人或动物排泌物内有形成分高通量定量分析方法

摘要

本发明涉及一种人或动物排泌物内有形成分高通量定量分析方法，它包括限量取样、定量稀释、搅拌、测量、注入计数池、图像采集分析等步骤，本发明最大的优点在于可以定量分析，能确切测量出人或动物排泌物单位体积或单位重量内的有形成分数量，其结果准确，可以避免传统取样分析方法的不确定性。

说明书

技术领域

本发明涉及医疗检验领域,尤其涉及一种人或动物排泌物内有形成分高通量定量分析方法。

背景技术

目前，对于人或动物排泌物的采集和检验分析过程如下：取一部分排泌物放到容器中，如纸盒或塑料杯中，收集人员将容器送入检验室，检验人员将2滴稀释液滴在玻片上，再用棉签或小竹片从容器中取绿豆大小的样本涂在玻片上，搅拌均匀，再放在显微镜下观察。同时观察样本的颜色、硬度、粘液等理学性状，用低倍镜观察虫卵的数量，如原虫、勾虫、蛔虫的虫卵数量，再用高倍镜观察样本里的有形成分，如红细胞、白细胞、霉菌丝或特殊结晶的数量。如需检查隐血情况，则用取以上稀释后的样本滴在试纸上，观察试纸的变化情况。然后根据上述观察的结果出具检验报告，检验报告的内容包括样本的性状，如颜色、硬度、粘液，还包括样本的镜检结果，如含有多少个虫卵，多少个红细胞等，以及隐血的试验结果。以上对人或动物排泌物的采集和检验分析过程存在生物安全隐患、操作不卫生、气味大等缺点，检测结果不稳定，难以重复再现同样的检验结果，对同一样本进行多次采集检验的数据，偏差很大，操作过程不能标准化。

发明内容

本发明的目的在于克服现有方法学的不足，提供一种符合生物安全标准、操作过程标准化、检测结果准确的人或动物排泌物内有形成分高通量定量分析方法。

本发明是通过以下技术方案予以实现的：人或动物排泌物内有形成分高通量定量分析方法，其特征在于：它包括以下步骤：

（1）用取样器取限量的人或动物排泌物，作为待检样品；

（2）取一个已知体积或重量的容器，将定量的稀释液和待检样品加入到该容器中；

（3）将稀释液与待检样品搅拌均匀，形成混悬液；

（4）用测量仪器对已加入稀释液与待检样品的容器的体积或重量进行精确测量；

（5）取一块检测板，检测板中部设有一个已知深度的计数池，将混悬液注满计数池；

（6）将注满混悬液的计数池放在已知视野面积的显微镜下进行图像采集分析。

进一步的，所述步骤（1）中的取样器是一个下端设有叶片的取样棒，所述叶片有多个，在中心部位联结在一起，呈风车叶片状，互相之间间隔形成固定大小的空间区域，将取样棒插入人或动物排泌物中，旋转取样棒，排泌物即被采入叶片之间的区域。

进一步的，所述步骤（3）中的搅拌是采用磁力搅拌的方式进行的，先将磁性物体加入已装好稀释液和待检样品的容器中，再在容器外加一个不断变化的磁场，使磁性物体在变化磁力作用下不断转动，使稀释液和待检样品充分混合均匀，形成混悬液。

优选的，所述步骤（4）中所述的测量仪器为CCD扫描传感器，用CCD扫描传感器对容器内的混悬液体积进行精确测量。

优选的，所述步骤（4）中所述的测量仪器为分析天平，用分析天平对包含混悬液的容器进行精确称量。

进一步的，所述步骤（5）中的检测板为连续流动检测板，所述连续流动检测板包括入口管、计数池和出口管，所述入口管和出口管设在计数池两端，并与计数池连通，所述计数池的深度为已知数值，混悬液通过入口管进入计数池，在显微镜下进行图像采集。

优选的，上述步骤（1）～（6）是在常温常压的密闭系统中进行的。

本发明的积极效果在于： 

（1）与现有分析方法相比，本发明最大的优点在于可以定量分析，能确切测量出人或动物排泌物单位体积内或单位重量的有形成分数量，其结果精确度高、误差小、代表性强，可以避免传统取样分析方法的不确定性，分析结果的片面性，防止误诊。

（2）本发明方法过程严谨，具有定量性，可以实现取样分析过程的科学化、标准化。

（3）本发明采用取样棒取样，取样棒的下部为风车叶片式的取样头，操作人员只需旋转取样棒，样本即被采入中片之间的区域，取样的数量较为稳定，操作过程简单、卫生、科学。

（4）本发明采用磁力搅拌，在容器外加一个不断变化的磁场，使磁性物体在变化磁力作用下不断转动，使稀释液和待检样品充分混合均匀，形成混悬液。这种搅拌方式与传统的用小棒或小棍搅拌相比，具有搅拌速度快、搅拌效果好等显著优点。

（5）本发明取样、稀释、磁力搅拌、计数池观察，速度快，！与传统方法相比，具有明显的高通量优点。

（6）整个实验检测过程是在密闭系统内进行的，无气味、无污染，利于实验室生物防护，符合生物安全要求。

附图说明

图1为本发明实施例1中的取样棒的结构示意图。

图2为本发明实施例1中的连续流动检测板的结构示意图。

图3为本发明实施例2中的固定式检测板的结构示意图。

附图中：1—取样棒，  2—叶片， 3—中心孔， 4—入口管，  5—计数池，  6—出口管，  7—固定式检测板，  8—检测池。

具体实施方式

下面以实施例来说明本发明方法的具体实施过程，是对本发明的解释，而不是对本发明的限定，本发明的保护范围不仅限于此。任何按照本发明的原理、方法所做的改进、变动，均包括本发明的保护范围之内。

实施例1

以下用人的排泌物为例，采用CCD扫描传感器的测量方式对本发明方法作进一步说明。

（1）拿一个取样器，如图1所示，取样器为一个下端设有叶片2的取样棒1，取样棒1下端的叶片2有多个，在中心部位联结在一起，呈风车叶片状，互相之间间隔形成固定大小的空间区域；取样棒中间位置设有一中心孔3，用于加入稀释液，中心孔3在叶片的交汇处设有多个出口，所述出口为均匀分布。将取样棒1插入人的排泌物中，旋转取样棒1，排泌物即被采入叶片之间的区域。由于取样棒1下端的叶片2之间的区域是固定的，是设计时经过计算的，所以每次采集的待检样品为一有限量，其数值在设计值的范围之内。在本实施例中，假设取样棒1所采集的待检样品为V1。

（2）取一个截面积为S的椭圆形容器，将已采集待检样品的取样棒1垂直放置在椭圆形容器上方，再将体积为V2的稀释液加入取样棒1的中心孔3中，通过中心孔3对取样棒1叶片之间的待检样品进行冲洗，使待检样品和体积为V2的稀释液加入到椭圆形容器中。

（3）将稀释液与待检样品搅拌均匀，形成混悬液。所述搅拌方式为磁力搅拌，将体积为V3的小磁棒放入椭圆形容器中。再在容器外加一个不断变化的磁场，使小磁棒在变化磁力作用下不断转动，搅拌时间约为1～5分钟，使稀释液和待检样品充分混合均匀，形成混悬液。这种搅拌方式与传统的用小棒或小棍搅拌相比，具有卫生、搅拌速度快、搅拌效果好等显著优点。

（4）用CCD扫描传感器对截面积为S的椭圆形容器中的混悬液的高度进行精确扫描。假设扫描得到的高度值为H，那么我们就可以算出混悬液的体积为V4=S*H-V3，也就可以精确算出容器中的待检测样本的体积V1=V4-V2=S*H-V3-V2，从而计算出混悬液的浓度。

（5） 取一块检测板，如图2所示，检测板为连续流动检测板，连续流动检测板包括入口管4、计数池5和出口管6，所述入口管4和出口管6设在计数池5两端，并与计数池5连通，所述计数池5的深度为H2，混悬液通过入口管注满计数池5。

（6）将注满混悬液的计数池5放在在视野面积为S2的显微镜下进行图像采集分析，就可以知道体积为V5= S2*H2的混悬液所含有红细胞、白细胞、虫卵、霉菌丝或特殊结晶等有形成份的数量，那么我们也就可以算出单位体积内混悬液所含有有形成份的数量。再根据步骤（4）中所计算出混悬液的浓度，就可以确切地计算出未加稀释液前待检样品单位体积内所含有形成分的数量，从而出具准确的定量检验报告。

上述步骤（1）～（6）是在常温常压的密闭系统中进行的，无气味、无污染，利于实验室生物防护，符合生物安全要求。

实施例2

下面以称重计量的方式，对本发明方法作进一步阐述。

（1）用一个限量的取样器采集人的排泌物，作为待检样品。

（2）取一个重量为G1的容器，将待检样品和重量为G2的稀释液加入容器中。

（3）将稀释液与待检样品搅拌均匀，形成混悬液。所述搅拌方式为普通手工搅拌，将搅拌棒放入容器中不断搅拌，搅拌时间约为5分钟，使稀释液和待检样品充分混合均匀，形成混悬液。

（4）用十万分之一分析天平对装有混悬液的容器进行精确称重，假设称量的重量G3。便可由此计算出容器中的待检测样本的重量为G4=G3-G2-G1，从而计算出混悬液的浓度。

（5）取一块检测板，如图3所示，所述检测板为固定式检测板7，所述固定式检测板7中部设有一个已知深度为H2的检测池8，将混悬液注满检测池8。

（6）将装满混悬液的检测池8放在一个已知视野面积为S2的显微镜下观察，就可以知道体积为V5= S2*H2的混悬液所含有红细胞、白细胞、虫卵、霉菌丝或特殊结晶等有形成份的数量，那么我们也就可以算出单位体积内混悬液所含有有形成份的数量。再根据步骤（4）中所计算出混悬液的浓度，就可以确切地计算出未加稀释液前待检样品单位重量内所含有形成分的数量，从而出具准确的定量检验报告。

上述步骤（1）～（6）是在常温常压的密闭系统中进行的，无气味、无污染，利于实验室生物防护，符合生物安全要求。

以上两个实施例是对本发明的解释，而非限定，以上只是部分举例。应该指出的是，对本领域的技术人员来说，根据本发明方法的基本原理和结构进行的简单变换和改进，均包括在本发明的保护范围之内。