一种硫单胞菌株KY-04及其培养基与应用

摘要

本发明提供了一种硫单胞菌株KY-04，保藏号为CGMCC No.8528，所述硫单胞菌株KY-04在好氧的条件下产生降解硫化氢气体的物质，从而减少硫化氢散逸到空气中，能够高效抑制污水散逸到空气中的硫化氢浓度，进而达到除臭的目的，与物理、化学方法相比具有成本低、去除效率高、无二次污染等优点，在除臭领域有广泛的应用前景。

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是一种硫单胞菌株KY-04及其培养基与应用。 

背景技术

恶臭是7种典型公害（大气污染、水质污染、土壤污染、噪声、振动、土地下沉、恶臭）之一，恶臭物质不仅可使人产生不快和厌恶感，而且还危害着人们的健康甚至生命。污水中的含硫化合物是硫化氢的前体，其来源主要有：生活污水，一般含有30mg/L～60mg/L的硫酸盐,3mg/L～6mg/L的有机硫(主要由蛋白质类物质产生)，4mg/L的磺酸盐(主要来源于洗涤剂)；某些含硫工业废水，即使经过石灰处理，仍然会显著增加废水中硫酸盐的浓度，以及含盐地下水的渗入。当硫化氢作为单一恶臭气体且浓度达到0.007ppm时，将影响人眼对光的反射，高于10ppm的浓度水平会刺激人的眼睛，可发生暂时性支气管收缩。硫化氢浓度达到800～1000ppm时，30分钟内能使人死亡，浓度再高则人会立即死亡，比氰化物的致死作用还迅速。此外由于硫化氢麻痹呼吸系统与嗅觉神经失去防范，因此更具有危险性。 

目前脱臭方法主要是物理法、化学法和生物法，但物理、化学方法往往存在着设备昂贵、运行费用高、有二次污染的问题，因而国外学者从20世纪50年代便致力于微生物脱臭法的开发。利用生物法处理恶臭气体最早的报道是在1960年，20世纪70年代初欧洲科学家开始了这方面的理论和应用研究，80年代荷兰和德国利用微生物处理恶臭气体取得了很好的效果，因此探索不同的菌株来处理恶臭是具有非常重要的实践意义的。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种硫单胞菌株KY-04，可有效抑制硫化氢气体产生。 

本发明所要解决的另一技术问题在于提供用于上述硫单胞菌株KY-04的培养基。 

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述硫单胞菌株KY-04的应用。 

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是： 

一种硫单胞菌株（Thiomonas.Sp）KY-04，其保藏号为CGMCC No.8528（保 藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号、保藏日期：2013年12月9日、保藏编号：CGMCC No.8528）。 

优选的，上述硫单胞菌株KY-04，由除臭填料中筛选出来，在分离平板上表现为放射状，革兰氏染色呈阴性，通过16SrDNA测序鉴定为硫单胞菌（Thiomonas.Sp），16SrDNA序列分析结果为序列表中<400>1所示序列。 

优选的，上述硫单胞菌株KY-04，所述核苷酸序列属于细菌16S rDNA序列的V3可变区。 

优选的，上述硫单胞菌株KY-04，具有较强的抑制恶臭源产生硫化氢气体的能力。 

用于上述硫单胞菌株KY-04的培养基，组方如下：每1L水中， 

固态加2%的琼脂。 

优选的，上述培养基，是由下述方法制备得到的：上述各组分除Na₂S₂O₃外按组方称量好后用一半体积的水溶解制成备用培养基，于121℃，102kpa下灭菌20min，Na₂S₂O₃溶解到另一半体积的水中采用过滤灭菌后加入到之前灭菌好的备用培养基中。 

上述硫单胞菌株KY-04，在抑制恶臭源产生硫化氢气体方面的应用。 

优选的，上述硫单胞菌株KY-04的应用，将所述硫单胞菌株KY-04投放至产生硫化氢气体的污水中，采用封口膜密封，实现该菌株抑制恶臭源产生硫化氢气体的作用。 

本发明的有益效果是： 

本发明提供了硫单胞菌株KY-04（保藏号为CGMCC No.8528），在好氧的条件下产生降解硫化氢气体的物质，从而减少硫化氢散逸到空气中，能够高效抑制污水散逸到空气中的硫化氢浓度，进而达到除臭的目的，与物理、化学方法相比具有成本低、去除效率高、无二次污染等优点，在除臭领域有广泛的应用前景。 

保藏信息 

分类名词：硫单胞菌Thiomonas sp. 

保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号 

保藏日期：2013年12月9日 

保藏号：CGMCC No.8528 

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。 

下述实施例中实验材料来自天津市纪庄子污水厂全过程除臭填料。 

硫单胞菌的富集分离培养基，组分如下： 

固态加2%的琼脂。 

该富集分离培养基的制备方法为：上述各组分除Na₂S₂O₃外按组方称量好后用一半体积的水溶解制成备用培养基，于121℃，102kpa下灭菌20min，Na₂S₂O₃溶解到另一半体积的水中采用过滤灭菌后加入到之前灭菌好的备用培养基中。 

实施例1 

取除臭填料5g溶于配好的富集分离培养基中，在30℃恒温箱中180r/min的条件下培养1周，然后培养产物离心沉淀，将沉淀物转接到新的培养基中继续培养，反复3次，最后将培养产物按梯度稀释，10^-1、10^-2…直至稀释到10^-7，每个浓度下涂平板，挑取单菌落接入斜面上；经过16SrDNA测序鉴定，确定为硫单胞菌株KY-04，该硫单胞菌测序的序列如下： 

TCTAATTCTGCGGGTACCGTCATCACCGAATGGTATTAGCACTCGATATTTCGCCCCCGCCAAAAGTGGTTTACAACCCG 

AAGGCCTTCATCCCACACGCGGCATTGCTGGATCAGGGTTGCCCCCATTGTCCAAGATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAG 

GCCCCCCGCGCCCCCGCCCCGCCCCGGGGCGCGCCCCGGGCGG 

实施例2 

实施例1所述硫单胞菌株KY-04应用于纪庄子污水厂进水的除臭效果 

实施方法：将所述硫单胞菌株KY-04接入液体培养基中培养，以10%的接种量，培养7天至菌种数的数量级约为10⁵-10⁶；以天津市纪庄子污水处理厂进水为实验对象，将进水各300ml分别装入两只500ml三角瓶中，以封口膜封住三角瓶口，将三角瓶置于磁力搅拌器上；在搅拌的5分钟时向其中一只三角瓶内注入30ml硫单胞菌液；搅拌15分钟后，用一次性注射器抽取两只三角瓶中的气体，并通过硫化氢快速检测仪测定硫化氢浓度。实验表明，投加硫单胞菌株KY-04的进水中释放出来的硫化氢浓度为21ppm，未加菌的进水中释放出来的硫化氢浓度为77.5ppm，加菌后散逸出的硫化氢浓度仅为未投加的27.1%。 

实施例3 

实施例1所述硫单胞菌株KY-04应用于海藻酸钠废水的除臭效果 

实施方法：将所述硫单胞菌株KY-04接入液体培养基中培养，以10%的接种量，培养7天至菌种数的数量级约为10⁵-10⁶；以海藻酸钠废水进水为实验对象，将进水各300ml分别装入两只500ml三角瓶中，以封口膜封住三角瓶口，将三角瓶置于磁力搅拌器上；在搅拌的5分钟时向其中一只三角瓶内注入30ml硫单胞菌液。搅拌15分钟后，用一次性注射器抽取两只三角瓶中的气体，并通过硫化氢快速检测仪测定硫化氢浓度。实验表明，投加硫单胞菌株KY-04的进水中释放出来的硫化氢浓度为32ppm，未加菌的进水中释放出来的硫化氢浓度为117.5ppm，加菌后散逸出的硫化氢浓度仅为未投加的27.2%。 

综上，可以清楚表明，本发明所述硫单胞菌株KY-04的投加有效抑制了污水中硫化氢气体的产生及散逸。 

上述参照实施例对该一种硫单胞菌株KY-04及其培养基与应用进行的详细描述，是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。