m,6H),2.05-1.88(m,4H),1.35(s,9H),1.28(m,2H)
步骤J.(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(24)
使用(R)-(2-(1'-苄基-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸 叔丁酯(23)(159mg,0.225mmol)重复实施例1用于制备化合物7的步 骤(实施例1的步骤G)以获得呈白色固体的标题化合物(69mg)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.57-7.20(m,8H),5.75(d,1H), 5.23(m,2H),5.01(m,1H),4.23(m,1H),4.05(m,1H),3.63(m,2H), 3.10(t,2H),2.72(m,4H),2.03(m,2H),1.65(d,2H),1.34(s,9H)
步骤K.(R)-(2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(25)
使用(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢 螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯 (24)(66mg,0.107mmol)和3-氯苄基溴(29mg,0.128mmol)重复实施例1 用于制备化合物8的步骤(实施例1的步骤H)以获得呈无色油状的标 题化合物(47mg，产率：57％)。
MS(ESI)m/z741.9(M+)
步骤L.(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮(26)的制备
使用(R)-(2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基甲 酸叔丁酯(25)(47mg,0.0615mmol)重复实施例1用于制备化合物9的 步骤(实施例1的步骤I)以获得呈白色固体的标题化合物(34mg,产 率：84％)。
MS(ESI)m/z641.8(M+)
实施例3-1至3-6
除了使用用于引入下表3所示的相应的R4基团的R4-卤化物或 R4-醛试剂来代替实施例3步骤K中的3-氯苄基溴以外，按照与上面 实施例3所述的相同方法制备实施例3-1至3-6的化合物。
[表3]
实施例4:(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1- 苯乙基)氨基)丁酸(27)的合成
步骤M.(R)-4-((2-(1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1,2,6,7-四氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(4H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(27)的制备
使用(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-(3-氯代苄基)-1-(2-氟-6-(三氟甲 基)苄基)-6,7-二氢螺[环戊[d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(1H,3H)-二酮 (26)(29mg,0.0436mmol)重复实施例2中用于制备化合物10的步骤 (方法1)，以获得呈白色无定形固体的标题化合物(15mg,产率 45％)。
MS(ESI)m/z727.8(MH+)
实施例4-1至4-6
除了使用包含下表4中所示的相应R4基团的各化合物代替实施 例4中的化合物(26)作为起始材料以外，按照与上面实施例4所述的 相同方法制备实施例4-1至4-6的化合物。
[表4]
实施例5：(R)-3-(2-((3-(2H-四唑-5-基)丙基)氨基)-2-苯乙基)-1-(2- 氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃 [3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(30)的合成
步骤A.(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁腈(29)的制备
将4-溴丁腈(51.4μL,0.517mmol)、NaI(155mg,1.035mmol)和 K2CO3(143mg,1.035mmol)加入通过将(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2- 氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃 [3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(28)(230mg,0.345mmol)加入 ACN(3.45mL)制得的溶液中，在90℃搅拌23小时。将反应溶液冷却 至室温，并浓缩。将饱和NH4Cl溶液加入所得溶液中，用二氯甲烷 (DCM)萃取。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇 /DCM＝1/45～1/24)纯化，以获得呈黄色泡沫的标题化合物(185.5mg, 产率：73％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.57(1H,d),7.48(1H,dd),7.39– 7.28(5H,m),7.24(1H,d),6.72(1H,d),6.29(1H,d),5.23–5.06(2H, m),4.70(2H,s),4.22(1H,dd),3.99(2H,ddd),3.61(2H,s),2.79(2H, d),2.56(1H,dt),2.48–2.22(7H,m),1.76–1.40(6H,m).
步骤B.(R)-3-(2-((3-(2H-四唑-5-基)丙基)氨基)-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(30)的制备
在密封管中，将叠氮基三丁基锡(lV)(204μL,0.74mmol)加入通 过把步骤A制备的(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁腈(29)(135.5mg,0.185mmol) 加入甲苯(1mL)制备的溶液中，并在120℃下搅拌23小时。将所得溶 液冷却至室温，并加入饱和NH4Cl溶液，然后用DCM萃取。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/99～1/9)纯化，以获得 呈白色泡沫的标题化合物(58.3mg,产率：40％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.54(d,1H),7.47(d,1H),7.42(d, 1H),7.40–7.31(m,3H),7.22(d,1H),6.71(dd,1H),6.28(d,1H),5.17 (s,2H),4.87(s,2H),4.46(dd,1H),4.30(dd,1H),4.04(dd,1H),3.59(d, 2H),3.23–3.07(m,1H),3.06–2.91(m,1H),2.78(dt,3H),2.31(ddd, 5H),2.05(s,1H),1.74(s,1H),1.58(d,1H),1.48(d,1H).
MS(ESI)m/z777.6(MH+)
实施例6:(R)-2-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)乙基甲氧基氨基甲酸酯(31)的合 成
步骤A.2-溴乙基甲氧基氨基甲酸酯的制备
将CDI(3.43g,21.15mmol)加入通过把2-溴乙醇(1mL,14.1mmol) 加入ACN(79.5mL)制得的溶液中，并在室温下搅拌1小时。当反应 完成时，将甲氧基胺·HCl(5.89g,70.5mmol)和咪唑(3.84g,56.4mmol) 加入反应混合物，随后在室温下搅拌6小时。浓缩所得溶液，加入 1N HCl，并用DCM萃取。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(乙 酸乙酯/己烷＝1/9～2/3)纯化，以获得呈清澈油状的标题化合物(2.64g, 产率：95％)。
步骤B.(R)-2-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)乙基甲氧基氨基甲酸酯(31)的制备
在通过把(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮(28)(493.3mg,0.74mmol)加入ACN(4.5mL)制备 的溶液中加入步骤A中制备的2-溴乙基甲氧基氨基甲酸酯(267.3mg, 1.35mmol)、碘化钠(202.3mg,1.35mmol)和K2CO3(186.6mg,1.35 mmol)，随后在100℃下搅拌14小时。将所得溶液冷却至室温，并浓 缩。将饱和NH4Cl溶液加入混合物，然后用DCM萃取所得溶液。用 MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/191～1/24)纯化， 以获得呈白色泡沫的标题化合物(72.8mg,产率：12％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.56(d,1H),7.52–7.41(m,1H), 7.35(d,3H),7.30(s,1H),6.75–6.68(m,1H),6.29(d,1H),5.90(d,1H), 5.14(s,2H),4.99–4.88(m,1H),4.72(s,2H),4.35–4.20(m,1H),4.00 (dd,2H),3.65(s,3H),3.60(d,3H),3.31(s,1H),2.79(d,2H),2.46– 2.29(m,3H),1.57(d,3H).
MS(ESI)m/z784.6(MH+)
实施例7:(R)-N-(3-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丙基)-N-羟基甲酰胺(32)的合成
步骤A.N-(苄氧基)甲酰胺的制备
在通过将甲酸(0.24mL,6.26mmol)加入DCM(18.9mL)制得的溶 液中加入CDI(1.01g,6.26mmol)，随后在室温下搅拌30min。将O- 苄基羟胺·HCl(1g,6.26mmol)、TEA(0.87mL,6.26mmol)和DCM(2 mL)加入反应溶液，随后在室温下搅拌3.5小时。用1N HCl洗涤所得 溶液。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝ 1/191～1/24)纯化，以获得呈清澈液体的标题化合物(628.8mg,产率： 66％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)8.33(s,1H),7.96(s,1H),7.40(s, 5H),4.96–4.85(s,2H)
步骤B.N-(苄氧基)-N-(3-溴丙基)甲酰胺
通过将1,3-二溴丙烷(0.635mL,6.26mmol)加入ACN(13.6mL)制 得的溶液中加入K2CO3(649.6mg,4.7mmol)，随后搅拌。将步骤A获 得的N-(苄氧基)甲酰胺(473.7mg,3.13mmol)和ACN(2mL)缓慢加入 反应溶液，随后在60℃下搅拌14小时。将所得溶液冷却至室温。将 水(5mL)加入反应溶液，然后用DCM萃取该溶液。用MgSO4干燥有 机层，浓缩，并用MPLC(EA/己烷＝0/100～1/4)纯化，以获得呈清澈油 状的标题化合物(303.8mg,产率：36％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)8.22(s,1H),7.37(d,5H),4.89(d, 2H),3.73(s,2H),3.42(s,2H),2.26–2.05(m,2H)
步骤C.(R)-N-(苄氧基)-N-(3-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丙基)甲酰胺(31-1)的制备
使用(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮(28)(620mg,0.93mmol)和步骤B中制备的N-(苄 氧基)-N-(3-溴丙基)甲酰胺(303.8mg,1.12mmol)重复实施例1步骤A 的步骤，以获得呈白色泡沫的标题化合物(31)(165.9mg,产率21％)。
步骤D.(R)-N-(3-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丙基)-N-羟基甲酰胺(32)的制备
在通过将步骤C中制备的(R)-N-(苄氧基)-N-(3-((2-(1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丙基)甲酰 胺(31-1)(165.9mg,0.19mmol)加入MeOH(1mL)制得的溶液中加入 10％Pd/C(degussa型,332.2mg,20wt％)，并用氢气吹气。将填充氢气 的气球与容器连接，并在室温下搅拌该溶液6小时。通过硅藻土垫过 滤所得溶液，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/49～3/7)纯化，以获得 呈白色泡沫的标题化合物(32)(38.3mg,产率：26％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.55(d,2H),7.47(dd,1H),7.37(t, 3H),7.29(d,2H),6.71(d,1H),6.28(d,1H),5.15(dd,2H),4.89(dd,1H), 4.83–4.64(m,3H),4.11(dd,1H),3.61(s,2H),3.51(d,2H),3.47(d, 1H),3.41–3.24(m,1H),2.79(d,2H),2.63–2.49(m,1H),2.47–2.22 (m,4H),2.03(d,1H),1.84(d,2H),1.67(d,2H).
实施例8：4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基)丁酸(36)的合成
步骤A.(2-羟基-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
向通过将2-氨基-2-(6-甲基(2-吡啶基))乙-1-醇盐酸盐(200mg, 1.06mmol)加入DCM(3.53mL)制得的溶液中加入DIPEA(0.37mL, 2.12mmol)，搅拌，随后向其中加入Boc-酸酐(255.3mg,1.17mmol)。 所得混合物在室温下搅拌21小时。向混合物中加入蒸馏水(5mL)， 并用DCM萃取。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(乙酸乙 酯/己烷＝1/9～2/3)纯化，以获得呈白色固体的标题化合物(205.3mg, 产率：77％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.58(t,1H),7.16(d,1H),7.08(d, 1H),5.88(s,1H),4.79(s,1H),4.39(s,1H),4.09–3.97(m,1H),3.91(s, 1H),2.53(s,3H),1.58(s,1H),1.45(s,9H).
步骤B.2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙基甲磺酸酯
在通过将步骤A中获得的(2-羟基-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基 甲酸叔丁酯(205.3mg,0.81mmol)加入DCM(2.7mL)制得的溶液中加 入TEA(0.13mL,0.97mmol)，搅拌，随后向其中加入MsCl(68.9μL, 0.89mmol)，并在室温下搅拌1小时。将饱和NaHCO3溶液加入反应 溶液中，并用DCM萃取该混合物。用MgSO4干燥有机层，浓缩， 以获得呈清澈油状的标题化合物(279.6mg,产率：104％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.57(t,1H),7.10(t,2H),5.85(s,1H), 5.04(s,1H),4.57(dd,1H),4.45(d,1H),2.89(s,3H),2.54(s,3H),1.47 (s,9H).
步骤C.(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(34)的制备
使用步骤B中制备的1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基) 呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮 (33)(100mg,0.18mmol)重复实施例3中用于制备实施例3的化合物 23的步骤(实施例3的步骤I)，以获得呈白色泡沫的标题化合物(137.2 mg,产率：97％)。
步骤D.3-(2-氨基-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(35)的制备
使用步骤C中制备的(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(34) (137.2mg,0.175mmol)重复实施例3中用于制备实施例3的化合物26 的步骤(实施例3的步骤L)，以获得呈白色泡沫的标题化合物(75.3mg, 产率：63％)。
步骤E.4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)氨基)丁酸(36)的制备
使用步骤D中制备的3-(2-氨基-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙基)-1-(2- 氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃 [3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(35)(65.6mg,0.096mmol)重复 实施例2中用于制备化合物10的步骤(实施例2的方法1)，以获得呈 白色泡沫的标题化合物(46.0mg,产率：62％)。
MS(ESI)m/z768.4(MH+)
实施例8-1和8-2
除了使用包含下表5中所示的相应R10基团的各化合物代替2-氨 基-2-(6-甲基(2-吡啶基))乙-1-醇盐酸盐以外，按照与实施例8所述的 相同方法制备实施例8-1至8-2的化合物。
[表5]
实施例9：4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-羟苯基)乙基)氨基)丁酸(46)的合成
步骤A&B.2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-羟基苯基)乙酸甲酯(38)的制备
在通过将DL-3-羟苯基甘氨酸(1g,5.98mmol)加入MeOH(12mL) 制得的溶液中加入亚硫酰氯(0.52mL,7.18mmol)，随后在80℃下搅拌 2小时。将所得溶液冷却至室温，并浓缩。用DCM(15mL)稀释浓缩 液，加入NaHCO3(753mg,8.97mmol)和TEA(0.92mL,6.58mmol)并 搅拌，随后向其中加入Boc2O(1.44g,6.58mmol)，并在室温下搅拌12 小时。用饱和NH4Cl溶液中和反应溶液，并用DCM萃取。用MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/191～1/24)纯化，以获 得呈乳白色泡沫的标题化合物(1.4g,产率：83％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.21(t,1H),6.92(d,1H),6.84(d, 1H),6.81–6.74(m,1H),5.55(s,1H),5.33–5.20(m,1H),5.16(s,1H), 3.72(s,3H),1.45(d,9H).
步骤C.(2-羟基-1-(3-羟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(39)的制备
将通过把上面获得的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-羟苯基)乙酸 甲酯(38)(1.4g,4.98mmol)加入THF(12mL)制得的溶液在冰浴中冷 却，并向其中缓慢加入在THF(4.98mL)中的1M LAH(氢化铝锂)。将 混合物温热至室温，并搅拌1小时。在冰浴中冷却所得溶液，然后向 其中缓慢加入饱和NH4Cl溶液，直到无更多气体形成。通过硅藻土 垫过滤反应溶液，加2N HCl以调节pH为1，并用DCM萃取。用 MgSO4干燥有机层，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/191～1/24)纯化， 以获得呈白色泡沫的标题化合物(1.29g,产率：102％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.23–7.14(m,1H),6.82(d,1H), 6.77–6.67(m,2H),6.12(s,1H),5.32(d,1H),4.74(d,1H),3.85(dd, 2H),2.48(s,1H),1.44(s,9H).
步骤D.(1-(3-(苄氧基)苯基)-2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(40)
在通过将步骤C中获得的(2-羟基-1-(3-羟苯基)乙基)氨基甲酸叔 丁酯(500mg,1.97mmol)加入丙酮(19.7mL)制得的溶液中加入 K2CO3(407.7mg,2.95mmol)，随后搅拌。将苄基溴(0.23mL,1.97mmol) 加入其中，随后在室温下搅拌19小时。将所得溶液加热到60℃，搅 拌1小时并冷却至室温。然后，过滤溶液，用丙酮洗涤，浓缩，并用 MPLC(甲醇/DCM＝1/191～1/24)纯化，以获得呈白色泡沫的标题化合物 (225.1mg,产率：33.3％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.46–7.40(m,2H),7.38(d,1H), 7.37–7.33(m,1H),7.31(d,1H),7.27(s,1H),6.94–6.89(m,2H),6.88 (d,1H),5.19(s,1H),5.06(s,2H),4.75(s,1H),3.90–3.73(m,2H),2.19 (d,1H),1.43(s,9H).
步骤E.2-(3-(苄氧基)苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基甲磺酸酯(41)的制备
使用步骤D中制备的(1-(3-(苄氧基)苯基)-2-羟乙基)氨基甲酸叔 丁酯(40)(112.5mg,0.33mmol)重复实施例4的步骤A的步骤，以获得 作为粗产物的标题化合物。
步骤F.(1-(3-(苄氧基)苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(42)的制备
使用步骤E制备的2-(3-(苄氧基)苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基) 乙基甲磺酸盐(41)(120.4mg,0.22mmol)重复实施例3的步骤I的步 骤，以获得呈白色泡沫的标题化合物(158mg,产率：82％)。
步骤G.3-(2-氨基-2-(3-(苄氧基)苯基)乙基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(43)的制备
使用步骤F中制备的(1-(3-(苄氧基)苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(42)(158.2mg, 0.18mmol)重复实施例3的步骤L的步骤，以获得呈白色泡沫的标题 化合物(99.1mg,产率：71％)。
步骤H.4-((1-(3-(苄氧基)苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基)丁酸乙酯(44)的制备
使用步骤G中制备的3-(2-氨基-2-(3-(苄氧基)苯基)乙基)-1-(2-氟 -6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃 [3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(45)(50.1mg,0.065mmol)重复 实施例2的方法2中的步骤A的步骤，以获得呈白色泡沫的标题化 合物(33.0mg,产率：57％)。
步骤I.4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-羟苯基)乙基)氨基)丁酸乙酯(45)的制备
在通过将步骤H中制备的4-((1-(3-(苄氧基)苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基)丁酸乙酯 (44)(33.0mg,0.037mmol)加入甲醇(1mL)制得的溶液中加入Pd/C (degussa型,4.95mg,15wt％)，并用氢气吹气10min。将填充氢气的 气球与容器连接，并在室温下搅拌该溶液1.5小时。通过硅藻土垫过 滤所得溶液，浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/99～1/19)纯化，以获得 呈白色泡沫的标题化合物(25.3mg,产率：86％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.54(d,1H),7.45(dd,1H),7.30(d, 1H),7.17(t,1H),6.86(d,2H),6.75–6.65(m,2H),6.30(d,1H),5.14(d, 1H),5.00(d,1H),4.74–4.59(m,2H),4.06(d,2H),3.61(s,2H),2.77(s, 2H),2.53–2.29(m,6H),2.25(t,2H),1.64(d,2H),1.60–1.45(m,2H), 1.19(t,3H).
步骤J.4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-羟苯基)乙基)氨基)丁酸(46)的制备
使用步骤I中制备的4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-羟苯基)乙基)氨基)丁酸乙酯(25.3mg,0.032 mmol)重复实施例2的方法2中步骤B的步骤，以获得呈白色泡沫的 标题化合物(14.3mg,产率：58％)。
MS(ESI)m/z769.2(MH+)
实施例10:(R)-4-((2-(1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟 甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(49)的制备
步骤A.(R)-(2-(1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(47)的制备
向通过将(R)-(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯 (100mg,0.16mmol)加入MeOH(1mL)制备的溶液中依次加入5-溴-2- 糠醛和NaBH(OAc)3，随后在室温下搅拌15小时。浓缩所得溶液， 加入饱和NaHCO3溶液，并用DCM萃取。用MgSO4干燥有机层， 浓缩，并用MPLC(甲醇/DCM＝1/191～1/24)纯化，以获得呈浅红色- 白色泡沫的标题化合物(62.5mg,产率：50％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.56(d,1H),7.47(dd,1H),7.40– 7.33(m,2H),7.31(d,2H),7.27(s,1H),7.24(s,1H),6.23(d,1H),6.19 (d,1H),5.64(s,1H),5.25(d,1H),5.05(d,1H),4.69(d,2H),4.26(d, 1H),4.01(d,1H),3.56(s,2H),2.80(d,2H),2.39(t,4H),1.55(d,3H), 1.37(s,9H).
步骤B.(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(48)的制备
使用(R)-(2-(1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1- 苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(47)(62.5mg,0.08mmol)重复用于制备实施 例3的化合物26的步骤，以获得呈白色泡沫的标题化合物(34.8mg,产 率：64.2％)。
步骤C.(R)-4-((2-(1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸(49)的制备
使用(R)-3-(2-氨基-2-苯乙基)-1'-((5-溴代呋喃-2-基)甲基)-1-(2-氟 -6-(三氟甲基)苄基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-2,4(3H,7H)-二 酮(48)(34.8mg,0.051mmol)重复实施例2中用于制备化合物10的步 骤(实施例2的方法1)，以获得呈白色泡沫的标题化合物(16.4mg,产 率：42％)。
MS(ESI)m/z763.1(MH+)
实施例10-1至10-2
除了使用包含下表6中所示的相应R4基团的各醛类化合物代替 5-溴-2-糠醛以外，按照与实施例10所述的相同方法制备实施例10-1 至10-2的化合物。
[表6]
实施例11:(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)-N-羟基丁酰胺(52)的合成
步骤A.苄氧基氨基甲酸苄酯(50)的制备
在0℃下，在通过将O-苄基-羟基胺盐酸盐(1.0g,6.27mmol)和 DIPEA(2.7mL,15.7mmol)加入CH2Cl2(15mL)制得的溶液中加入氯 甲酸苄酯(1.0mL,7.52mol)。搅拌所得溶液1小时，用水稀释，并用 CH2Cl2萃取。收集有机相，用MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩， 以获得呈液态的标题化合物(1.93g,产率：>100％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ4.87(2H,s),5.18(2H,s),7.29-7.41 (10H,m)
步骤B.N-(苄氧基(4-溴-丁氧基)-氨基甲酸苄酯(51)的制备
向通过将步骤A中获得的苄氧基氨基甲酸苄酯(50)(463mg,1.80 mmol)、4-溴丁酸(300mg,1.80mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP,22 mg,0.18mmol)加入CH2Cl2(12mL)制得的溶液中加入EDC(345mg, 1.80mmol)。搅拌所得溶液2.5天，用水稀释并用CH2Cl2萃取。收集 有机相，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩，以 获得呈液态的标题化合物(250.6mg,产率：34％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ2.21(2H,m),2.97(2H,t),3.48(2H, t),4.91(2H,s),5.28(2H,s),7.29-7.41(10H,m)
步骤C.(R)-4-((2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-苯乙基)氨基)-N-羟基丁酰胺(52)的制备
将N-(苄氧基)-(4-溴-丁酰基)-氨基甲酸苄酯(51)(148.2mg,0.22 mmol)溶于乙腈(2.5mL)，然后依次向其中加入NaI(82.4mg,0.55 mmol)、K2CO3(76.0mg,0.55mmol)和N-(苄氧基)-(4-溴-丁酰基)-氨 基甲酸苄酯(108.4mg,0.27mmol)。在回流条件下搅拌混合物17小 时，冷却至室温，用饱和氯化铵水溶液稀释，并用CH2Cl2萃取。用 MgSO4干燥有机层，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液： 二氯甲烷/甲醇＝98/2～95/5)纯化所得残余物，并在真空下干燥，以 产生呈白色泡沫的标题化合物(57.2mg，产率：34％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.38-1.51(4H,m),1.77(1H,bs), 2.03(2H,m),2.06-2.70(7H,m),2.73(2H,m),3.58(2H,s),4.13(2H,m), 4.22(1H,dd),4.60(2H,s),5.09(2H,m),5.20(1H,m),6.26(1H,d), 6.71(1H,d),7.25-7.42(7H,m),7.53(1H,d)
实施例12:(R)-2-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二 氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'- 哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸(60)的合成
步骤A.(R)-2-氨基-2-(4-羟苯基)乙酸甲酯(53)的制备
将(R)-2-氨基-2-(4-羟苯基)乙酸(7.10g,42.5mmol)溶于甲醇(85 mL)中，在冰浴中搅拌10min，并向其中缓慢加入亚硫酰氯(3.72mL, 51.0mmol)。氮气氛下使所得混合物回流2小时，随后冷却至室温。 在减压下浓缩所得溶液，获得的残余物用于下一步中，而无需进一 步纯化。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ2.18(2H,br),3.53(3H,s),4.36 (1H,s),6.66(2H,d),7.12(2H,d),9.33(1H,s)
步骤B.(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-羟苯基)乙酸甲酯(54)的制备
用二氯甲烷(100mL)和甲醇(3mL)稀释步骤A中获得的(R)-2-氨 基-2-(4-羟苯基)乙酸甲酯(53)，在室温下，依次缓慢加入碳酸氢钠 (5.36g,63.8mmol)、三乙胺(6.60mL,46.7mmol)和二碳酸二叔丁酯 (10.2g,46.7mmol)。在同一温度下搅拌反应溶液2小时，并缓慢加 入饱和氯化铵水溶液(100mL)。用乙酸乙酯对水层萃取两次。收集有 机层，用MgSO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。使浓缩液重结晶 (Hex:EA＝5:1)，在真空下干燥，以获得乳白色固体(11.1g，产率：93％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.42(9H,s),3.70(3H,s), 5.21-5.57(1H,m),6.04(1H,s),6.71(2H,d),7.16(2H,d)
步骤C.(R)-(2-羟基-1-(4-羟基苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(55)的制备
将步骤B获得的(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-羟苯基)乙酸 甲酯(54)(2.10g,7.47mol)加入无水四氢呋喃(100mL)中，在室温下， 向其中小部分地缓慢加入四氢铝锂(850mg,22.4mmol)。在室温下， 搅拌所得混合物1小时，依次向其中加入蒸馏水(0.85mL)、2N NaOH 水溶液(1.70mL)和蒸馏水(2.55mL)。过滤反应溶液，并在减压下浓 缩。通过硅胶层析(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝99/1～90/10)纯化残余物， 并在真空下干燥，以产生呈乳白色固体的标题化合物(1.00g，产率： 53％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.36(9H,s),3.41-3.43(2H,m), 4.41(1H,br),4.69(1H,t),6.67(2H,d),7.06(2H,d),9.21(1H,s)
步骤D.(R)-2-(4-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-羟乙基)苯氧基)乙酸乙酯(56)的制备
将步骤C获得的(R)-(2-羟基-1-(4-羟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 (55)(300mg,1.18mmol)加入丙酮(12mL)，在室温下向其中缓慢加入 碳酸钾(246mg,1.48mmol)和溴乙酸乙酯(0.197mL,1.78mmol)。将所 得溶液加热至80℃，并搅拌15小时。将溶液冷却至室温，并在减压 下浓缩以除去丙酮。用二氯甲烷(15mL)稀释残余物，并向其中加入 饱和氯化铵水溶液(15mL)。用二氯甲烷萃取水层两次。收集有机层， 用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：二 氯甲烷/甲醇＝99/1～9/1)纯化残余物，并在真空下干燥，以产生呈乳 白色固体的标题化合物(380mg，产率：95％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.30(3H,t),1.43(9H,s),1.38(1H, br),3.81(2H,s),4.26(2H,q),4.60(2H,s),4.72(1H,s),5.18(1H,d), 6.87-6.90(2H,m),7.21-7.23(2H,m)
步骤E.(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-(2-乙基乙酰氧基)苯基)乙基甲磺酸酯(57)的制备
将步骤D中获得的(R)-2-(4-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-羟乙基) 苯氧基)乙酸乙酯(56)(360mg,1.06mmol)加入二氯甲烷(5ml)，然后 在室温下依次向其中加入三乙胺(177μl,1.17mmol)和甲磺酰氯(91μl, 1.27mmol)。在室温下搅拌所得溶液30min，并向其中加入饱和碳酸 氢钠水溶液。用二氯甲烷萃取水层两次。收集有机层，用MgSO4干 燥，过滤，并在减压下浓缩。所得残余物用于下一步，而无需进一 步纯化。
步骤F.(R)-2-(4-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸乙酯(58)的制备
将步骤E中获得的(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-(2-乙基乙酰 氧基)苯基)乙基甲磺酸酯(57)(粗制,1.06mmol)、1-(2-氟-6-(三氟甲基) 苄基)-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'- 哌啶]-2,4(3H,7H)-二酮(33)(387mg,0.707mmol)、碳酸钾(293mg, 2.12mmol)和四丁基溴化铵(23mg,0.071mmol)悬浮于丙酮(10ml)， 加热至70℃，并搅拌15小时。将反应溶液冷却至室温，并通过过滤 除去固体。在减压下浓缩滤液，以除去丙酮，并用乙酸乙酯(20mL) 稀释。用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)洗涤所得溶液一次，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：己烷/乙酸乙酯＝ 9/1～1/1)纯化残余物，并在真空下干燥，以产生呈乳白色泡沫的标题 化合物(480mg，产率：78％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.28(3H,t),1.34(9H,s),1.53-1.59 (2H,m),2.34-2.43(4H,m),2.76-2.80(2H,m),3.61(2H,s),3.97(1H,d), 4.24(1H,q),4.57(2H,s),4.64-4.72(2H,m),4.93-4.97(1H,m),5.03 (1H,d),5.22(1H,d),5.60(1H,d),6.28(1H,d),6.71(1H,d),6.83-6.86 (2H,m),7.24-7.28(3H,m),7.43-7.47(1H,m),7.54(1H,d)
步骤G.(R)-2-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸乙酯(59)的制备
在步骤F中获得的(R)-2-(4-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(1-(2-氟 -6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H- 螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸乙 酯(58)(470mg,0.541mmol)加入二氯甲烷(8mL)，并在室温下搅拌3 小时。用0.5N HCl的水溶液中和反应溶液，并用二氯甲烷萃取三次。 用Na2SO4干燥有机层，浓缩，通过MPLC(洗脱液：二氯甲烷/甲醇 ＝99/1～9/1)纯化，并在真空下干燥，以获得呈乳白色泡沫的标题化合 物(360mg，产率：87％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.30(3H,t),1.52-1.60(4H,m), 2.32-2.43(4H,m),2.76-2.79(2H,m),3.60(2H,s),4.01(1H,dd),4.13 (1H,dd),4.25-4.31(3H,m),4.60(2H,s),4.65-4.71(2H,m),5.10-5.16 (2H,m),6.29(1H,d),6.71-6.72(1H,m),6.84-6.87(2H,m),7.27-7.31 (3H,m),7.45-7.48(1H,m),7.56(1H,d)
步骤H.(R)-2-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸(60)的制备
在步骤G中获得的2-(4-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯氧基)乙酸(R)-乙酯(59)(100 mg,0.130mmol)连同1N NaOH水溶液(0.39mL,0.39mmol)加入乙醇 (0.39mL)，随后在室温下搅拌2小时。使用1N HCl水溶液(0.3mL) 中和反应溶液，并在减压下浓缩，以从其中除去乙醇。用二氯甲烷 对水层萃取三次。收集有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下 浓缩。使残余物重结晶，并在真空下干燥，以获得呈乳白色固体的 标题化合物(70mg,产率：73％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.42-1.52(2H,m),2.02-2.07(1H,m), 2.11-2.17(1H,m),2.24-2.29(2H,m),2.68-2.70(2H,m),3.36(2H,br), 3.57-3.63(2H,m),3.92(2H,d),4.13(1H,t),4.30(2H,s),4.87-4.92(2H, m),4.95-5.01(2H,m),6.54(1H,d),6.71(2H,d),7.12(2H,d),7.15-7.16 (1H,m),7.54-7.60(2H,m),7.62-7.64(1H,m)
MS(ESI)m/z741.2(MH+)
实施例12-1至12-3
除了使用包含下表7中所示的相应的R5基团的各化合物代替实 施例12的步骤F中的(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-(2-乙基乙酰氧 基)苯基)乙基甲磺酸酯以外，按照与上面的实施例12所述的相同方 法制备实施例12-1至12-3的化合物。
[表7]
实施例13:3-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丙酸(61)的合成
步骤A.2-氨基-2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯(53)的制备
将2-氨基-2-(3-硝基苯基)乙酸(1.50g,7.65mmol)加入甲醇(8 mL)，并在冰浴中搅拌10min，随后在同一温度下，向其中缓慢加入 亚硫酰氯(0.91mL,12.5mmol)。在氮气氛下使所得溶液回流2小时， 并冷却至室温。在减压下浓缩所得溶液，获得的残余物用于下一步 中，而无需进一步纯化。
步骤B.2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯(54)的制备
用二氯甲烷(20mL)稀释步骤A中获得的2-氨基-2-(3-硝基苯基) 乙酸甲酯(53)(粗制,7.65mmol)，然后在室温下向其中依次缓慢加入 碳酸氢钠(964mg,11.5mmol)、三乙胺(2.13mL,15.3mmol)和二碳酸 二叔丁酯(3.34mL,15.3mmol)。在同一温度下搅拌反应溶液2小时， 并向其中加入饱和氯化铵水溶液(25mL)。用乙酸乙酯对水层萃取两 次。收集有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅 胶层析(洗脱液：己烷/乙酸乙酯＝90/10～75/25)纯化残余物，并在真 空下干燥，以产生呈乳白色固体的标题化合物(830mg，产率：35％)。
步骤C.(2-羟基-1-(3-硝基苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(55)的制备
将步骤B获得的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-硝基苯基)乙酸甲 酯(54)(830mg,2.67mmol)加入无水四氢呋喃(100mL)中，在冰浴中 搅拌10min，并在室温下，向其中小部分地缓慢加入硼氢化锂(LiBH4, 850mg,22.4mmol)。在同一温度下搅拌反应溶液2小时，在冰浴中 冷却，并加入饱和氯化铵溶液。用二氯甲烷对水层萃取三次。收集 有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗 脱液：二氯甲烷/甲醇＝99/1～95/5)纯化所得残余物，并在真空下干 燥，以产生呈暗黄色泡沫的标题化合物(470mg，产率：62％)。
步骤D.2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-硝基苯基)乙基甲磺酸酯(56)的制备
将上面的步骤C获得的(2-羟基-1-(3-硝基苯基)乙基)氨基甲酸叔 丁酯(55)(460mg,1.63mmol)加入二氯甲烷(5ml)，然后依次向其中加 入三乙胺(271μl,2.00mmol)和甲磺酰氯(139μl,1.79mmol)。在同一 温度下搅拌所得溶液30min，并向其中加入饱和碳酸氢钠溶液。用 二氯甲烷萃取水层两次。收集有机层，用MgSO4干燥，过滤，并在 减压下浓缩。所得残余物用于下一步，而无需进一步纯化。
步骤E.(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-硝基苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(57)的制备
将步骤D中获得的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(3-硝基苯基)乙基 甲磺酸酯(56)(粗制,1.63mmol)、1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-2,4(3H,7H)-二酮(33)(595mg,1.08mmol)、碳酸钾(450mg,3.26 mmol)和四丁基溴化铵(35mg,0.11mmol)悬浮于丙酮(25ml)，加热至 70℃，并搅拌15小时。将溶液冷却至室温，并通过过滤除去所得固 体。在减压下浓缩滤液，以除去丙酮，并用乙酸乙酯(25mL)稀释。 用饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤所得溶液一次，用MgSO4干燥，并 在减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱液：己烷/乙酸乙酯＝9/1～1/1)纯 化残余物，并在真空下干燥，以获得呈乳白色泡沫的标题化合物(680 mg，产率：78％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.38(9H,s),1.53-1.63(2H,m), 2.36-2.40(4H,m),2.78-2.81(2H,m),3.63(2H,s),4.04-4.07(1H,m), 4.29-4.34(1H,m),4.66-4.74(2H,m),5.03-5.27(2H,m),5.99(1G,d), 6.30(1H,d),6.72-6.73(1H,m),6.69-6.76(3H,m),7.26-7.31(1H,m), 7.48-7.51(2H,m),7.57(1H,d),7.72-7.74(1H,m),8.11-8.12(1H,m), 8.20-8.21(1H,m)
步骤F.(1-(3-氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(58)的制备
将步骤E获得的(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代 -1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-硝基苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(57)(660 mg,0.813mmol)溶于甲醇(8ml)中，并加入Pd/C(70mg,10％w/w)。 将氢气充入混合物，并搅拌15小时。使用硅藻土垫过滤所得溶液。 在减压下浓缩滤液，并在真空下干燥，以获得呈乳白色泡沫的标题 化合物(430mg,产率：68％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.36(9H,s),1.55-1.63(2H,m), 2.36-2.46(4H,m),2.78-2.82(2H,m),3.62(2H,s),3.66(2H,br), 3.98-4.01(1H,m),4.23-4.25(1H,m),4.65-4.74(2H,m),4.90-5.55(4H, m),6.30(1H,d),6.56-6.58(1H,m),6.69-6.76(3H,m),7.11(1H,t), 7.26-7.29(2H,m),7.45-7.49(1H,m),7.55-7.57(1H,m)
步骤G.4-((3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丁酸乙酯(59)的制备
将步骤F中获得的(1-(3-氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(58)(100mg, 0.128mmol)连同4-溴丁酸乙酯(20μL,0.141mmol)和二异丙基乙胺 (45μL,0.256mmol)加入乙腈(3.0mL)，并将混合物加热至60℃，随 后在同一温度下搅拌48小时。向其中加入饱和氯化铵溶液，用二氯 甲烷萃取水层三次。收集有机层，用MgSO4干燥，浓缩，通过MPLC(洗 脱液：己烷/乙酸乙酯＝1/1～1/99)纯化，并在真空下干燥，以获得呈乳 白色泡沫的标题化合物(33mg，产率：29％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.30(3H,t),1.52-1.60(4H,m), 2.32-2.43(4H,m),2.76-2.79(2H,m),3.60(2H,s),4.01(1H,dd),4.13 (1H,dd),4.25-4.31(3H,m),4.60(2H,s),4.65-4.71(2H,m),5.10-5.16 (2H,m),6.29(1H,d),6.71-6.72(1H,m),6.84-6.87(2H,m),7.27-7.31 (3H,m),7.45-7.48(1H,m),7.56(1H,d)
步骤H.4-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丁酸乙酯(60)的制备
步骤G中获得的4-((3-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(1-(2-氟-6-(三 氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋 喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丁酸乙酯 (59)(30mg,0.038mmol)连同三氟乙酸(100μL)加入二氯甲烷(1 mL)，随后在室温下搅拌2小时。用饱和碳酸氢钠溶液中和反应溶液， 并用二氯甲烷萃取三次。收集有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，通过 MPLC(洗脱液：二氯甲烷/甲醇＝99/1～9/1)纯化，并在真空下干燥， 以获得呈乳白色泡沫的标题化合物(22mg，产率：73％)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.24(3H,t),1.57-1.59(2H,m), 1.86-1.94(3H,m),2.37-2.41(5H,m),2.80(2H,s),3.15(2H,t), 4.26-4.30(2H,m),4.65-4.71(2H,m),5.07-5.20(2H,m),6.34(1H,s), 4.48-4.49(1H,m),6.67-6.72(3H,m),7.11(1H,t),7.27-7.29(1H,m), 7.42-7.46(1H,m),7.53-7.54(1H,d)
步骤I.4-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丁酸(61)的制备
在步骤H中获得的4-((3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)氨基)丁酸乙酯(60)(20mg, 0.025mmol)连同1N NaOH水溶液(75μL，0.075mmol)加入乙醇(1.0 mL)，随后在室温下搅拌2小时。通过加入1N HCl水溶液中和所得 溶液，并在减压下浓缩，以除去乙醇。用二氯甲烷对水层萃取三次。 收集有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，通过MPLC(洗脱液：二氯甲烷 /甲醇＝80/20～70/30)纯化，并在真空下干燥，以获得呈乳白色泡沫的 标题化合物(10mg，产率：52％)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.43-1.50(2H,m),1.67-1.72(2H, m),1.87-2.27(6H,m),2.65-2.68(2H,m),2.91-2.94(2H,m),3.57(2H, s),3.68-3.90(3H,m),4.86(2H,s),4.98(2H,s),6.33-6.37(2H,m), 6.44-6.45(1H,m),6.51(1H,d),6.91(1H,t),7.12-7.13(1H,m), 7.49-7.61(3H,m)
MS(ESI)m/z768.2(MH+)
实施例13-1至13-2
除了使用用于引入下表8所示的相应的R5基团的2-溴乙酸乙酯 和3-溴丙酸乙酯分别代替实施例13的步骤G中的4-溴丁酸乙酯以外， 按照与实施例13所述的相同方法制备实施例13-1至13-2的化合物。
[表8]
实施例13-3至13-8
除了分别使用化合物57和58，以及包含下表9中所示的相应部 分的各化合物以外，按照与实施例13的步骤H所述的通过脱保护反 应的相同方法制备实施例13-3至13-4的化合物。
并且，除了使用2-氨基-2-(2-硝基苯基)乙酸和2-氨基-2-(4-硝基苯 基)乙酸代替2-氨基-2-(3-硝基苯基)乙酸作为实施例13的起始材料， 按照用于制备实施例13的化合物57-58所述的相同方法制备实施例 13-5至13-8的化合物，随后进行如实施例13的步骤H所述的相同脱 保护反应。
[表9]
实施例14:(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三 氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲氧基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 (63)的合成
步骤A.(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲氧基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(62)的制备
将实施例13中获得的(1-(3-氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(58)(158mg, 0.202mmol)加入二氯甲烷(3mL)，于冰浴中搅拌10min，在同一温 度下加入CDI(66mg,0.404mmol)和三乙胺(56μL,0.404mmol)。将所 得溶液加热至室温，并搅拌48小时。在冰浴中再将反应溶液搅拌10 min，加入MeONH2-HCl(169mg,2.02mmol)和三乙胺(280μL,2.02 mmol)，将混合物加热至室温，并搅拌4小时。用饱和碳酸氢钠溶液 中和反应溶液，并用二氯甲烷萃取两次。收集有机层，用Na2SO4干 燥，浓缩，通过MPLC(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝75/15～10/90)纯化， 并在真空下干燥，以获得呈乳白色泡沫的标题化合物(122mg，产率： 71％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.67(1H,d),7.59–7.52(2H,m), 7.47(1H,dd),7.33–7.25(2H,m),7.20(1H,s),7.11–7.09(2H,t),6.72 (1H,dd),6.29(1H,d),5.72–4.94(3H,m),4.76–4.64(2H,m),4.33– 4.25(1H,m),3.80(3H,s),3.62(2H,s),2.80(2H,d),2.40(4H,d), 1.58(2H,t),1.37–1.24(9H,m).
步骤B.(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲氧基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(63)的制备
除了使用(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟 甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲氧基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 (62)(122mg,0.142mmol)之外，重复实施例13的步骤H的步骤，以 获得呈乳白色泡沫的标题化合物(87mg,产率：81％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)7.61–7.54(3H,m),7.49–7.42(1H, m),7.31–7.26(m,3H),7.14–7.10(2H,m),6.72(1H,dd),6.28(1H,d), 5.13(2H,s),4.68(2H,s),4.34(1H,dd),4.20–4.12(1H,m),4.04(1H, dd),3.80(3H,s),3.60(2H,s),3.49(1H,s),2.77(2H,d),2.48–2.26(4H, m),1.74–1.41(3H,m).
实施例15:1-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)-3-甲基脲(65)的合成
步骤A.(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲基脲)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(64)的制备
在0℃下，向通过将(1-(3-氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(58)(33mg, 0.0512mmol)和DIPEA(18μL,0.102mmol)加入CH2Cl2(1mL)制得的 溶液中加入CDI(17mg,0.102mol)。在室温下搅拌1小时，冷却至 0℃，并向其中加入溶于THF(0.1ml,0.204mmol)的2M N-甲胺和 DIPEA(36μL,0.204mmol)。在室温下搅拌混合物2小时，向其中加 入溶于THF(0.2ml,0.408mmol)的2M N-甲胺，随后搅拌1小时。用 CH2Cl2稀释反应溶液，并用饱NaHCO3溶液洗涤，然后用盐水洗涤。 用Na2SO4干燥有机层，过滤，在减压下浓缩，并通过MPLC(洗脱液： 二氯甲烷/甲醇＝98/2～97/3)纯化，并在真空下干燥，以获得白色固 体(21.5mg，产率：50％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.55(d,1H),7.50-7.42(m,2H), 7.30-7.17(m,3H),7.10-7.06(m,1H),6.97(d,1H),6.77(bs,1H),6.72(dd, 1H),6.28(d,1H),5.78(d,1H),5.24-5.03(dd,2H),4.94(m,1H),4.69(dd, 2H),4.27(t,1H),4.19(m,1H),4.00(dd,1H),3.61(s,2H),2.77(m,5H), 2.42-2.28(m,4H),1.54(m,2H),1.36-1.23(m,9H)
步骤B.1-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)-3-甲基脲(65)的制备
将上面步骤B中获得的(2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)-1-(3-(3-甲基脲基)苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯 (64)(21.5mg,0.0291mmol)连同三氟乙酸(0.07mL)加入二氯甲烷(0.7 mL)，并在室温下搅拌3小时。用饱和NaHCO3(水性)溶液中和反应 溶液，并用二氯甲烷萃取。浓缩所得溶液，并用MPLC(10％甲醇/二 氯甲烷)纯化，以获得白色无定形泡沫(10mg,产率：47％)。
MS(ESI)m/z739.40(MH+)
实施例16:N-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧 代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌 啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)乙酰胺(67)的合成
步骤A.(1-(3-乙酰氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(66)的制备
在0℃下，向通过将(1-(3-氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(58)(30mg, 0.0383mmol)和DIPEA(36μL,0.204mmol)加入CH2Cl2(1mL)制得的 溶液中加入乙酰氯(5.4μL,0.0768mol)。所得混合物在室温下搅拌1 小时。用CH2Cl2稀释反应溶液，并用饱和NaHCO3和盐水洗涤。用 Na2SO4干燥有机层，过滤，并在减压下浓缩。通过MPLC(洗脱液： 二氯甲烷/甲醇＝98/2)纯化所得残余物，并在真空下干燥，以获得白 色固体(28mg，产率：88％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.64(m,1H),7.55(dd,1H), 7.50-7.42(m,1H),7.26(m,1H),7.30-7.24(m,2H),7.20(m,1H),7.08(d, 1H),6.72(dd,1H),6.29(d,1H),5.71(d,1H),5.27-5.02(dd,2H),4.95(m, 1H),4.75-4.62(dd,2H),4.26(t,1H),3.98(dd,1H),3.62(s,2H),2.80(m, 2H),2.45-2.22(m,4H),2.14(s,3H),1.61-1.52(t,2H),1.36-1.22(m,9H)
步骤B.N-(3-(1-氨基-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d]嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)苯基)乙酰胺(67)的制备
将步骤A获得的(1-(3-乙酰氨基苯基)-2-(1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄 基)-2,4-二氧代-1'-((5-(三氟甲基)呋喃-2-基)甲基)-1H-螺[呋喃[3,4-d] 嘧啶-5,4'-哌啶]-3(2H,4H,7H)-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(66)(28mg, 0.0339mmol)连同三氟乙酸(0.07mL)加入二氯甲烷(0.7mL)，随后在 室温下搅拌3小时。用饱和NaHCO3(水性)溶液中和反应溶液，并用 二氯甲烷萃取。浓缩所得溶液，并用MPLC(10％甲醇/二氯甲烷)纯化， 以获得白色无定形泡沫(18mg,产率：73％)。
MS(ESI)m/z724.20(MH+)
测试实施例1：GnRH受体-膜结合试验
通过采用从稳定转染GnRH受体的CHO-K1细胞(ATCC CCL-61) 分离的膜底物(PerkinElmer)对本发明的化合物进行GnRH受体膜结 合试验。
通过将0.2nM[125I]标记的D-Trp6-LHRH肽和密度为1μg/250 μL/孔的GnRH受体膜底物，连同范围在0.1nM至100nM的各浓度 的本发明的化合物，加入结合由25mM羟乙基哌嗪乙硫磺酸(Hepes) (pH 7.4)、10mM MgCl2、1mM CaCl2和0.5％BSA(pH 7.4)组成的缓 冲液，来起始反应。在27℃下孵育反应混合物1小时，并进行真空 吸引，用于与过滤器(Fitermat A,PerkinElmer)结合。用50mM tris-HCl 缓冲液洗涤过滤器数次，以结束反应。使用MicroBeta2 TriLux (PerkinElmer)测定结合至过滤器的放射性活度。根据所测定的反射性 活度分析本发明化合物的结合抑制率(％)，用Prism(GraphPad,Inc.) 使用非线性最小二乘回归法计算IC50值。GnRH结合抑制(％)的结果 示于下表10中。
测试实施例2：用于评价对GnRH受体的拮抗作用的基因表达 筛选
为了评价对GnRH受体的拮抗作用，采用了用pcDNA3.1/GnRH 受体和pGL4/NFAT启动子转化的双转化细胞系HEK293(ATCC CRL-1573)。
为进行GnRH受体试验，将HEK293(ATCC CRL-1573)细胞系 以3×104个细胞/孔的密度稀释于补充有10％FBS、1％青霉素-链霉 素的DMEM培养基中，并接种(plated into)于涂覆聚赖氨酸的具有白 色透明底的96孔板，随后在37℃下培养细胞24小时。然后用无血 清DMEM培养基(1％青霉素-链霉素)替换该培养基，使用前将细胞 另外培养16小时。
将1μM至0.01nM的量的测试化合物分别加入孔中，再培养1 小时。然后将作为配体的醋酸亮丙瑞林(Sigma)以1nM或20nM的 量加入孔中，并进行另外6小时的培养。将荧光素酶检测系统 (Promega,Cat.No.E1500)的试剂加入孔中，使用光度计(PerkinElmer, VICTOR3TM,1420多标记分析仪)测定发光度。将J.Med.Chem.2008, 51,7478中所述的式10b的化合物用作比较化合物。
各样品以6-剂量水平分析，并且根据以下方程，基于测定的发 光度计算本发明化合物的NFAT受体抑制率(％)。
[方程]
抑制(％)＝{1-(化合物处理组-阴性对照)/(阳性对照-阴性对照)} ×100
其中，阳性对照为GnRH处理组；阴性对照为非处理组。
NFAT报告子活性抑制(％)的结果示于下表10中。
[表10]
如表10所示的结果可见，本发明的化合物抑制GnRH与GnRH 受体的结合，并且还抑制NFAT受体的活性。此外，在螺-哌啶部分 包含苄基作为取代基的本发明的化合物(实施例1-15和1-19)相比包 含烷基的本发明的化合物(实施例1-2和1-3)而言，显示出增强的抑制 作用。
机译： 促性腺激素释放激素受体拮抗剂，其制备方法和包含该拮抗剂的药物组合物
机译： 促性腺激素释放激素受体拮抗剂，其制备方法和包含该拮抗剂的药物组合物
机译： 促性腺激素释放激素受体拮抗剂，其制备方法和包含该拮抗剂的药物组合物
