新型托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体的制备、固定化及其拆分DL-苯丙氨酸和DL-色氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种新型托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体的制备、固定化及其拆分外消旋苯丙氨酸和色氨酸的方法。通式(I)代表发明的离子液体结构，其主要特征在于：可与无机盐溶液形成双水相并富集于上层。其拆分DL-苯丙氨酸的方法：向离子液体中加入定量的醋酸铜和DL-苯丙氨酸，再加入定量盐溶液形成双水相。离心分层后，D型富集于离子液体液相，L型富集于固体相。式(II)代表发明中硅胶固定化离子液体的结构，其拆分DL-色氨酸和苯丙氨酸的方法：吸附金属Cu

说明书

技术领域

本发明涉及基于托品醇和氨基酸的手性离子液体的制备和固定化，其应用包括双水相拆分DL-苯丙氨酸和柱层析分离DL-色氨酸及DL-苯丙氨酸，属于萃取分离和色谱分离的领域。

背景技术

手性氨基酸等生物活性物质对人体及动物生命活动起着举足轻重的作用。制备对映体纯手性化合物在生命科学、药物化学、精细化学、材料化学等领域具有重要意义。目前，常用的手性氨基酸对映体拆分的方法包括酶拆分法、膜分离法和化学拆分法。其中酶法拆分价格昂贵，稳定性差；膜分离法因为膜的制备困难，极大的限制了其大规模生产应用；化学拆分法通常存在工艺路线复杂，收率低，拆分剂回收困难等问题。因此，研究开发新的氨基酸等活性物质的拆分方法具有重要意义。

离子液体是一类由有机阳离子与有机或无机阴离子组成的低温熔盐（熔点通常低于150℃），具有非挥发性、高热稳定性、选择性溶解能力和结构可设计等特点，相比有机溶剂绿色环保。设计、合成功能性手性离子液体并应用于某些氨基酸的拆分目前鲜有报道，但已有研究结果初步显示出离子液体优良的分离性能。

2005年，Fukumoto等（Fukumoto, K.; Yoshizawa, M.; Ohno,h. Room temperature ionic liquid from 20 natural amino acids. J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 2398–239）以天然氨基酸合成了系列咪唑类氨基酸阴离子手性离子液体。此后，关于氨基酸阴离子手性离子液体作为不对称合成的催化剂或溶剂获得了大量关注。

然而，关于该类离子液体用于萃取拆分的研究一直未引起重视，直到2010年，Tang等（Fei Tang, Qianli Zhang, Dandan Ren, Zhou Nie, Qian Liu, Shouzhuo Yao. Functional amino acid ionic liquids as solvent and selector in chiral extraction. Journal of Chromatography A, 1217 （2010） 4669–4674）使用咪唑类脯氨酸阴离子离子液体—乙酸乙酯体系萃取拆分DL-氨基酸，对映体过量值最大可达50%，但需要使用不溶于水的有机溶剂，不利于环保。之后Tang等（唐飞,杨飞,李迎曦，等，基于离子液体的盐-盐双水相体系：一种绿色的外消旋氨基酸手性分离体系[A]. 中国化学会第28届学术年会第1分会场摘要集[C]）采用咪唑类L-脯氨酸阴离子离子液体和Cu2+螯合物在磷酸氢二钾溶液中形成的双水相体系萃取拆分不溶于水的DL-酪氨酸，对映体过量值达到92%。但使用盐的浓度为45%，含盐量太高导致后处理困难，且适用分离对象仅限于不溶于水的酪氨酸。

亲水性离子液体因其粘度大，一般回收较困难，氨基酸阴离子类型离子液体的回收亦是如此，将离子液体固定化可以解决这一问题。2007年，Chen等（Wen Chen, Yuanyuan Zhang, Liangbo Zhu, et al. A Concept of Supported Amino Acid Ionic Liquids and Their Application in Metal Scavenging andheterogeneous Catalysis. J. AM. CHEM. SOC. 2007 , 129 , 13879 -13886.）将咪唑类脯氨酸阴离子离子液体键合在聚苯乙烯载体上，并应用于金属吸附，其金属络合物还可用于催化非均相Ullmann反应及氢气还原反应。如果能将此类固定化离子液体应用于对映体的拆分，解决了离子液体回收困难的问题，使其应用符合可持续发展。

本发明者设计、合成了一类托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体，与目前已报道的氨基酸阴离子型离子液体（Changzeng Wu, Jianji Wang,huiyong Wang, et al. Effect of anionic structure on the phase ormation andhydrophobicity of amino acid ionic   liquids aqueous two-phase systems. Journal of Chromatography A,1218 （2011） 8587– 8593）相比较，具有更好的成相能力，即只需要更少的无机盐就能形成两相。将该类离子液体应用于水溶性的DL-苯丙氨酸的萃取拆分研究，在萃取过程中，离子液体相富含D-苯丙氨酸，随着被拆分的DL-苯丙氨酸量的增多，离子液体相下方出现不溶固体相，该固体富含L-苯丙氨酸。此外，本发明还使用硅胶作为氨基酸阴离子离子液体的载体合成了固定化的离子液体，并将其作为柱层析填料拆分DL-色氨酸和DL-苯丙氨酸，并获得了理想的拆分效果。

发明内容

本发明的目的是提供一类成相能力更强的氨基酸阴离子手性离子液体及其制备方法，研究其无需任何有机溶剂的条件下，完成其对水溶性DL-苯丙氨酸的萃取拆分。

本发明的另一目的是提供该类氨基酸阴离子手性离子液体的硅胶固载化的方法，并完成该固定化离子液体对DL-色氨酸和-DL苯丙氨酸的拆分研究。

本发明通过以下方案解决这一技术问题：一种结构新颖的托品醇类氨基酸阴离子手性离子液体（式I）和其硅胶固定化结构（式II），含托品醇母核结构部分为其阳离子，L-脯氨酸根离子为其阴离子。

托品醇类氨基酸阴离子手性离子液体的制备方法是：将托品醇与1~1.3倍摩尔量CH3（CH2）nBr（n=1~7）溶于适当溶剂（乙酸乙酯、丙酮、乙腈、和甲苯中的一种）中，加热（40~110℃）至固体不再析出，过滤得到白色固体产物。将该固体产物的水溶液通过一定量的强碱性聚苯乙烯离子交换色谱柱，所得溶液经浓缩后，加入1.0~1.2倍于托品醇摩尔量的L-脯氨酸，常温搅拌12~24h。减压蒸馏除去水后，加入适量的乙腈剧烈搅拌，有白色不溶物析出，过滤除去不溶物后，减压蒸馏除去乙腈溶剂得到淡黄色粘稠液体。合成路线：

托品醇类氨基酸阴离子离子液体的固定化方法，将托品醇、1~1.2倍摩尔量的γ-氯丙基-3-甲氧基硅烷和碘盐（碘化钾或碘化钠）溶于乙醇中，回流反应12~24h，减压蒸馏除去溶剂得到白色固体，少量乙酸乙酯洗涤。将所得白色产物用甲苯溶解，再加入1~3倍质量的活化硅胶一并置于带有分水器的单口烧瓶中，升温回流反应，反应中产生的副产物甲醇转移至分水器中，待分水器中甲醇体积不再变化时，过滤，用水洗涤所得产物，并在常温下与1.0~1.2倍于托品醇摩尔量的L-脯氨酸钠水溶液搅拌40~48h（或先与氢氧化钠水溶液混合搅拌40~48h得到碱性固定化离子液体，用水洗涤后，再加入1.0~1.2倍于托品醇摩尔量的L-脯氨酸），过滤，用水洗涤，干燥后即得到目标固定化离子液体。合成路线：

一种托品醇类氨基酸阴离子手性离子液体双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸的方法，其特征在于：向离子液体中依次加入0.22~0.81倍摩尔量的醋酸铜、一定摩尔量的DL-苯丙氨酸、49.13~180.14倍摩尔量的水和2.54~7.62倍摩尔量的盐，形成双水相，离心。当加入0.09~0.35倍摩尔量的DL-苯丙氨酸时，离子液体相富含D-苯丙氨酸；当加入0.35~0.62倍摩尔量的DL-苯丙氨酸时，离子液体下方出现不溶固体相，离子液体液相富含D-苯丙氨酸，固相富含L-苯丙氨酸。上述方法中的盐为磷酸氢二钾、磷酸钾、碳酸钾中的一种。

一种硅胶固载托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体拆分DL-色氨酸和DL苯丙氨酸的方法，其特征在于：将该固定化离子液体与硫酸铜水溶液充分混合振荡后，过滤，用水洗涤，置于真空干燥箱烘干，然后取1.2g，湿法装柱于10×200mm玻璃柱，湿法上样氨基酸水溶液（5mg/mL），流动相速度为0.1mL/min。

上述方法中，为保证固定化离子液体吸附铜离子量达到饱和，硫酸铜与固定化离子液体的质量比大于0.05，且混合振荡时间大于1h。拆分DL-色氨酸所用的流动相为水，拆分DL-苯丙氨酸所用的流动相为乙醇。

本发明与背景技术相比，具有以下优点：

1.     本发明所涉及的托品醇类氨基酸阴离子型离子液体，阳离子中的托品醇为天然莨菪碱水解产物之一，相比于离子液体合成中广泛被使用的咪唑，更为绿色环保，符合可持续发展。

2.     本发明所涉及的托品醇类氨基酸阴离子型离子液体，其与盐溶液的成相能力较咪唑类等离子液体更强。拆分过程中所需盐溶液的浓度37.5% ，相比于同类氨基酸阴离子的咪唑类离子液体，成相所需的盐量减少了近8%（唐飞,杨飞,李迎曦，等，基于离子液体的盐-盐双水相体系：一种绿色的外消旋氨基酸手性分离体系[A]. 中国化学会第28届学术年会第1分会场摘要集[C]）。所使用的盐类也不仅局限于单一的磷酸氢二钾，可为磷酸钾、磷酸氢二钾和碳酸钾中的任何一种。

3.     本发明所涉及的托品醇类氨基酸阴离子型离子液体，可用于萃取拆分水溶性的DL-苯丙氨酸，且无需使用任何有机溶剂。解决了此前氨基酸阴离子型离子液体不能拆分水溶性外消旋手性物的问题，拓展了氨基酸阴离子型离子液体的使用范围，避免有机溶剂的使用，具有更好的绿色环保特性。

4.     本发明所涉及的托品醇类氨基酸阴离子型离子液体，相比咪唑类离子液体—乙酸乙酯体系萃取拆分DL-苯丙氨酸的对映体过量值50.6%，托品醇类氨基酸阴离子型离子液体双水相体系提高了近20%。

5.     本发明所涉及的硅胶固载托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体，相比于有机聚合物载体，首次使用廉价易得的硅胶作为氨基酸阴离子型手性离子液体的载体。 

6.     本发明所涉及的硅胶固载托品醇类氨基酸阴离子型手性离子液体，成功拆分了DL-色氨酸和DL-苯丙氨酸，使用的流动相为绿色安全的水和廉价易回收的有机溶剂乙醇。

具体实施方式

下面给出实例以对本发明作进一步说明。有必要在此指出的是以下实例不能理解为对本发明保护范围的限制，如果该领域的技术熟练人员根据上述发明内容对本发明作出一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。

实施例1（离子液体的合成）

在100mL的单口圆底烧瓶中加入0.05mol托品醇，并用50mL乙酸乙酯溶解，再加入0.06mol溴乙烷，升温至40℃，回流搅拌反应12h，过滤得白色溴鎓盐，产率92.60%。称取0.01mol溴鎓盐，用50mL去离子水溶解，移至装好50g强碱性聚苯乙烯阴离子交换树脂的层析柱内。停留15min后缓慢放出柱内液体，收集pH大于等于8的部分。然后缓慢滴入盛有0.011mol L-脯氨酸的单口烧瓶中，常温搅拌12h。60℃下减压除去水，加入100mL乙腈，强烈搅拌2h，过滤除去不溶物后，40℃下减压除去乙腈，得淡黄色粘稠状透明液体，干燥，产率92.03%。

实施例2（离子液体的合成）

在100mL的单口圆底烧瓶中加入0.05mol托品醇，并用50mL乙腈溶解，再加入0.055mol溴代正丁烷，升温至80℃，回流搅拌反应16h，过滤得白色溴鎓盐，产率88.32%。称取0.01mol溴鎓盐，用50mL去离子水溶解，移至装好50g强碱性聚苯乙烯阴离子交换树脂的层析柱内。停留15min后缓慢放出柱内液体，收集pH大于等于8的部分。然后缓慢滴入盛有0.012mol L-脯氨酸的单口烧瓶中，常温搅拌16h。60℃下减压除去水，加入100mL乙腈，强烈搅拌2h，过滤除去不溶物后，40℃下减压除去乙腈，得淡黄色粘稠状透明液体，干燥，产率93.48%。

实施例3（离子液体的合成）

在100mL的单口圆底烧瓶中加入0.05mol托品醇，并用50mL丙酮溶解，再加入0.05mol溴代正己烷，升温至60℃，回流搅拌反应20h，过滤得白色溴鎓盐，产率79.38%。称取0.01mol溴鎓盐，用50mL去离子水溶解，移至装好50g强碱性聚苯乙烯阴离子交换树脂的层析柱内。停留15min后缓慢放出柱内液体，收集pH大于等于8的部分。然后缓慢滴入盛有0.012mol L-脯氨酸的单口烧瓶中，常温搅拌20h。60℃下减压除去水，加入100mL乙腈，强烈搅拌2h，过滤除去不溶物后，40℃下减压除去乙腈，得淡黄色粘稠状透明液体，干燥，产率88.57%。

实施例4（离子液体的合成）

在100mL的单口圆底烧瓶中加入0.05mol托品醇，并用50mL甲苯溶解，再加入0.06mol溴代正辛烷，升温至110℃，回流搅拌反应24h，过滤得白色溴鎓盐，产率72.75%。称取0.01mol溴鎓盐，用50mL去离子水溶解，移至装好50g强碱性聚苯乙烯阴离子交换树脂的层析柱内。停留15min后缓慢放出柱内液体，收集pH大于等于8的部分。然后缓慢滴入盛有0.01mol L-脯氨酸的单口烧瓶中，常温搅拌24h。60℃下减压除去水，加入100mL乙腈，强烈搅拌2h，过滤除去不溶物后，40℃下减压除去乙腈，得淡黄色粘稠状透明液体，干燥，产率80.16%。

实施例5（固定化离子液体的制备）

将0.02mol托品醇溶于乙醇中，依次加入0.024mol γ-氯丙基-3-甲氧基硅烷和0.024mol碘化钾，升温至80℃回流反应24h，减压蒸馏得到白色固体，少许乙酸乙酯洗涤，称重6.29g，产率62.31%。取5.0g 硅胶，加入30mL质量分数10%的盐酸，超声1h后，过滤，用水洗涤至中性，120℃下烘干。称取5.0g上一步的白色固体产物与活化硅胶至于带有分水器的100mL单口烧瓶中，加入40mL甲苯，升温回流反应至分水器中液体体积不再变化。过滤，用水洗涤得硅胶键合产物。 称取0.8gNaOH，溶于50mL水中，加入上述硅胶键合产物，常温下搅拌48h，过滤，洗涤至中性。至于100mL 单口烧瓶中，再加入0.02mol L-脯氨酸和40mL 水，常温下搅拌48h，过滤，用水和甲醇洗涤数次，60℃下真空干燥。

实施例6（固定化离子液体的制备）

将0.02mol托品醇溶于乙醇中，依次加入0.022mol γ-氯丙基-3-甲氧基硅烷和0.022mol碘化钠，升温至80℃回流反应18h，减压蒸馏得到白色固体，乙酸乙酯洗涤，称重5.83g，产率57.72%。取15.0g 硅胶，加入100mL质量分数10%的盐酸，超声1h后，过滤，用水洗涤至中性，120℃下烘干。将5.0g上述白色固体产物与活化硅胶至于带有分水器的100mL单口烧瓶中，加入40mL甲苯，升温回流反应至分水器中液体体积不再变化。过滤，用水洗涤得硅胶键合产物。 称取0.8g KOH，溶于50mL水中，加入上述硅胶键合产物，常温下搅拌1h，过滤，洗涤至中性。至于100mL 单口烧瓶中，再加入0.022mol L-脯氨酸和40mL 水，常温下搅拌44h，过滤，用水和甲醇洗涤数次，60℃下真空干燥。

实施例7（固定化离子液体的制备）

将0.02mol托品醇溶于乙醇中，依次加入0.02mol γ-氯丙基-3-甲氧基硅烷和0.02mol碘化钾，升温至80℃回流反应12h，减压蒸馏得到白色固体，少许乙酸乙酯洗涤，称重5.2g，产率51.48%。取1g 硅胶，加入20mL质量分数10%的盐酸，超声1h后，过滤，用水洗涤至中性，120℃下烘干。将5g上述白色固体产物与活化硅胶至于带有分水器的100mL单口烧瓶中，加入40mL甲苯，升温回流反应至分水器中液体体积不再变化。过滤，用水洗涤得硅胶键合产物。称取0.8g KOH，溶于50mL水中，加入上述硅胶键合产物，常温下搅拌1h，过滤，洗涤至中性。至于100mL 单口烧瓶中，再加入0.024mol L-脯氨酸和40mL 水，常温下搅拌40h，过滤，用水和甲醇洗涤数次，60℃下真空干燥。 

实施例8（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=Et）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入30mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层为一相，其中D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为3.72%。

实施例9（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Bu）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入30mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层为一相，其中D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为10.25%。

实施例10（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Hexyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入30mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层为一相，其中D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为15.34%。

实施例11（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入30mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层为一相，其中D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为24.87%。

实施例12（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入20mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层为一相，其中D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为12.64%。

实施例13（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为38.30%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为64.84%。

实施例14（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入50mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为34.43%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为61.80%。

实施例15（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入70mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为21.50%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为59.69%。

实施例16（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入30mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为5.10%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为30.0%。

实施例17（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入90mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为25.50%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为71.80%。

实施例18（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入110mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为16.61%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为60.53%。

实施例19（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入0.6g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为8.1%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为68.41%。

实施例20（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1.4g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为23.28%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为62.64%。

实施例21（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1.8g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层只有固相， L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为60.82%。

实施例22（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入2.2g水摇匀，最后加入0.6g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层只有固相， L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为62.24%。

实施例23（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.3g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为23.08%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为61.31%。

实施例24（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.9g 磷酸氢二钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为22.22%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为60.95%。

实施例25（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.73g 磷酸钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为15.30%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为74.41%。

实施例26（双水相萃取拆分DL-苯丙氨酸）

取6.8×10^-4mol离子液体（R=n-Octyl）至于5mL 离心管中，加入70mg醋酸铜，振荡5min，然后加入40mg DL-苯丙氨酸，振荡5min，再加入1g水摇匀，最后加入0.48g 碳酸钾，振荡5min。高速离心机10000r/min 离心，离子液体层分为液固两相，其中液相：D-苯丙氨酸>L苯丙氨酸，e. e.值为15.11%；固相：L-苯丙氨酸>D苯丙氨酸，e. e.值为75.82%。

实施例27（固定化离子液体拆分DL-色氨酸）

将2g该固定化离子液体与20mL质量分数5%得硫酸铜水溶液混合振荡2h后，过滤，用水洗涤，置于真空干燥箱烘干，然后取1.2g，加入5mL水，湿法装柱于10*200mm玻璃柱，湿法上样1mL DL-色氨酸水溶液（5mg/mL 悬浊液），水为流动相，空气泵加压，流动相速度为0.1mL/min。每隔5min取样HPLC分析。D-色氨酸优于L-色氨酸先出峰，5min后L-色氨酸开始被洗脱下来，20min取样对映体过量值降为60%，45min取样对映体过量值降为0。

 实施例28（固定化离子液体拆分DL-苯丙氨酸）

将2g该固定化离子液体与20mL质量分数5%得硫酸铜水溶液混合振荡2h后，过滤，用水洗涤，置于真空干燥箱烘干，然后取1.2g，加入5mL水，湿法装柱于10*200mm玻璃柱，湿法上样1mL DL-苯丙氨酸水溶液（5mg/mL），乙醇为流动相，空气泵加压，流动相速度约为0.08mL/min。每隔5min取样HPLC分析。D-苯丙氨酸优于L-苯丙氨酸先出峰，45min之前被洗脱出来的均是D-苯丙氨酸，之后L-苯丙氨酸才开始被洗脱出来，55min取样对映体过量值降为40%，70min取样对映体过量值降为0。