原人参二醇衍生物、原人参三醇衍生物在制药中的应用

摘要

本发明提供了一种原人参二醇衍生物及原人参三醇衍生物在制备治疗或预防神经退行性疾病药物中的应用。经药理实验结果显示，上述衍生物在PC12细胞，N2a细胞的H

说明书

技术领域

本发明涉及一种人参二醇类化合物，具体地说，涉及一种20(S)- 原人参二醇衍生物及20(S)-原人参三醇衍生物在制药中的新用途。属 于医药领域。

背景技术

神经退行性疾病（Degenerative diseases of the central nervous system，ND）是一组以原发性神经元变性为基础的慢性进行性神经 系统疾病。该类疾病主要包括阿尔茨海默氏病（Alzheimer’s disease， AD）（俗称老年性痴呆）、帕金森病（Parkinson’s disease，PD）、 Huntington舞蹈病（Huntington disease）、不同类型脊髓小脑共济失调 （spinal cerebellar ataxias）、肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis）及脊髓肌萎缩症（spinal muscular atrophy）等。

研究发现，ND是由多种不同原因导致的，包括神经元或神经胶 质细胞不能提供充分的营养、轴突传递功能受损、谷氨酸受体活性过 高、活性氧水平过高、代谢通路受损、线粒体能量产生减少、折叠错 误的蛋白质形成增加或降解不充分、炎症过程、病毒感染、细胞核或 线粒体DNA突变以及RNA或蛋白质的加工过程不正确所致的特殊蛋 白质或脂质部分功能的损失或增加等因素。虽然诱发这些疾病的病因 和病变部位不尽相同，但它们都有一个共同的特征，即都存在神经细 胞的严重损伤并导致加速死亡的特点。

目前对神经退行性疾病的机理及治疗已进行了大量的研究，但至 今尚无有效成熟的方法和药物来防治这种疾病，开发具有神经元保护 功能的药物对神经退行性疾病的治疗具有重大的意义。

20(S)-原人参二醇是二醇组人参皂苷的重要苷元之一， ZL200610027507.1公开了20(S)-原人参二醇在抗抑郁方面的用途。 ZL200510016774.4公开了达玛-20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇的合成 方法及其在制备治疗冠心病、心肌缺血、缺血性休克、心律不齐和再 灌损伤的药物中的用途，但是未公开其在制备治疗或预防神经退行性 疾病的药物中的用途。

发明内容

本发明的目的是提供一种20(S)-原人参二醇衍生物以及20(S)-原 人参三醇衍生物在制备治疗或预防神经退行性疾病药物中的应用。

本发明人对20(S)-原人参二醇衍生物以及20(S)-原人参三醇衍生 物进行了深入的研究，结果发现，达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三 醇（dammara-20S-24(R)-epoxy-3β,12β,25-triol）、达玛-20S-24(S)-环氧 -3β,12β,25-三醇（dammara-20S-24(S)-epoxy-3β,12β,25-triol）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇 （dammara-20S-24(S)-epoxy-3β,6β,12β,25-tetrol）、以及达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇 （dammara-20S-24(R)-epoxy-3β,6β,12β,25-tetrol）在制备作为治疗或预 防神经退行性疾病药物方面极其有用。

本发明提供用于治疗或预防神经退行性疾病的达玛-20S-24(R)- 环氧-3β,12β,25-三醇、达玛-20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇、或达玛-20S-24(R)-环氧 -3β,6β,12β,25-四醇。

本发明提供达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25- 四醇、或达玛-20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇在治疗或预防神经退 行性疾病中的新用途。

本发明提供用于治疗或预防神经退行性疾病的包含达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛-20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三 醇、达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇、或达玛-20S-24(R)-环氧 -3β,6β,12β,25-四醇的药物组合物。

本发明提供包含达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇、达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25- 四醇、或达玛-20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇的药物组合物在治疗 或预防神经退行性疾病中的用途。

其中，

式(I)所示原人参二醇衍生物的名称为达玛-20S-24(R)-环氧 -3β,12β,25-三醇、式(II)所示原人参二醇衍生物的名称为达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇。

式(Ⅲ)所示原人参三醇衍生物的名称为达玛-20S-24(S)-环氧 -3β,6β,12β,25-四醇、式(IV)所示原人参三醇衍生物的名称为达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇。

所述神经退行性疾病包括帕金森病、老年性痴呆、脑血管性痴呆 疾病。

本发明所述原人参二醇衍生物及原人参三醇衍生物与药学上可 接受的载体制成不同的制剂，比如口服制剂或胃肠外制剂。

所述口服制剂为胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、乳剂、混悬剂。

所述胃肠外制剂为注射剂。

经药理实验，显示达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇，达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇在PC12细胞，N2a细胞的H₂O₂损伤 模型上相比于20（S）-原人参二醇，更强的抗氧化保护效果。

对反复夹闭大鼠双侧颈总动脉配合硝普钠降压法复制拟血管性 痴呆模型和双侧海马注射Aβ_1-42复制老年性痴呆动物模型可明显改 善大鼠空间探索和定向能力。对治疗神经退行性疾病如帕金森病、老 年性痴呆、脑血管性痴呆疾病具有潜在的药用价值，具有广阔的开发 前景。

附图说明

图1为本发明20（S）原人参二醇，达玛-20S-24(R)-环氧-3β，12β， 25三醇对H₂O₂损伤PC12细胞的逆转率；

图2为本发明20（S）原人参二醇，达玛-20S-24(R)-环氧-3β，12β， 25三醇对H₂O₂损伤N2a细胞的逆转率；

图3为本发明20（S）原人参三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β， 12β，25四醇对H₂O₂损伤PC12细胞的逆转率；

图4为本发明20（S）原人参三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β， 12β，25四醇对H₂O₂损伤N2a细胞的逆转率。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

本发明涉及的20(S)-原人参二醇衍生物的结构式如下：

式(I)所示原人参二醇衍生物的名称为达玛-20S-24(R)-环氧 -3β,12β,25-三醇、式(II)所示原人参二醇衍生物的名称为达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇。

其可以通过ZL200510016774.4中公开的方法或基于该方法的方 法来制造。具体采取的合成方法为：

制备方法参考中国专利200510016774.7，准确称量10g20(S)-原 人参二醇（上海中药创新研究中心），溶于250ml无水二氯甲烷中， 搅拌下加入间氯过氧苯甲酸8g。于室温下搅拌24小时，反应完毕后， 反应液用5%的碳酸氢钠溶液洗涤3遍，有机相用无水硫酸钠干燥后 浓缩至干，以乙酸乙酯和石油醚1:10-1:1（体积比）为洗脱剂进行硅 胶柱层析，得化合物达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇4g（纯度 95%），达玛-20S-24(S)-环氧-3β,12β,25-三醇4g（纯度95%）。

通过ESI-MS和NMR测定后，式(I)化合物测定的物化数据如下：

ESI-MS m/z:477.47(M+H)^-1H>3):δ0.77(s, 3H),0.85(s,3H),0.90(s,3H),0.97(s,3H),0.98(s,3H),1.10(s,3H), 1.27(s,3H),1.28(s,3H),1.30-2.23(m,22H),3.40(d,1H),3.52(m,1H), 3.84(d,1H).¹³C>3):δ33.5(C1),25.4(C2),76.0(C3), 37.5(C4),49.5(C5),18.2(C6),34.6(C7),39.9(C8),50.0(C9),37.2(C10), 31.6(C11),70.5(C12),48.7(C13),52.2(C14),32.1(C15),28.5(C16), 48.8(C17),15.4(C18),16.1(C19),87.3(C20),28.8(C21),31.5(C22), 25.0(C23),87.1(C24),70.1(C25),24.1(C26),27.8(C27),28.3(C28), 22.0(C29),17.2(C30).

式(II)化合物测定的物化数据如下：

ESI-MS m/z:477.47(M+H)^-1H>3):δ0.77(s, 3H),0.85(s,3H),0.90(s,3H),0.97(s,3H),0.98(s,3H),1.10(s,3H), 1.27(s,3H),1.28(s,3H),1.30-2.23(m,22H),3.16-3.21(m,1H), 3.48-3.56(m,1H),3.84-3.89(d,1H),4.08-4.16(m,1H).¹³C>3):δ33.5(C1),25.4(C2),76.0(C3),37.5(C4),49.5(C5), 77.4(C6),34.6(C7),39.9(C8),50.0(C9),37.2(C10),31.6(C11),70.5(C12), 48.7(C13),52.2(C14),32.1(C15),28.5(C16),48.8(C17),15.4(C18), 16.1(C19),87.3(C20),28.8(C21),31.5(C22),25.0(C23),85.3(C24), 70.5(C25),26.0(C26),27.8(C27),28.3(C28),22.0(C29),18.2(C30).

本发明涉及的20(S)-原人参三醇衍生物的结构式如下：

式(Ⅲ)所示原人参三醇衍生物的名称为达玛-20S-24(S)-环氧 -3β,6β,12β,25-四醇、式(IV)所示原人参三醇衍生物的名称为达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇。

制备方法参考ZL200410018038.8，准确称量10g20(S)-原人参三 醇（上海中药创新研究中心），溶于250ml无水二氯甲烷中，搅拌下 加入间氯过氧苯甲酸8g。于室温下搅拌24小时，反应完毕后，反应 液用5%的碳酸氢钠溶液洗涤3遍，有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩 至干，以乙酸乙酯和石油醚1:10-1:1（体积比）为洗脱剂进行硅胶柱 层析，得化合物达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇4g（纯度 95%），达玛-20S-24(R)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇4g（纯度95%）。

通过ESI-MS和NMR测定后，式(Ⅲ)化合物测定的物化数据如 下：

ESI-MS m/z:493.40(M+H)^-1H>3):δ0.77(s, 3H),0.85(s,3H),0.90(s,3H),0.97(s,3H),0.98(s,3H),1.10(s,3H), 1.27(s,3H),1.28(s,3H),1.30-2.23(m,22H),2.68-2.79(m,1H), 3.50-3.59(m,1H),3.84-3.89(m,1H),3.97-4.06(m,1H).¹³C>3):δ33.5(C1),25.4(C2),76.0(C3),37.5(C4),49.5(C5), 77.4(C6),34.6(C7),39.9(C8),50.0(C9),37.2(C10),31.6(C11),70.5(C12), 48.7(C13),52.2(C14),32.1(C15),28.5(C16),48.8(C17),15.4(C18), 16.1(C19),87.3(C20),28.8(C21),31.5(C22),25.0(C23),87.1(C24), 70.1(C25),24.1(C26),27.8(C27),28.3(C28),22.0(C29),17.2(C30).

式(Ⅳ)化合物测定的物化数据如下：

ESI-MS m/z:493.40(M+H)^-1H>3):δ0.77(s, 3H),0.85(s,3H),0.90(s,3H),0.97(s,3H),0.98(s,3H),1.10(s,3H), 1.27(s,3H),1.28(s,3H),1.30-2.23(m,22H),3.16-3.21(m,1H), 3.48-3.56(m,1H),3.84-3.89(d,1H),4.08-4.16(m,1H).¹³C>3):δ33.5(C1),25.4(C2),76.0(C3),37.5(C4),49.5(C5), 77.4(C6),34.6(C7),39.9(C8),50.0(C9),37.2(C10),31.6(C11),70.5(C12), 48.7(C13),52.2(C14),32.1(C15),28.5(C16),48.8(C17),15.4(C18), 16.1(C19),87.3(C20),28.8(C21),31.5(C22),25.0(C23),85.3(C24), 70.5(C25),26.0(C26),27.8(C27),28.3(C28),22.0(C29),18.2(C30).

上述具有式(I)、(Ⅱ)结构的原人参二醇衍生物及具有式(Ⅲ)、(Ⅳ) 结构的原人参三醇衍生物，将其用来制备治疗神经退行性疾病药物 时，可以以其本身进行给药；或者作为与适当的药理学上可接受的赋 形剂、稀释剂等混合而制得的制剂(例如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散 剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、混悬剂、注射剂等)进行给药。本发明 的预防或治疗剂可以口服给药或胃肠外给药。

上述制剂，可以采用公知的方法，使用赋形剂、粘合剂、崩解剂、 润滑剂、稳定剂、矫味矫嗅剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、制剂用溶 剂等添加物。

赋形剂的例子包括：乳糖、白糖、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇等 糖类；玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍 生物；结晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲基纤 维素、羧甲基纤维素钙、内部交联羧甲基纤维素钠等纤维素衍生物； 阿拉伯树胶；葡聚糖；短醒酶多糖；轻质硅酸酐、合成硅酸铝、铝正 硅酸镁等硅酸盐类；磷酸钙等磷酸盐类；碳酸钙等碳酸盐类；或者硫 酸钙等硫酸盐类。

粘合剂的例子包括：作为上述的赋形剂所示的化合物；明胶；聚 乙烯吡咯烷酮；或者聚乙二醇。

崩解剂的例子包括：作为上述的赋形剂所示的化合物；或者，交 联羧甲纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等经化学修饰 的淀粉或纤维素衍生物。

润滑剂的例子包括：滑石；硬脂酸；硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂 酸金属盐；胶态硅石；硅酸镁铝；蜂蜡、鲸蜡等蜡类；硼酸；乙二醇； 富马酸、己二酸等羧酸类；苯甲酸钠等羧酸钠盐；硫酸钠等硫酸盐； 亮氨酸；十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁等十二烷基硫酸盐；硅酸 酐、硅酸水合物等硅酸类；或者，上述赋形剂中的淀粉衍生物。

稳定剂的例子包括：羟苯甲酯、羟苯丙酯等对羟基苯甲酸酯类； 氯丁醇、苄醇、苯乙醇等醇类；苯扎氯铵；苯酚、甲酚等酚类；硫柳 汞；乙酸酐；或者山梨酸。

矫味矫嗅剂例如可以是：常用的甜味料、酸味料或香料。

乳化剂例如可以是：吐温或司盘等。

悬浮剂例如可以是：吐温80或羧甲基纤维素钠。

制剂用溶剂例如可以是：水、乙醇或甘油。

实施例1

10g达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇，加20g乳糖，混匀，以 70%乙醇为粘合剂，制粒，装入胶囊，即得胶囊剂，每粒含20(S)-原 人参二醇衍生物20mg。

实施例2

10g达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇，加20g乳糖，混匀， 以70%乙醇为粘合剂，制粒，装入胶囊，即得胶囊剂，每粒含20(S)- 原人参二醇衍生物20mg。

实施例3

10g达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇，加20g乳糖，混匀，以 70%乙醇为粘合剂，制粒，干燥，加入5g硬脂酸镁，压片，即得片剂， 每片含20(S)-原人参二醇衍生物50mg。

实施例4

10g达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇，加20g乳糖，混匀， 以70%乙醇为粘合剂，制粒，干燥，加入5g硬脂酸镁，压片，即得片 剂，每片含20(S)-原人参二醇衍生物50mg。

实施例5

10g吐温，溶于水中，加入10g达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三 醇，研磨制成初乳，再加水至1000ml，即得口服液。

实施例6

10g吐温，溶于水中，加入10g达玛-20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25- 四醇，研磨制成初乳，再加水至1000ml，即得口服液。

实施例7

10g吐温，溶于注射用水，加入10g达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25- 三醇，研磨制成初乳，再加注射用水至5000ml，经过过滤，灭菌，灌 封后即得注射液。

以下通过本领域典型实验模型来评价本发明的药理药效学效果， 但本发明的药理药效学效果不限于用下述方法来评价。

实验例1衍生物对H₂O₂损伤的神经细胞的保护

在过氧化氢损伤模型中，用MTT法检测达玛-20S-24(R)-环氧-3β， 12β，25三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β，12β，25四醇对H₂O₂损伤的PC12细胞，N2a细胞的保护作用。

1、实验材料：

①仪器:洁净工作台(上海淀山湖净化设备厂)，恒温CO₂培养箱 （美国Forma），酶联免疫检测仪(美国BioTek)，倒置生物显微镜（重 庆光学仪器），台式恒温摇床(太仓市科教器材厂)

②试剂:RPMI1640培养基（GIBCO Lot NO.460302），胰蛋白 酶（GIBCO Lot NO.F20020705），胎牛血清（GIBCO Lot NO.721229），MTT(Sino-A-Biotel Lot NO.0793)，DMSO(国药集 团)，DMSO(Sigma Lot NO.038K2391)，过氧化氢（国药集团Lot NO.20080610）

③细胞株：细胞株由中科院细胞所提供。

2、实验样品：

20（S）原人参二醇，20（S）原人参三醇，达玛-20S-24(R)-环氧 -3β，12β，25三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β，12β，25四醇。各 化合物经DMSO溶解后中，稀释4℃保存。

3、实验方法

取处于指数生长期状态良好的细胞一瓶，制成细胞悬液，并将细 胞密度稀释至1×10⁵个/ml，取细胞悬液接种于96孔板上，置恒温CO₂培养箱中培养24小时，加入不同浓度的受试药物，使最终浓度为 0.1-100μM每个浓度6个复孔，培养6小时，继续加入过氧化氢，每 孔10μl，终浓度为,75μM-100μM,培养箱中培养16小时,按照MTT 法用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值，并计算 细胞的保护效果（逆转率）。

保护效果%（逆转率）=（模型不给药组细胞抑制率－模型药敏组 细胞抑制率）/模型药敏组细胞抑制率×100%

4、实验结果

根据MTT法测试结果，计算20（S）原人参二醇，20（S）原人 参三醇，达玛-20S-24(R)-环氧-3β，12β，25三醇，达玛-20S-24(S)-环 氧-3β，6β，12β，25四醇对过氧化氢损伤高分化PC12细胞，N2a的 保护作用，结果如图1-4所示。

5、结论

在过氧化氢高分化PC12细胞，N2a细胞的损伤模型中，用MTT 法检测20（S）原人参二醇，20（S）原人参三醇，达玛-20S-24(R)- 环氧-3β，12β，25三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β，12β，25四醇 对神经细胞的保护作用，结果发现：达玛-20S-24(R)-环氧-3β，12β， 25三醇，达玛-20S-24(S)-环氧-3β，6β，12β，25四醇比20（S）原人 参二醇，20（S）原人参三醇具有更强神经细胞保护效果，可以作为 神经退行性疾病药物的有效成分。

实验例2

衍生物对反复夹闭大鼠双侧颈总动脉配合硝普钠降压法复制拟 血管性痴呆模型的作用。

1、实验动物

品系：清洁级昆明小鼠，性别：雄性，体重：18-22g，来源： 上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证号： SCXK(沪)2007-0005。

2、药品

受试样品：达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇，达玛-20S-24(S)- 环氧-3β,6β,12β,25-四醇。按上述方法制备。阳性对照药(安理申)，配 置：将药粉溶于0.3％CMCNa的溶剂中，制成混悬液，超声助溶。

3、实验方法

健康雄性SD大鼠，体重（300±10）g，适应性喂养一周后造模， 并随机分为9组，假手术组（Sham）、模型组（Model）、安理申组（DNP）、 达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇低剂量治疗组（S01-L）、达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇中剂量治疗组（S01-M）、达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇高剂量治疗组（S01-H）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇低剂量治疗组（S02-L）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇中剂量治疗组（S02-M）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇高剂量治疗组（S02-H），每组15 只。各组分别于造模后3天开始给药，每天早上八点给药一次，假手 术组和模型组给予生理盐水注射，化合物治疗组按1mg/kg、5mg/kg、 25mg/kg进行腹腔注射，安理申给予1.667mg/kg灌胃给药。造模后 28天进行行为学检测。

4、实验结果

注：与模型组（model）比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

从模型实验结果看，逃避潜伏期实验结果显示，模型组逃避潜伏 期时间明显高于假手术组（P＜0.05），提示造模成功。阳性对照药安 理申组（DNP）的治疗结果与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）。 各用药组中，化合物S01和S02各剂量与模型组比较，其逃避潜伏期 时间均显著下降，游泳总路程均明显缩短，目标象限停留时间显著提 高，穿台次数显著增加，中高剂量组效果优于阳性对照药安理申组， 具有显著药理活性。

实验例3

衍生物对双侧海马注射Aβ_1-42复制老年性痴呆动物模型的作用

1、实验动物

品系：清洁级昆明小鼠，性别：雄性，体重：18-22g，来源： 上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证号： SCXK(沪)2007-0005。

2、药品

受试样品：达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇，达玛-20S-24(S)- 环氧-3β,6β,12β,25-四醇。按上述方法制备。阳性对照药(安理申)，配 置：将药粉溶于0.3％CMCNa的溶剂中，制成混悬液，超声助溶。

3、实验方法

健康雄性SD大鼠，体重（300±10）g，适应性喂养一周后造模， 并随机分为9组，假手术组（Sham）、模型组（Model）、安理申组（DNP）、 达玛-20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇低剂量治疗组（S01-L）、达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇中剂量治疗组（S01-M）、达玛 -20S-24(R)-环氧-3β,12β,25-三醇高剂量治疗组（S01-H）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇低剂量治疗组（S02-L）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇中剂量治疗组（S02-M）、达玛 -20S-24(S)-环氧-3β,6β,12β,25-四醇高剂量治疗组（S02-H），每组15 只。各组分别于造模后3天开始给药，每天早上八点给药一次，假手 术组和模型组给予生理盐水注射，化合物治疗组按1mg/kg、5mg/kg、 25mg/kg进行腹腔注射，安理申给予1.667mg/kg灌胃给药。造模后 28天进行行为学检测。

4、实验结果

注：与模型组（model）比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

从模型实验结果看，逃避潜伏期实验结果显示，模型组逃避潜伏 期时间明显高于假手术组（P＜0.05），提示造模成功。阳性对照药安 理申组（DNP）的治疗结果与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）。 各用药组中，化合物S01和S02各剂量与模型组比较，其逃避潜伏期 时间均显著下降，游泳总路程均明显缩短，目标象限停留时间显著提 高，穿台次数显著增加，中高剂量组效果优于阳性对照药安理申组， 具有显著药理活性。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详 尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本 领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础 上所做的这些修改或.改进，均属于本发明要求保护的范围。