一种丹天颈舒口服制剂的检测方法

摘要

本发明公开了一种丹天颈舒口服制剂的检测方法，所述丹天颈舒口服制剂由丹参、天麻、钩藤、石决明、杜仲、川芎、栀子及辅料制备而成，所述检测方法包括对口服制剂中天麻素的含量进行测定，对口服制剂中的丹参、钩藤、杜仲、川芎及栀子分别进行薄层色谱鉴别。所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，检测结果稳定，可有效控制丹天颈舒口服制剂的质量。

说明书

技术领域

本发明涉及一种丹天颈舒口服制剂的检测方法，属于药品技术的领域；

背景技术

椎动脉型颈椎病是因为椎动脉受压迫或刺激而引起其供血不足所产生的一 系列症状。颈椎是活动量最大的脊柱节段，易产生劳损，并随着年龄的增长及损 伤的积累而发生颈椎退行性变。颈椎病患者中约70%有椎动脉受累，50岁以上 头晕，椎动脉缺血性疾病者，50%以上与颈椎病引起的椎基底动脉受累有关。在 临床上易有"颈椎眩晕"，"椎动脉压迫综合症"等诊断，又称为"颈性偏椎动脉缺血 性疾病"。椎动脉型颈椎病是由各种机械性与动力性因素致使椎动脉遭受刺激或 压迫，以致血管狭窄、折曲而造成以椎一一基底动脉供血不全为主要症状的症候 群。其发病机制主要有动力性因素及血管因素。随着人类生活节奏的加快，工 作压力的增大，使得患有椎动脉型颈椎病（CSA）的人越来越多，而且发病年龄 呈下降趋势，严重影响了人们的生活质量。丹天颈舒制剂来源于汤剂“消晕饮”， 由天麻、丹参等七味中药组成，是贵阳中医学院全国骨伤名医沈冯君教授35年 的经验方，具有平肝补肾，活血化瘀的功效；临床用于治疗肝肾亏虚、气滞血瘀 而致的椎动脉型颈椎病（眩晕型）效果良好；为了更好的控制该药品的质量，为 此，本发明提供了丹天颈舒制剂的检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种丹天颈舒口服制剂的检测方法； 所述检测方法能够测定丹天颈舒口服制剂中天麻素的含量，还能对口服制剂中的 丹参、钩藤、杜仲、川芎和栀子进行鉴别，本发明所述检测方法便于操作，重复 性好，结果可靠；

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现：

一种丹天颈舒口服制剂，按照重量组分计算，由丹参200-700份、天麻 200-700份、钩藤200-700份、石决明600-1200份、杜仲300-800份、川芎200-700 份、栀子200-700份及辅料制备而成；

具体地说，所述丹天颈舒口服制剂按照重量组份计算，由丹参500份、天麻 500份、钩藤500份、石决明900份、杜仲625份、川芎500份、栀子500份及 辅料制备而成；

其制备方法为：根据配方称取各药物，用水煎煮提取，滤过，滤液浓缩至稠 膏，干燥，粉碎，再加入辅料按照常规工艺制备成口服制剂；

具体地说，其制备方法为：根据配方称取各药物，加入6-12倍量水煎煮1-3 次，每次0.5-3小时，滤过，滤液浓缩至稠膏，干燥，粉碎，再加入辅料按照常 规工艺制备成口服制剂；

所述检测方法包括对口服制剂中天麻素的含量进行测定，对口服制剂中的丹 参、钩藤、杜仲、川芎及栀子分别进行薄层色谱鉴别。

上述检测方法中,所述天麻素的含量测定方法为：照中国药典高效液相色谱 法测定；

色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇： 0.05%磷酸溶液=1-10：99-90为流动相；检测波长为220nm；理论板数按天麻素 峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：精密称取天麻对照品，用流动相溶解，即得；

供试品溶液的制备：称取制剂药物，精密称定，加蒸馏水超声5-20min使溶 解，放冷，滤过，取续滤液即得；

测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定， 即得。

具体地说,所述天麻素的含量测定方法为：照中国药典高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇： 0.05%磷酸溶液=8：92为流动相；流速1.0mL·min^-1，检测波长为220nm；理论 板数按天麻素峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：精密称取在80℃减压干燥1h的天麻对照品适量，加流 动相制成每1mL含30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：称取制剂药物0.2g，精密称定，至50mL容量瓶内，加 蒸馏水适量超声10min使溶解，放冷，定容至刻度，滤过，取续滤液即得；

测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10L，注入高效液相色谱仪， 测定，即得。

上述检测方法中,所述钩藤的薄层鉴别方法为：取药物3g，加甲醇50mL，回 流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，加入浓氨水调PH值至9， 氯仿萃取3次，每次25mL，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为 样品供试液；另取钩藤对照药材2.5g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶 液；照药典附录薄层色谱法试验；吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以 0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上，氨水缸饱和后，以氯仿：乙酸乙酯=5∶ 3为展开剂,展开，取出，晾干；喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

上述检测方法中,所述川芎的薄层鉴别方法为：取药物3g，加甲醇50mL，回 流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，氯仿萃取3次，每次25mL， 合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取川芎对照药 材3g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录薄层色谱法试验； 吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄 层板上，氨水缸饱和后，以氯仿：乙酸乙酯=10∶3为展开剂,展开，取出，晾干； 365nm紫外灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。

上述检测方法中,所述栀子的薄层鉴别方法为：取药物3g，加入丙酮50mL， 60℃水浴回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试品 溶液；另取栀子对照药材2.5g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照 药典附录薄层色谱法试验；吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以 0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶GF₂₅₄薄层板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲醇： 甲酸=2∶3∶4∶2∶2为展开剂，展开，取出，晾干；254nm紫外灯下观察后，喷 以10%硫酸乙醇试液，在105℃下烘至显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点。

上述检测方法中,所述丹参的薄层鉴别方法为：取药物3g，加甲醇50mL， 回流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次 25mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取丹 参对照药材3g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录薄层色 谱法试验；吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂 的硅胶GF₂₅₄薄层板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=2∶3∶4∶1∶2 为展开剂，展开，取出，晾干；254nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1 ％铁氰化钾试液显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点。

上述检测方法中,所述杜仲的薄层鉴别方法为：取药物3g，加甲醇50mL，回 流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次25mL， 合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取杜仲对照药 材3g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录薄层色谱法试验； 吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄 层板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲酸=5∶1∶1∶0.5为展开剂，展开，取出， 晾干；365nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1％铁氰化钾试液显色；供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

发明人进行了大量的实验，以下是本发明所述检测方法的研究

实验例：检测方法研究

1仪器与试药

1.1仪器：日本岛津LC－20A型液相色谱仪，SPD－20A型紫外－可见检测器 （日本岛津），HT－20型柱温箱；JA2003型电子天平（上海良平仪器仪表有限 公司）；Auy220型电子天平（日本岛津）；科导SK8210HP型台式超声波清洗器 （上海科导超声仪器有限公司）；杜仲F-6210真空干燥箱（上海齐欣科学仪器有 限公司）；WBZ-2微波真空干燥箱（贵阳新奇微波工业有限责任公司）；SZ-96自 动纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；LRH-150S恒温恒湿培养箱（广东省医疗 器械厂）；ZB-1C智能崩解仪（天津大学精密仪器厂）；TDL-5A低速自动离心机（湖 南星科科技有限公司）；WD-A稳定性检查仪（天津药典标准仪器厂）；DC-B-1智 能箱式电阻炉（北京独创科技有限公司）。

1.2试药：天麻素（中国药品生物制品检定所，批号：0807-200104）；处方 中各味药材均购自贵阳药材总公司，均符合药典的检测标准；硅胶G、硅胶GF254 （青岛海洋化工），色谱级甲醇（江苏汉邦科技有限公司），色谱级乙睛（江苏汉 邦科技有限公司），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

丹天颈舒胶囊按照下述方法制备：取丹参500g、天麻500g、钩藤500g、石 决明900g、杜仲625g、川芎500g、栀子500g；加入8倍量水煎煮3次，每次 1.5小时，滤过，滤液浓缩至稠膏，微波真空干燥，粉碎，加入淀粉，装胶囊， 制成1000粒，每粒0.45g,即得。

2.鉴别

2.1丹参的薄层鉴别

取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水 30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次25mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL 使溶解，作为样品供试液。另取丹参对照药材3g，按样品供试液制备方法制备 对照药材溶液。同法制备缺丹参的阴性对照溶液。照药典附录ⅥB薄层色谱法试 验。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶 GF₂₅₄薄层板上，以甲苯-氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶1∶2）为展开剂， 展开，取出，晾干。254nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1％铁氰化钾试 液显色。经三批样品实验，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。阴性对照无干扰（薄层色谱图见图1、图2）。

2.2钩藤的薄层鉴别

取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水 30mL使溶解，加入浓氨水调PH值至9，氯仿萃取3次，每次25mL，合并氯仿液， 蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液。另取钩藤对照药材2.5g，按 样品供试液制备方法制备对照药材溶液。同法制备缺钩藤的阴性对照溶液。照药 典附录ⅥB薄层色谱法试验。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以 0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上，氨水缸饱和后，以氯仿-乙酸乙酯（5∶3） 为展开剂,展开，取出，晾干。喷以改良碘化铋钾试液显色。经三批样品试验， 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照 无干扰（薄层色谱图见图3）。

2.3川芎的薄层鉴别

取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水 30mL使溶解，氯仿萃取3次，每次25mL，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇2mL 使溶解，作为样品供试液。另取川芎对照药材3g，按样品供试液制备方法制备 对照药材溶液。同法制备缺川芎的阴性对照溶液。照药典附录ⅥB薄层色谱法试 验。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G 薄层板上，氨水缸饱和后，以氯仿-乙酸乙酯（10∶3）为展开剂,展开，取出， 晾干。365nm紫外灯下观察。经三批样品试验，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点斑点。阴性对照无干扰（薄层色谱图见 图4）。

2.4杜仲的薄层鉴别

取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液水浴挥干，加水 30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次25mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL 使溶解，作为样品供试液。另取杜仲对照药材3g，按样品供试液制备方法制备 对照药材溶液。同法制备缺杜仲的阴性对照溶液。照药典附录ⅥB薄层色谱法试 验。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以甲苯-氯仿-乙酸乙酯-甲酸（5∶1∶1∶0.5）为展开剂，展开，取 出，晾干。365nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1％铁氰化钾试液显色。 经三批样品实验，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。阴性无干扰（薄层色谱图见图5、图6）。

2.5栀子的薄层鉴别

取胶囊内容物3g，加入丙酮50mL，60℃水浴回流1h，滤过，滤液蒸干，残 渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试品溶液。另取栀子对照药材2.5g，按样品 供试液制备方法制备对照药材溶液。同法制备缺栀子的阴性对照溶液。照药典附 录ⅥB薄层色谱法试验。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na 为黏合剂的硅胶GF₂₅₄薄层板上，以甲苯-氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶ 2∶2）为展开剂，展开，取出，晾干。254nm紫外灯下观察后，喷以10%硫酸乙 醇试液，在105℃下烘至显色。经三批样品实验，供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰（薄层色谱图见图7、 图8）。

3.天麻素含量测定的方法学研究

照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI D）测定。

3.1色谱条件

色谱柱为Agilent HC-C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇:0.05 ％磷酸溶液（8∶92），流速1.0mL·min^-1，检测波长220nm，进样量10μL， 柱温为室温。

3.2对照品溶液的制备

取经80℃干燥至恒重的天麻素对照品3.50mg，置25mL容量瓶中，精密称 定，加流动相溶解，稀释至刻度，摇匀，得0.14mg·mL^-1的对照品母液，精密吸 取2mL母液置10mL容量瓶内，稀释至刻度，即得0.028mg·mL^-1的对照品溶液。

3.3提取溶剂的考察

精密称取丹天颈舒胶囊内容物1g，精密称定，分别加入下表中各种溶剂100 mL，精密称定，超声提取30min，放冷，加入相应的溶剂补足重量，除以蒸馏水 作为溶剂外，其余样品液，分别滤过，精密吸取续滤液10mL，蒸干，加适量流 动相溶解，转移至10mL容量瓶内，分别定容至刻度，滤过，续滤液供含量测定。 结果见表1。

表1提取溶剂的考察

结果表明：蒸馏水作为提取溶剂用超声提取至溶解，时间短，方法简单，含 量高。由于峰面积较大，因此采用减小取样量，减少溶剂使用量来达到样品峰面 积与标准品峰面积相似的目的，以减少含量测定的误差。

3.4提取时间的考察

根据5.3的结果，取丹天颈舒胶囊内容物0.2g，精密称定后至50mL容量 瓶中，加入蒸馏水超声不同时间，放冷，定容至刻度，滤过，取续滤液供含量测 定。结果与方法见表2。

表2提取时间的考察

结果表明，样品加水超声10min至30min内天麻素的含量没有显著性变化， 根据观察，样品超声10min时已完全溶解在溶剂中。故选择超声提取时间为 10min。

3.5供试品溶液的制备

称取丹天颈舒胶囊内容物0.2g，精密称定，至50mL容量瓶内，加蒸馏水 适量超声10min使溶解，放冷，定容至刻度，滤过，取续滤液供含量测定。

3.6流动相的考察

根据参考文献，选择乙睛∶0.05％磷酸溶液、甲醇∶0.05％磷酸溶液、甲醇∶ 0.1％冰醋酸、甲醇∶水为流动相，结果表明以甲醇∶0.05％磷酸溶液（8∶92） 时可以取得良好的峰型，天麻素峰与相邻的其它峰能够完全分开。同时考察不同 温度对试验的影响，结果表明20℃-30℃对目标峰的出峰时间和含量没有显著性 的影响。

3.7专属性考察

取丹天颈舒胶囊样品0.2g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备阴性 对照溶液，精密吸取天麻素对照品溶液，阴性供试品溶液各10μL，注入高效 液相色谱仪，结果表明，供试品峰中，天麻素峰能够达到基线分离，峰的相邻两 侧无其他峰干扰，分离度为23.777，阴性供试品在与天麻素峰相应位置处未出 现峰，表明方法的专属性良好。结果见图9-图11。

3.8线性及范围

分别精密吸取对照品母液稀释至浓度：7μg·mL^-1，14μg·mL^-1，21μg·mL^-1， 28μg·mL^-1，35μgm·L^-1，42μg·mL^-1，分别精密吸取上述溶液各10μL注入高效液 相色谱仪中测定峰面积,以对照品的质量为横坐标,峰面积为纵坐标,线性回归, 得回归方程为y=1986.8x+6870.5，R=0.9999。结果表明天麻素在70～420ng范 围内呈良好的线性关系。结果见表3，线性关系见图12。

表3线性范围的考察

3.9精密度试验

精密吸取浓度为7μg·mL^-1，28μg·mL^-1，42μg·mL^-1天麻素对照品溶液10μ L,分别连续进样5次,以峰面积计算RSD值,RSD分别为0.46％，0.91％0.63％, 表明仪器的精密度良好。结果见表4。

表4精密度实验

3.10重复性考察

取丹天颈舒胶囊的内容物0.2g的80%、100%、120%各3份，精密称定，按 供试品溶液的制备方法制备9份3个浓度供试品溶液，滤过，续滤液供含量测定。 计算含量，结果见表5。

表5重复性考察

3.11稳定性考察

取丹天颈舒胶囊的内容物0.2g，精密称定，按供试品溶液的制备方法处理 样品，分别于0，2，4，6，8，12h测定样品含量，并计算RSD为1.09%。结果表明， 样品处理后在12小时内稳定，见表6。

表6稳定性考察

3.12回收率考察

称取已知含量的丹天颈舒胶囊的内容物0.1g共9份，分为3组，每组3份，以 样品中的含量为标准，按照加入标准的80％、100％、120％的对照品的原则，精 密加入含量相当的天麻素标准品溶液，按供试品溶液的制备方法制备9份3个浓度 样品溶液，滤过，续滤液供含量测定。计算回收率。结果见表7。

表7回收率的考察

结果表明样品的回收率为100.5%，RSD为0.58%，方法回收率良好。

3.13十批次样品的含量测定

取10个不同批号的丹天颈舒胶囊的内容物0.2g各2份，精密称定，按供试品 溶液的制备方法处理样品，滤过，续滤液供含量测定。计算含量，结果见表8。

表8样品含量测定(n=2)

根据以上实验可知测定丹天颈舒胶囊中天麻素含量的最佳测定方法为：采用 HPLC法，Agilent HC-C₁₈；流速：1.0mL·min^-1；流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液 （8：92）；柱温：室温；进样量：10μL；检测波长：220nm；以蒸馏水作为提取 溶剂用超声来提取丹天颈舒胶囊内容物中的天麻素。所建方法简便快速、结果准 确、重复性好，可作为丹天颈舒胶囊中天麻素的含量测定方法。

本发明的有益效果在于：本发明提供了丹天颈舒口服制剂的检测方法，包括 以处方中君药天麻中天麻素为指标，采用高效液相色谱法测定天麻素的含量；以 及药物中丹参、川芎、钩藤、栀子和杜仲的薄层色谱（TLC）鉴别方法；所述检 测方法准确，灵敏度高，重复性好，检测结果稳定，可有效控制丹天颈舒口服制 剂的质量，既更有利于生产厂家和监督管理部门对产品质量的监测，也可以为医 疗部门和患者的治疗提供更好的保障。

附图说明

图1是本发明丹参的荧光薄层色谱图

图2是本发明丹参的显色薄层色谱图

图3是本发明钩藤的薄层色谱图

图4是本发明川芎的薄层色谱图

图5是本发明杜仲的荧光薄层色谱图

图6是本发明杜仲的显色薄层色谱图

图7是本发明栀子的荧光薄层色谱图

图8是本发明栀子的显色薄层色谱图

图9是本发明天麻素标准品的高效液相色谱图

图10是本发明阴性供试品的高效液相色谱图

图11是本发明样品的高效液相色谱图

图12是本发明天麻素标准曲线图

下面结合实施例对本发明作进一步的说明；

具体实施方式

实施例1：丹天颈舒胶囊中天麻素的含量测定方法

丹天颈舒胶囊这样制备：取丹参500g、天麻500g、钩藤500g、石决明900g、 杜仲625g、川芎500g、栀子500g；加入8倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤 过，滤液浓缩至稠膏，微波真空干燥，粉碎，加入淀粉，装胶囊，制成1000粒， 每粒0.45g,即得。

天麻素的含量测定方法为：照中国药典高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇： 0.05%磷酸溶液=8：92为流动相；流速1.0mL·min^-1，检测波长为220nm；理论 板数按天麻素峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：精密称取在80℃减压干燥1h的天麻对照品适量，加流 动相制成每1mL含30μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：称取胶囊内容物0.2g，精密称定，至50mL容量瓶内， 加蒸馏水适量超声10min使溶解，放冷，定容至刻度，滤过，取续滤液即得；

测定法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5-10L，注入高效液相色谱仪， 测定，即得。

本品含天麻以天麻素计，每粒不得少于3.00mg。

实施例2：丹天颈舒胶囊中钩藤的薄层色谱鉴别方法

所述丹天颈舒胶囊按照实施例1的方法进行制备。

钩藤的薄层鉴别方法为：取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤 过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，加入浓氨水调PH值至9，氯仿萃取3次， 每次25mL，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另 取钩藤对照药材2.5g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录 ⅥB薄层色谱法试验；吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na 为黏合剂的硅胶G薄层板上，氨水缸饱和后，以氯仿：乙酸乙酯=5∶3为展开剂, 展开，取出，晾干；喷以改良碘化铋钾试液显色；供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例3：丹天颈舒胶囊中川芎的薄层色谱鉴别方法

所述丹天颈舒胶囊按照实施例1的方法进行制备。

川芎的薄层鉴别方法为：取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤 过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，氯仿萃取3次，每次25mL，合并氯仿液， 蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取川芎对照药材3g，按样 品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录ⅥB薄层色谱法试验；吸取上 述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上， 氨水缸饱和后，以氯仿：乙酸乙酯=10∶3为展开剂,展开，取出，晾干；365nm 紫外灯下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 荧光斑点。

实施例4：丹天颈舒胶囊中栀子的薄层色谱鉴别方法

所述丹天颈舒胶囊按照实施例1的方法进行制备。

栀子的薄层鉴别方法为：取胶囊内容物3g，加入丙酮50mL，60℃水浴回流 1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试品溶液；另取栀子 对照药材2.5g，按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录ⅥB薄 层色谱法试验；吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏 合剂的硅胶GF₂₅₄薄层板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=2∶3∶4∶2∶ 2为展开剂，展开，取出，晾干；254nm紫外灯下观察后，喷以10%硫酸乙醇试 液，在105℃下烘至显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。

实施例5：丹天颈舒胶囊中丹参的薄层色谱鉴别方法

所述丹天颈舒胶囊按照实施例1的方法进行制备。

丹参的薄层鉴别方法为：取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h， 滤过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次25mL，合并乙 醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取丹参对照药材3g， 按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录ⅥB薄层色谱法试验；吸 取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶GF₂₅₄薄 层板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=2∶3∶4∶1∶2为展开剂，展 开，取出，晾干；254nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1％铁氰化钾试液 显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例6：丹天颈舒胶囊中杜仲的薄层色谱鉴别方法

所述丹天颈舒胶囊按照实施例1的方法进行制备。

杜仲的薄层鉴别方法为：取胶囊内容物3g，加甲醇50mL，回流提取1h，滤 过，滤液水浴挥干，加水30mL使溶解，乙醚萃取3次，每次25mL，合并乙醚 液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为样品供试液；另取杜仲对照药材3g， 按样品供试液制备方法制备对照药材溶液；照药典附录ⅥB薄层色谱法试验；吸 取上述三种溶液各10μL，分别点于同一以0.5%CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层 板上，以甲苯：氯仿：乙酸乙酯：甲酸=5∶1∶1∶0.5为展开剂，展开，取出， 晾干；365nm紫外灯下观察后，喷以2％三氯化铁-1％铁氰化钾试液显色；供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。