丝状真菌中多个基因拷贝的同时位点特异性整合

摘要

本发明涉及将两个或更多个拷贝的目标多核苷酸同时整合到真菌宿主细胞的染色体中的方法，该染色体包括至少两对位点特异性重组酶的识别序列，每对识别序列位于驻留阴性选择标记的两侧；对细胞转化携带侧翼也是识别序列的目标基因的构建体，以确保在重组酶短暂表达之后的双交换事件，接着选择所有阴性选择标记都被切除的细胞。