一种星突江鲽亲鱼的人工催产方法

摘要

本发明涉及水产养殖领域，具体地说是一种星突江鲽亲鱼的人工催产方法。使用鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）+多潘立酮（DOM）催产星突江鲽亲鱼，选择2.5龄以上雌鱼、2龄以上雄鱼，放入亲鱼培育池内促熟。通过水温、光照刺激及饵料强化控制其性成熟。使用鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）+多潘立酮（DOM）催产星突江鲽亲鱼，通过对雌雄亲鱼按体重进行两次药物注射，即可达到对星突江鲽进行人工催产的效果，进行人工授精。本发明的方法使星突江鲽亲鱼同步成熟，能在预期时间内集中产卵，且产卵量大，产卵周期缩短了10～15天，受精率高达80%，孵化率高达70%。人工催产亲鱼，雄鱼的催产成功率达到98%，雌鱼的催产成功率达到95%。

说明书

所属技术领域

本发明涉及水产养殖领域，具体地说是一种星突江鲽亲鱼的人工催产方法。

背景技术

星突江鲽(Platichthys stellatus)，属于鲽形目（Pleuronectiformes）、鲽科 （Pleuronectidae）、江鲽属（Platichthys），又称星斑川鲽。主要分布在太平洋北部 近海，亦进入淡水区，是一种广盐性大型鲆鲽鱼类，体重可达2～4公斤。它营养 丰富、肉味鲜美、骨刺少，可食部分多，口感独特，在国内外市场深受欢迎。星 突江鲽性格温驯，宜于集约化养殖，养殖效率较高。并且由于星突江鲽适温、适 盐范围广，经过驯化，可以进行内陆的池塘、水库、泻湖等养殖，其养殖范围较 为广阔。同时，也可改善目前我国海水鱼类养殖品种相对单一的局面，增加养殖 品种的多样性，有利于促进形成稳定的海水鱼类养殖产业。

目前，星突江鲽的人工繁育已有一些研究，但仍存在较多问题。其亲鱼人工 催产方法主要是依靠注射激素，但现有催产方法所用的激素和剂量达不到催产要 求，存在产卵量少、鱼卵受精率和孵化率都极低的缺点，无法满足生产需求。由 于不同的鱼种其催产的激素种类和条件往往会有较大的差别，因此对星突江鲽的 人工催产方法进行明确是十分有必要的。

发明内容

优质受精卵的提供是苗种生产的关键，合理的催产方法是受精卵取得的前提， 本发明的目的在于提供一种星突江鲽亲鱼的人工催产方法，使星突江鲽能在预期 时间内集中产卵，且亲鱼产卵量大、鱼卵的受精率和孵化率均大幅度提高。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案如下：

一种星突江鲽亲鱼的人工催产方法，具体步骤如下：

1）亲鱼的来源

捕捞野生星突江鲽成鱼进行驯化培育或从人工养殖的种群中选择经济性状明 显的养殖成鱼进行培育，作为星突江鲽亲鱼；选择2.5龄以上雌鱼、2龄以上雄鱼， 放入亲鱼培育池内促熟培育，亲鱼雌雄比例为1.5～3:1；

2）亲鱼的培育

强化培育条件：促熟期间水温为4～10℃，水温由4～5℃缓慢升温至8～10℃ 并保持在该温度，每两天升0.1～0.2℃；光照周期由8L/16D，每天增加光照15min， 逐步过渡到光照周期16L/8D长光照；

饲料：强化培育以新鲜鱼为主，在亲鱼的培育过程中同时添加Vc、V_E和裂 壶藻粉进行营养强化；饲料添加量为亲鱼体重的2～3%，按饲料重量添加5‰Vc、 1‰V_E和0.5‰裂壶藻粉；

日常管理：日换水量为300～500%；

3）注射催产激素

经过60～80天促熟，水温已由4～5℃升至8～10℃后，雌鱼性腺发育至Ⅳ期， 雄鱼轻压腹部有白色精液流出，这时进行人工催产；

捕捞健康、成熟度适中的雌雄亲鱼，进行第一次药物注射：在亲鱼胸鳍腹侧 或背部肌肉注射，注射深度为5～10mm；雌鱼注射剂量为每1kg体重注射5～7μg 的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物S-GnRHa和3～4mg的多潘立酮DOM；雄鱼 按每1kg体重注射3～4μg的S-GnRHa和1.5～2mg的DOM，S-GnRHa和DOM 用0.9wt%生理盐水制成混悬液；

间隔48小时后，进行第二次注射，注射激素、剂量及方法与第一次注射相同；

4）人工授精

第二次注射激素后3～5天，陆续对亲鱼人工采卵和采精；

轻轻挤压亲鱼腹部，收集精液与卵子，按体积比1:100～200混合均匀，随后 补入卵子体积1～5体积倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲 洗干净，置于新鲜海水中孵化。

所述的星突江鲽亲鱼的人工催产方法，步骤3）中，作为饲料的新鲜鱼为冷 冻鲅鱼或小黄花鱼，切块。

所述的星突江鲽亲鱼的人工催产方法，步骤3）的日常管理中，每天实时监 测水质因子：水温、盐度、溶解氧、pH，以保持水质的稳定；每半个月倒池一次， 日常管理中保持池内清洁和室内安静。

所述的星突江鲽亲鱼的人工催产方法，步骤3）的注射激素过程中，不需进 行麻醉，用毛巾将鱼眼盖住进行激素注射，以提高激素注射的速度，减少对鱼的 刺激。

所述的星突江鲽亲鱼的人工催产方法，步骤3）的混悬液中，S-GnRHa、DOM 的重量之和为0.5～1wt%。

本发明的优点和积极效果如下：

1、目前海水鱼类中人工催产一般采用人绒毛膜促性腺激素（HCG）、促黄体 素释放激素A2(LHRH-A2)，促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)等。这些激素虽然 也可以对星突江鲽亲鱼达到催产的效果，但催产后人工挤卵难度大，有卵块，鱼 卵的受精率和孵化率极低，达不到生产需求。本发明经过大量筛选，使用一定剂 量的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）+多潘立酮（DOM）进行人工 催产，得到了较好的效果，可以使星突江鲽亲鱼同步成熟、产卵时间集中。产卵 周期缩短了10～15天，受精率高达80%，孵化率高达70%。人工催产亲鱼，雄 鱼的催产成功率达到98%，雌鱼的催产成功率达到95%。

2、在生产中发现，催产激素使用浓度过大会刺激鱼体短时间内分泌性激素过 多，性腺充血，影响精卵质量，甚至导致亲鱼死亡；激素使用浓度过低则鱼体分 泌性激素过少，会导致性腺发育时间延长，起不到缩短繁育周期和集中繁殖的目 的。本发明通过实验得到的激素使用浓度范围可诱导繁殖期亲鱼的性激素分泌达 到理想的浓度，刺激精卵同时成熟。

具体实施方式

本发明星突江鲽亲鱼的人工催产方法，具体实施过程如下：

1、亲鱼的来源

捕捞野生星突江鲽成鱼进行驯化培育或从人工养殖的种群中选择经济性状明 显的养殖成鱼进行培育，作为星突江鲽亲鱼。选择2.5龄以上雌鱼、2龄以上雄鱼， 放入亲鱼培育池内促熟培育。亲鱼雌雄数量比例为1.5～3:1。

2、亲鱼的培育

强化培育条件：促熟期间水温为4～10℃，水温由4～5℃缓慢升温至8～10℃ 并保持在该温度，每两天升0.1～0.2℃；光照周期由8L/16D（明期L、暗期D分 别为8小时、16小时），每天增加光照15min，逐步过渡到光照周期16L/8D（明 期L、暗期D分别为16小时、8小时）长光照。

饲料：强化培育以新鲜鱼为主，如冷冻鲅鱼、小黄花鱼切块，在亲鱼的培育 过程中同时添加Vc、V_E和裂壶藻粉进行营养强化。饲料添加量为亲鱼体重的2～ 3%，按饲料重量添加5‰Vc、1‰V_E和0.5‰裂壶藻粉。

日常管理：日换水量为300～500%（体积）。每天实时监测水温、盐度、溶 解氧、pH等水质因子，以保持水质的稳定。每半个月倒池一次，日常管理中保持 池内清洁和室内安静。

3、注射催产激素

经过60～80天促熟，水温已由4～5℃升至8～10℃后，雌鱼性腺发育至Ⅳ期 （性腺发育高峰期），雄鱼轻压腹部有白色精液流出，这时可以进行人工催产。

捕捞健康、成熟度适中的雌雄亲鱼，进行第一次药物注射。在亲鱼胸鳍腹侧 或背部肌肉注射，注射深度为5～10mm。雌鱼注射剂量为每1kg体重注射5～7μg 的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）和3～4mg的多潘立酮（DOM）； 雄鱼按每1kg体重注射3～4μg的S-GnRHa和1.5～2mg的DOM。S-GnRHa和 DOM用0.9wt%生理盐水制成混悬液，S-GnRHa、DOM的重量之和为0.5～1wt%。

间隔48小时后，进行第二次注射，注射激素、剂量及方法与第一次注射相同。

4、人工授精

第二次注射激素后3～5天，即可陆续对亲鱼人工采卵和采精。

轻轻挤压亲鱼腹部，收集精液与卵子，按体积比1:100～200混合均匀，随后 补入卵子体积1～5倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干 净，置于新鲜海水中孵化。

下面通过实施例对本发明的具体实施方式进一步详细描述。

实施例1

1、亲鱼的来源

从码头收集捕捞的健康野生星突江鲽成鱼，放入亲鱼培育池内促熟培育。亲 鱼雌雄比例为1.5:1。

2、亲鱼的培育

强化培育条件：促熟期间水温为4～9℃，水温由4℃缓慢升温至9℃并保持 在该温度，每两天升0.2℃；光照由8L/16D，每天增加光照15min，逐步过渡到 16L/8D长光照。

饲料：强化培育以新鲜鱼鲅鱼、小黄花鱼切块，同时添加Vc、V_E和裂壶藻 粉。饲料添加量为亲鱼体重的3%，按饲料重量添加5‰Vc、1‰V_E和0.5‰裂壶 藻粉。

日常管理：日换水量为500%。每天实时监测水温、盐度、溶解氧、pH等水 质因子，以保持水质的稳定。每半个月倒池一次，日常管理中保持池内清洁和室 内安静。

3、注射催产激素

经过60天促熟，水温已由4℃升至9℃并保持一段时间后，雌鱼性腺发育至 Ⅳ期，雄鱼轻压腹部有白色精液流出，这时可以进行人工催产。

捕捞健康、成熟度适中的雌雄亲鱼，进行第一次药物注射。在亲鱼胸鳍腹侧 或背部肌肉注射，注射深度为10mm。雌鱼注射剂量为每1kg体重注射5μg的鲑 鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）和3mg的多潘立酮（DOM）；雄鱼按 每1kg体重注射3μg的S-GnRHa和1.5mg的DOM。S-GnRHa和DOM用0.9wt% 生理盐水制成混悬液，混悬液中S-GnRHa、DOM的重量之和为0.5wt%。

间隔48小时后，进行第二次注射，注射激素、剂量及方法与第一次注射相同。

4、人工授精

第二次注射激素后5天，即可陆续对亲鱼人工采卵和采精。

轻轻挤压亲鱼腹部，收集精液与卵子，按体积比1:100混合均匀，随后补入 卵子体积1倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干净，置 于新鲜海水中孵化。

由此，亲鱼催产率为93%，催产4尾亲鱼共获鱼卵280万粒，受精卵224万 粒，孵出仔鱼131万尾，平均受精率和孵化率分别为80%、58.5%。

实施例2

1、亲鱼的来源

从人工养殖的种群中选择生长快、个体大的养殖成鱼进行培育，放入亲鱼培 育池内促熟。亲鱼雌雄比例为2:1。

2、亲鱼的培育

强化培育条件：促熟期间水温为4～8℃，水温由4℃缓慢升温至8℃并保持 在该温度，每两天升0.1℃；光照由8L/16D，每天增加光照15min，逐步过渡到 16L/8D长光照。

饲料：强化培育以新鲜鱼鲅鱼、小黄花鱼切块，同时添加Vc、V_E和裂壶藻 粉。饲料添加量为亲鱼体重的2.5%，按饲料重量添加5‰Vc、1‰V_E和0.5‰裂 壶藻粉。

日常管理：日换水量为400%。每天实时监测水温、盐度、溶解氧、pH等水 质因子，以保持水质的稳定。每半个月倒池一次，日常管理中保持池内清洁和室 内安静。

3、注射催产激素

经过80天促熟，水温已由4℃升至8℃并保持一段时间后，雌鱼性腺发育至 Ⅳ期，雄鱼轻压腹部有白色精液流出，这时可以进行人工催产。

捕捞挑选的雌雄亲鱼，进行第一次药物注射。在亲鱼胸鳍腹侧或背部肌肉注 射，注射深度为8mm。雌鱼注射剂量为每1kg体重注射6μg的鲑鱼促性腺激素 释放激素类似物（S-GnRHa）和3.4mg的多潘立酮（DOM）；雄鱼按每1kg体重 注射3.2μg的S-GnRHa和1.8mg的DOM。S-GnRHa和DOM用0.9wt%生理盐水 制成混悬液，混悬液中S-GnRHa、DOM的重量之和为1.0wt%。

间隔48小时后，进行第二次注射，注射激素、剂量及方法与第一次注射相同。

4、人工授精

第二次注射激素后4天，即可陆续对亲鱼人工采卵和采精。

轻轻挤压亲鱼腹部，收集精液与卵子，按体积比1:150混合均匀，随后补入 卵子体积3倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干净，置 于新鲜海水中孵化。

由此，亲鱼催产率为98%，催产5尾亲鱼获鱼卵500万粒，受精卵375万粒， 孵出仔鱼263万尾，平均受精率、孵化率分别为75%、70%。

实施例3

1、亲鱼的来源

从码头收集捕捞的健康野生星突江鲽成鱼，放入亲鱼培育池内促熟培育。亲 鱼雌雄比例为3:1。

2、亲鱼的培育

强化培育条件：促熟期间水温为5～10℃，水温由5℃缓慢升温至10℃并保 持在该温度，每两天升0.2℃；光照由8L/16D，每天增加光照15min，逐步过渡 到16L/8D长光照。

饲料：强化培育以新鲜鱼鲅鱼、小黄花鱼切块，同时添加Vc、V_E和裂壶藻 粉。饲料添加量为亲鱼体重的2%，按饲料重量添加5‰Vc、1‰V_E和0.5‰裂壶 藻粉。

日常管理：日换水量为300%。每天实时监测水温、盐度、溶解氧、pH等水 质因子，以保持水质的稳定。每半个月倒池一次，日常管理中保持池内清洁和室 内安静。

3、注射催产激素

经过70天促熟，水温已由5℃升至10℃并保持一段时间后，雌鱼性腺发育至 Ⅳ期，雄鱼轻压腹部有白色精液流出，这时可以进行人工催产。

捕捞挑选的雌雄亲鱼，进行第一次药物注射。在亲鱼胸鳍腹侧或背部肌肉注 射，注射深度为5mm。雌鱼注射剂量为每1kg体重注射7μg的鲑鱼促性腺激素 释放激素类似物（S-GnRHa）和4mg的多潘立酮（DOM）；雄鱼按每1kg体重注 射4μg的S-GnRHa和2mg的DOM。S-GnRHa和DOM用0.9wt%生理盐水制成 混悬液，混悬液中S-GnRHa、DOM的重量之和为0.75wt%。

间隔48小时后，进行第二次注射，注射激素、剂量及方法与第一次注射相同。

4、人工授精

第二次注射激素后3天，即可陆续对亲鱼人工采卵和采精。

轻轻挤压亲鱼腹部，收集精液与卵子，按体积比1:200混合均匀，随后补入 卵子体积5倍量的新鲜海水进行授精，授精后将受精卵用新鲜海水冲洗干净，置 于新鲜海水中孵化。

由此，亲鱼催产率为95%，催产6尾亲鱼获鱼卵550万粒，受精卵358万粒， 孵出仔鱼222万尾，平均受精率、孵化率分别为65%、62%。

实施例结果表明，本发明使用鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa） +多潘立酮（DOM）催产星突江鲽亲鱼，选择2.5龄以上雌鱼、2龄以上雄鱼，放 入亲鱼培育池内促熟，通过水温、光照刺激及饵料强化控制其性成熟。使用鲑鱼 促性腺激素释放激素类似物（S-GnRHa）+多潘立酮（DOM）催产星突江鲽亲鱼， 通过对雌雄亲鱼按体重进行两次药物注射，即可达到对星突江鲽进行人工催产的 效果，进行人工授精。本发明的方法使星突江鲽亲鱼同步成熟，能在预期时间内 集中产卵，且产卵量大，产卵周期缩短了10～15天，受精率高达80%，孵化率 高达70%。人工催产亲鱼，雄鱼的催产成功率达到98%，雌鱼的催产成功率达到 95%。