具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法

摘要

本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法，具体步骤如下：将10ml无水乙醇，1.0mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-吡咯-3-甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圆底烧瓶中，在75℃下回流搅拌3h，生成淡黄色固体，即为配体HL。取1mmo配体HL和1mmol的CuCl2·2H2O加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置一周，出现棕色块状晶体，即制得配合物吡咯缩氨基硫脲铜。将上述CuCl2·2H2O替换为NiCl2.2H2O，制备得配合物吡咯缩氨基硫脲镍。本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法，该化合物的具抗癌活性作用，适合在抗癌领域中推广应用，具有一定的医学价值，为抗癌药物的开发、推广提供了依据。

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法，属于 配合物合成技术领域。

背景技术

缩氨基硫脲具有抗病毒、抗菌、抗真菌等多种药理活性，尤其是其显著的抗肿瘤活 性，受到化学和医药工作者的关注。而多数缩氨基硫脲金属配合物的抗肿瘤活性强于配 体。基于吡咯环优异的生物活性，结合活性拼接原理，本发明提供一种具有抗肿瘤活性 的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成 方法，以便更好地合成出具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下。

一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物的合成方法，具体步骤如下：

(1)配体HL的合成：将10ml无水乙醇，1.0mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-吡咯-3- 甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圆底烧瓶中，在75℃下回流搅拌3h， 生成淡黄色固体，即为配体HL。进行抽滤，乙醇重结晶。上述配体产率为68％，熔点 113-116℃；核磁共振检测结果为：¹H NMR(CDCl_3，400MHz)，δ(ppm)：7.770(1H，s， CH=N)；7.363-7.622(5H，m，Ar-H)；4.268-4.321(2H，q，CH₂)；2.454(3H，s，CH3)；2.337(3H， s，CH₃)；1.345-1.381(3H，t，CH₃)。

(2)配合物吡咯缩氨基硫脲铜的合成：取1mmol配体HL和1mmol的CuCl₂·2H₂O 加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置 一周，出现棕色块状晶体，即制得配合物吡咯缩氨基硫脲铜，其为产率82％(基于HL 计算)。

(3)配合物吡咯缩氨基硫脲镍的合成：取1mmol配体HL和1mmol的NiCl₂·2H₂O 加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置 一周，出现棕色块状晶体，即制得配合物吡咯缩氨基硫脲镍。

针对上述所制备的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物进行抗肿瘤活性测试，其具体方法 为：

(1)细胞培养：将A549人肺癌细胞株和Hep G2人肝癌细胞株分别培养在含10％ 胎牛血清液的RPMI-1640介质中，内含100U/ml青霉素(盘尼西林)和100μg/ml链霉素， 置于饱和湿度、37℃、5％CO₂培养箱中传代培养。

(2)化合物的细胞毒性采用噻唑蓝法确定。在96孔塑料培养板中进行，使每孔中 细胞数为5×10³个，次日，在每个孔中加入200μL溶解在培养液中的梯度浓度的待测 物溶液(含体积百分数1％的DMSO助溶)。48小时后，加入溶解于牛血清中的浓度为 0.5mg/ml的20μLMTT(噻唑蓝)。继续培养4小时后，在各培养孔中加入200μL二甲基 亚砜用于溶解被还原的MTT的蓝紫色晶体，然后用酶标仪测定570nm的吸光度(OD值)， 空白组不加待测物，按公式：细胞生长抑制率=[(空白OD值-给药组的OD值)/空白OD 值]×100％计算细胞生长抑制率，求出各组浓度的平均抑制率，作图求出抑制率为50 ％时的浓度(即半数抑制浓度IC₅₀)。其结果为：配体HL和所制备的吡咯缩氨基硫脲铜、 镍配合物对A549和Hep G2抑制作用明显，IC₅₀范围在15.47-38.69μmol/ml，是潜在的 抗肿瘤药物。

该发明的有益效果在于：本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜、 镍配合物的合成方法，并进行了药理学分析，证明该化合物的具抗癌活性作用，适合在 抗癌领域中推广应用，且找到了一种新的药物合成方法，具有一定的医学价值，为抗癌 药物的开发、推广提供了一定依据。

附图说明

图1是本发明实施例1中所制备的配合物吡咯缩氨基硫脲铜的晶体结构示意图(图 中，未编号的配体由对称操作产生，对称操作码：-1-x，1-y，1-z)。

图2是本发明实施例2中所制备的配合物吡咯缩氨基硫脲镍的晶体结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明的具体实施方式进行描述，以便更好的理解本发 明。

实施例1

具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲铜配合物的合成方法，具体步骤如下：

(1)配体HL的合成：将10ml无水乙醇，1.0mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-吡咯-3- 甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圆底烧瓶中，在75℃下回流搅拌3h， 生成淡黄色固体，即为配体HL。进行抽滤，乙醇重结晶。上述配体产率为68％，熔点 113-116℃；核磁共振检测结果为：¹H NMR(CDCl_3，400MHz)，δ(ppm)：7.770(1H，s， CH=N)；7.363-7.622(5H，m，Ar-H)；4.268-4.321(2H，q，CH₂)；2.454(3H，s，CH₃)；2.337(3H， s，CH₃)；1.345-1.381(3H，t，CH₃)。

(2)配合物吡咯缩氨基硫脲铜的合成：取1mmol配体HL和1mmol的CuCl₂·2H₂O 加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置 一周，出现棕色块状晶体，即制得配合物吡咯缩氨基硫脲铜，其为产率82％(基于HL 计算)，其晶体结构示意图参见图1。

实施例2

具有抗肿瘤活性的吡咯缩氨基硫脲镍配合物的合成方法，具体步骤如下：

(1)配体HL的合成：将10ml无水乙醇，1.0mmol2，4-二甲基-5-甲酰基-吡咯-3- 甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圆底烧瓶中，在75℃下回流搅拌3h， 生成淡黄色固体，即为配体HL。进行抽滤，乙醇重结晶。上述配体产率为68％，熔点 113-116℃；核磁共振检测结果为：¹H NMR(CDCl_3，400MHz)，δ(ppm)：7.770(1H，s， CH=N)；7.363-7.622(5H，m，Ar-H)；4.268-4.321(2H，q，CH₂)；2.454(3H，s，CH₃)；2.337(3H， s，CH₃)；1.345-1.381(3H，t，CH₃)。

(2)配合物吡咯缩氨基硫脲镍的合成：取1mmol配体HL和1mmol的NiCl₂·2H₂O 加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置 一周，出现棕色块状晶体，即制得配合物吡咯缩氨基硫脲镍，其晶体结构示意图参见图 2。

实施例3

针对实施例1、实施例2所制备的吡咯缩氨基硫脲铜、镍配合物进行抗肿瘤活性测 试，其具体方法为：

(1)细胞培养：将A549人肺癌细胞株和Hep G2人肝癌细胞株分别培养在含10％ 胎牛血清液的RPMI-1640介质中，内含100U/ml青霉素(盘尼西林)和100μg/ml链霉素， 置于饱和湿度、37℃、5％CO₂培养箱中传代培养。

(2)化合物的细胞毒性采用噻唑蓝法确定。在96孔塑料培养板中进行，使每孔中 细胞数为5×10³个，次日，在每个孔中加入200μL溶解在培养液中的梯度浓度的待测 物溶液(含体积百分数1％的DMSO助溶)。48小时后，加入溶解于牛血清中的浓度为 0.5mg/ml的20μLMTT(噻唑蓝)。继续培养4小时后，在各培养孔中加入200μL二甲基 亚砜用于溶解被还原的MTT的蓝紫色晶体，然后用酶标仪测定570nm的吸光度(OD值)， 空白组不加待测物，按公式：细胞生长抑制率=[(空白OD值-给药组的OD值)/空白OD 值]×100％计算细胞生长抑制率，求出各组浓度的平均抑制率，作图求出抑制率为50 ％时的浓度(即半数抑制浓度IC₅₀)。其结果为：配体HL和所制备的吡咯缩氨基硫脲铜、 镍配合物对A549和Hep G2抑制作用明显，IC₅₀范围在15.47-38.69μmol/ml，是潜在的 抗肿瘤药物。

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来 说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视 为本发明的保护范围。