一种筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法

摘要

本发明建立了一种基于生物素标记的筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法。本发明将目的基因的3’UTR序列克隆到EGFP荧光载体下游，生物信息学分析预测EGFPmRNA的二级结构和设计互补的反义链DNA，并进行3’端生物素标记，利用生物素和链霉亲和素之间的强亲和力将与目的基因mRNA结合在一起的所有miRNA进行分离和纯化。该方法可以分离纯化出调控特定基因mRNA的所有miRNAs，并且可以应用到所有目的基因的mRNA，避免重复设计和合成生物素标记的反义链寡核苷酸链。