一种应用于治疗代谢综合征的药物

摘要

本发明公开了一种应用于治疗代谢综合征的药物，其特征在于，其药用成分按质量百分比计，包括：木通皂苷D60-90％，姜黄素10-30％。本发明所述药物可应用于治疗代谢综合征。在实际应用中可以制成片剂、胶囊或者针剂。本发明的有益效果是本发明所述药物可以调节患者的蛋白质、脂质和碳水化合物的代谢过程，对代谢综合征起到很好的预防和治疗的作用。

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，主要涉及到一种应用于治疗代谢综合征的药 物。

背景技术

代谢综合征的特征在于一个人所具有的一组代谢风险因素，包括腹部肥 胖、胰岛素抵抗或葡萄糖不耐性、致动脉粥样硬化的血脂异常、血栓前状态 (prothromboti cstate)、促炎症状态(proinflammatory state)和高血压。如 果患者显示至少三种以下症状，成人治疗小组(AdultTreatment Panel)就定 义为代谢综合征：腰围测量男性至少40英寸，女性35英寸；血清甘油三酯 水平至少150mg/dl；HDL胆固醇水平男性低于40mg/dl，女性低于50mg/dl， 血压至少135/80mmHg和血糖(血清葡萄糖)至少110mg/dl。据估计，美国高 达25％的人口受代谢综合征困扰。代谢综合征的根本原因是胰岛素抵抗，其 中胰岛素摄取血中葡萄糖的能力削弱。这导致在进食后葡萄糖水平维持升高 状态，而胰腺对进食是通过分泌胰岛素作出响应的。如果不治疗，代谢综合 征显著增加II型糖尿病、心血管疾病和涉及动脉壁中粥样斑块聚集的其它疾 病的风险。目前，治疗代谢综合征的药物中一般都是重点治疗其中一种代谢 紊乱。

鉴于上述描述，亟待有一种对代谢综合征患者的蛋白质、脂质和碳水化 合物代谢的水平均有调节和治疗作用的药物的出现。

发明内容

本发明的目的在于提供一种应用于治疗代谢综合征的药物，以期能够从蛋 白质、脂质和碳水化合物代谢的三个水平同时进行调节，达到好的治疗和预 防效果。

为了实现上述目的和一些其他目的，本发明提供一种应用于治疗代谢综合 征的药物，其特征在于，其药用成分按质量百分比计，包括：

木通皂苷D  60-90％

姜黄素     10-30％

优选的是，药用成分按质量百分比计，包括：

木通皂苷D  90％

姜黄素     10％

优选的是，所述应用于治疗代谢综合征的药物可制成片剂、胶囊或者针 剂。

一种药物应用于治疗代谢综合征。

优选的是，所述药物用于治疗和预防糖尿病、肥胖症、胰岛素抗性、高 胆固醇血症和高血压。

优选的是，所述药物用于治疗和预防高脂血症。

优选的是，所述药物用于治疗和预防增加的血清三酰基甘油浓度。

优选的是，所述糖尿病患者的空腹血糖水平介于125mg/dl-200mg/dl之 间。

优选的是，所述药物使所述患者的空腹血糖水平降低至110mg/dl以下。

对于被定义为患有代谢综合征的人员而言，他们必须具有：

中心性肥胖(对于欧洲男性(Europid man)定义为腰围≥94cm，以及对 于欧洲女性(Europid woman)≥80cm，并且针对其他组为种族特异性数值)

加上以下4种因素的任何两种：

升高的甘油三酯(TG)水平：≥150mg/dL(1.7mmol/L)；

或针对这种脂质异常的特异性治疗，降低的高密度脂蛋白(HDL)胆固醇： 在男性中＜40mg/dL(1.03mmol/L*)，以及在女性中＜50mg/dL(1.29mmol/L*)， 或针对这种脂质异常的特异性治疗；

升高的血压(BP)：收缩BP≥130或舒张BP≥85mmHg，或先前诊断的高 血压的治疗；

升高的空腹血糖(FPG)≥100mg/dL(5.6mmol/L)，或先前诊断的2型糖尿 病，如果高于5.6mmol/L或100mg/dL。

木通皂苷D是中药续断中的主要有效成分之一，其含量达到2％以上， 木通皂苷D具有降低血脂的作用。

姜黄素是一种从姜科植物姜黄等的根茎中提取得到的黄色色素。为酸性 多酚类物质，主链为不饱和脂族及芳香族基团。通常用作肉类食品着色剂和 酸碱指示剂，同时具有抗炎、抗氧化等药理作用。

本发明的有益效果是本发明所述药物可以调节患者的蛋白质、脂质和碳 水化合物的代谢过程，对代谢综合征起到很好的预防和治疗的作用，本发明 所述药物的药用成分木通皂苷D和姜黄素是从天然中药物中提炼获得，提炼 方法比较简单，木通皂苷D和姜黄素的毒性较低，符合国家安全用药标准， 尤其是是姜黄素还是国际上认可的可食用色素，开发前景好，且这两种药用 成分在普通药店即可买到，价格适中，按照本发明所述药物的质量百分比配 比后应用于治疗代谢综合征效果好，适用于普通患者，可进行大规模生产。

附图说明

图1为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对肝细胞活力的影响。

图2为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对棕榈酸PA诱导的肝细胞 内脂质沉积影响(图2a为标准组、图2b模型组、图2c-图2e为用药组)。

图3为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对PA诱导的肝细胞内脂质 含量变化分析(图3a为标准组、图3b模型组、图3c-图3e为用药组)。

图4为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物PA诱导的肝细胞凋亡率的 影响的FlowJo软件分析。

图5为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物PA诱导的肝细胞凋亡率的影 响的柱形图。

图6为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对小鼠血清转氨酶水平的影 响。

图7为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对脂肪肝小鼠肝脏脂肪变性 的影响。

图8为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对于预防胰岛素抵抗的药效 学研究。

图9为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对脂肪细胞糖代谢的影响。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参 照说明书文字能够据以实施。

实施例1

应用于治疗代谢综合征的药物，其特征在于，其药用成分按质量百分比 计，包括：木通皂苷D70％，姜黄素30％。

实施例2

应用于治疗代谢综合征的药物，其特征在于，其药用成分按质量百分比 计，包括：木通皂苷D80％，姜黄素20％。

实施例3

应用于治疗代谢综合征的药物，其特征在于，其药用成分按质量百分比 计，包括：木通皂苷D90％，姜黄素10％。

应用本发明的治疗代谢综合征的药物按照实施例3中药物的质量百分比 配制基础药物并应用试验方法检测药物应用于治疗代谢综合征的治疗效果：

细胞实验是将上述比例的药物溶解于二甲基亚砜(DMSO)中进行加药，小 鼠实验是将上述比例药物制成混悬液进行口服灌胃给药。

1、木通皂苷D和姜黄素联合用药(MG)对肝细胞(BRL)生长、增殖的作用

材料来源：大鼠BRL细胞；

DMEM培养基(Gibco)；

涉及试剂：胎牛血清(FBS，Gibco)；二甲基亚砜(DMSO)；四甲基偶 氮唑盐(MTT，sigma)；

方法：取对数生长期BRL细胞，消化后制成单细胞悬液，用培养基调整 细胞浓度为5×10⁴/mL的细胞于96孔板培养，待细胞贴壁，更换培养基，向 培养基中加入木通皂苷D和姜黄素混合药物，使混合药物在培养基中的终浓 度为25、50、100、200、400、800μmol/L，孵育48h后，每孔加入10μL MTT (5mg/mL)，在细胞培养箱内继续孵育4h，弃去培养基，每孔加入150μL  DMSO，用酶标仪在492nm波长处检测每孔的光密度。每组设6个复孔，至 少重复3次，计算细胞生长抑制率。结果见图1。

由图1结果显示，随着药物浓度的提高细胞活力逐渐降低，细胞存活率 逐渐下降，说明本发明应用于治疗代谢综合征的药物对细胞蛋白质代谢具有 显著的影响。

2.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪肝细胞脂质沉积的影响

取对数期细胞，细胞计数后接种于6孔板中，每孔10000个，细胞分组 为：正常组(用正常培养基培养)、模型组(加入棕榈酸PA诱导)、木通皂 苷D和姜黄素联合用药低、中、高浓度(25、50、100μmol/L)预保护组。 待细胞培养48h后弃去培养基，磷酸盐缓冲液PBS冲洗3次，4％中性甲 醛固定30min，氟化硼二吡咯(Bodipy)493/503荧光染色30min，PBS冲 洗3次，荧光显微镜下摄片、观察细胞内脂质沉积情况，结果见图2，荧光 显微镜下可见正常组图2a和模型组(48h)图2b肝细胞排列紧密，边缘清 晰；模型组肝细胞细胞质周围均可见明显脂滴，显示强烈绿色荧光；木通皂 苷D和姜黄素联合用药各剂量组(图2c、图2d和图2e)肝细胞内脂滴数量 较模型组相比均有明显减少，荧光强度减弱。采用DMSO溶解染料后，检测 吸光度(OD)，结果见图3，相比起正常组图3a，模型组图3b的OD值显著 升高(P＜0.05)；相比起模型组，木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组(图 3c、图3d和图3e)的OD值均有降低，其中高剂量组有统计学意义(P＜0.05) (见图3)，表明木通皂苷D和姜黄素联合用药可抑制肝细胞内脂质沉积。

3.木通皂苷D和姜黄素联合用药对非酒精脂肪肝细胞凋亡的影响

取对数期细胞，细胞计数后接种于6孔板中，每孔10000个，细胞分组 为：正常组(用正常培养基培养)、模型组(加入PA诱导)、木通皂苷D和 姜黄素联合用药低、中、高浓度(25、50、100μmol/L)预保护组。待细胞 培养48h后弃去培养基，PBS冲洗3次，用不含乙二胺四乙酸(EDTA)的 胰酶消化收集；用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1～5×10⁵细胞；加入500μL的结合缓冲液(Binding Buffer)悬浮细胞；加入5μL膜 联蛋白V(Annexin V-FITC)混匀后，加入5μL碘化丙啶(Propidium Iodide)， 混匀；室温、避光、反应5～15min；在1h内，将细胞置激发光为488nm波 长的流式细胞仪上检测。上机测定时获取1×10⁵个以上细胞，重复3次。得 到的数据用Flow Jo软件分析结果(如图4所示)并画柱状图如图5所示。 正常对照组(图4a)、标准组PA(图4b)、木通皂苷D和姜黄素联合用药不 同浓度(25μmol/L-图4c、50μmol/L-图4d、100μmol/L-图4e)干预保护组 细胞凋亡率分别为1.00±0.10、6.80±0.45、6.60±0.10、4.90±0.15、1.70±0.10。 棕榈酸PA诱导的BRL细胞凋亡率较正常对照组相比显著增加(p＜0.05)；木 通皂苷D和姜黄素联合用药各浓度组干预后，细胞凋亡率较PA组相比有所 降低，其中木通皂苷D和姜黄素联合用药中、高浓度组存在显著性差异 (P＜0.05)，表明木通皂苷D和姜黄素联合用药可抑制肝细胞凋亡率。

4.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪肝小鼠的影响。

取ob/ob小鼠36只，体重37±2g，随机分成4组，即模型组，木通皂苷D 低、中、高剂量治疗组，每组9只。正常对照组用小鼠为C57BL/6J野生型小 鼠，9只，体重20±2g，小鼠分笼饲养在SPF级实验动物房内，自由进食饮水。 小鼠用基础饲料适应性喂养1周后，正常组小鼠继续喂食基础饲料，其它实验 组小鼠喂食高脂饲料，在喂食高脂饲料的同时，进行给药干预治疗。正常组 和模型组小鼠均给予腹腔注射等量生理盐水，木通皂苷D和姜黄素联合用药 低、中、高剂量治疗组分别给予腹腔注射30、60、120mg/kg木通皂苷D和姜 黄素，药物均以生理盐水溶解。每天腹腔注射1次，连续注射4周。末次给 药后禁食不禁水24h，称量体重，摘眼球取血后断颈处死小鼠，离心分离血 清，用试剂盒测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转 氨酶(ALT)含量；取肝脏，迅速解剖摘取肝脏，生理盐水漂洗，滤纸吸干 后称重，拍照，取肝脏右叶于4％中性甲醛固定后切片HE染色病理观察，取 肝脏左叶置于-80℃冰箱中保存用于测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量。实验结果如下表1-3和图 6-7所示。

表1木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠体重、肝指数的影响

注：与正常组比较，^*P＜0.05；与模型组比较，^#P＜0.05。

由表1结果显示，与模型组相比木通皂苷D和姜黄素联合用药中、高剂 量组可明显降低肝指数。此外，联合用药高剂量组可明显降低小鼠体重。

表2木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠血脂功能的影响

注：与正常组比较，^*P＜0.05；与模型组比较，^#p＜0.05。

由表2和图7结果显示，与模型组相比木通皂苷D和姜黄素联合用药 各剂量组小鼠TC、TG、LDL-C三项指标的水平均降低，其中高剂量组三项指 标差异均有统计学意义(P＜0.05)；木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组小 鼠HDL-C水平均高于模型组，比较均有统计学意义(P＜0.05)。木通皂苷D和 姜黄素联合用药各剂量组可明显降低小鼠转氨酶含量，结果提示，木通皂苷 D可在一定程度上改善高脂饮食诱导的小鼠血脂紊乱和肝功能异常。

表3木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠肝脏氧化应激功能的影响

注：与正常组比较，^*P＜0.05；与模型组比较，^#P＜0.05。

由表3结果显示，与模型组小鼠相比，木通皂苷D和姜黄素联合用药各 剂量组小鼠GSH-PX、SOD水平均有显著升高，MDA水平均有显著下降，且 存在剂量依赖性(P＜0.05)。结果提示，木通皂苷D和姜黄素联合用药对病变 小鼠的氧化应激/脂质过氧化物损伤具有一定的保护作用。由图7结果显示， 正常组大鼠肝脏颜色深红，表面光滑，边缘锐利，质地较软；模型组肝脏较 正常组体积增大、色黄、边缘变钝、质脆、切面带油腻，联合用药各剂量组 大鼠肝脏色泽、质地较模型对照组均明显改善。显微镜下观察肝脏病理切片， 正常组小鼠肝小叶结构清晰，细胞排列整齐，大小均匀，分界清楚，细胞核 位于细胞中央，圆而清晰，胞浆内未见脂肪空泡，无脂肪变性、坏死。模型 组肝细胞出现不同程度的脂肪变性，细胞体积明显变大，细胞核被挤在边缘， 细胞质内存在大量脂肪空泡，形态与脂肪细胞类似。联合用药各剂量组小鼠 肝脏肝细胞排列轻度紊乱，肝细胞脂肪变性和胞浆内脂滴沉积均有不同程度 改善，其中以高剂量组改善最为明显。

5.木通皂苷D和姜黄素联合用药预防胰岛素抵抗的药效学研究

3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞，分为正常组，模型组(IR)，阳性 药组(罗格列酮，Ros20μmol/mL)，联合用药低、中、高浓度(50、100、200μg/mL) 组，每组加入浓度为1.7μmol/L的胰岛素，除正常组外，其它各组另外加入 1.0μmol/L的地塞米松，培育48h后，吸取细胞上清液，采用葡萄糖氧化酶 法检测上清残余葡萄糖，计算出细胞消耗的葡萄糖。结果如图8所示，模型 组摄糖量仅为正常组的2/3，联合用药组与模型组相比摄糖量增加了 8％-11％，阳性药组增加了26.5％。结果提示，联合用药可显著预防胰岛素 抵抗的形成。

6.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪细胞糖代谢的影响

3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞，分为正常组，模型组(IR)，阳性药组 (罗格列酮，Ros20μmol/mL)，联合用药低、中、高浓度(50、100、200μg/mL) 组，直接加药48h后检测残余葡萄糖，计算出消耗的葡糖糖。结果如图9 所示，联合用药中、高浓度组脂肪细胞对葡糖糖的吸收和代谢较模型组有明 显的增加趋势，表明联合用药可在一定程度上增强细胞摄取葡糖糖的功能。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方 式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领 域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范 围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出的实施例。