法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2017-01-11
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):A01N65/18 授权公告日:20150422 终止日期:20151127 申请日:20131127
专利权的终止
2015-04-22
授权
授权
2014-03-19
实质审查的生效 IPC(主分类):A01N65/18 申请日:20131127
实质审查的生效
2014-02-19
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种藻类抑制剂的制备技术,特别涉及一种米氏凯伦藻抑制剂 及其制备方法和应用。
背景技术
赤潮被喻为“红色幽灵”,是海洋中某一种或几种浮游生物在一定环境条 件下暴发性繁殖或高度聚集,引起海水变色,影响和危害其他海洋生物正常生 存的灾害性海洋生态异常现象。近20年来,随着我国经济的迅猛发展和城市 化进程的加快,沿海地区工农业废水和生活污水排海量不断增加,近岸水体富 营养化加剧,为赤潮暴发提供了必要的物质条件。研究表明,赤潮不仅给水体 生态环境造成危害,也给渔业资源和生产造成重大经济损失,而且还给旅游业 和人类带来了危害,已成为全球性的海洋灾害之一。
引起赤潮的藻类通常称为赤潮藻,这些藻类分别隶属于蓝藻门、绿藻门、 裸藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、隐藻门等8个门类。米氏凯伦藻 (Karenia mikimotoi)属于甲藻门、裸甲藻目(Gymnodiniales)、凯伦藻属 (Kerenia),能分泌溶血性毒素和细胞性毒素,危害鱼类和海洋无脊椎动物,已 成为我国主要赤潮优势藻种,而且分布广泛,在浙江海域和福建沿海等地引发 过赤潮灾害,造成了严重的渔业经济损失和海洋生态问题。
目前,赤潮治理的方法主要分为物理法,化学法和生物法三大类。物理方 法虽然具有操作简单,不产生二次污染的优点,但仅仅适合于藻密度高的水体, 应用时要求专门的仪器设备,一次性投入大量的人力和财力,对于藻密度低范 围广的海域不是经济可行的方法;化学方法存在成本过高,以及沉降物对底栖 生物生存影响、二次污染等问题;生物方法常用的以培养大型海藻为代表,虽 然有一定的经济收益,但持续时间长,见效慢。本发明结合了化学法见效快与 生物法安全性高的优势,从中草药地锦草中提取活性成分作为抑藻剂,廉价无 毒,成本低廉,有利于实际推广使用。
现有专利赤潮藻防治方法中,公开了利用化学絮凝剂和氧化剂杀藻、控藻 的方法已有较多报道,而关于利用中草药提取物对海洋的赤潮抑制作用研究未 见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种米氏凯伦藻抑制剂,该抑制剂能有效抑制米氏凯 伦藻的生长,见效快、成本低,而且对水体不产生二次污染,绿色、安全、环 保。
本发明的另一目的是提供一种米氏凯伦藻抑制剂的制备方法。
为了实现以上技术效果,本发明通过如下技术方案来实现:
一种米氏凯伦藻抑制剂的制备方法,其步骤包括:将地锦草洗净、干燥, 然后将干燥的地锦草加入无菌水中煎煮0.5-3小时,过滤并取滤液。优选的, 所述干燥的地锦草加入无菌水中煎煮1-1.5小时。优选的,所述无菌水为蒸馏 水或超纯水
所述干燥的地锦草与无菌水的用量比为10-50g/L。优选的,所述干燥的地 锦草与无菌水的用量比为15-30g/L。
通过上述方法制备可以制得米氏凯伦藻抑制剂。
所述米氏凯伦藻抑制剂中的地锦草的有效浓度为0.06-0.1g/L。
本发明的另一目的是提供一种米氏凯伦藻抑制剂的应用方法,将米氏凯伦 藻抑制剂加入到米氏凯伦藻液中即可,所述米氏凯伦藻抑制剂的有效成分地锦 草与米氏凯伦藻液的用量配比为2-12mg:1L。
本发明的有益效果是:
1、所述米氏凯伦藻抑制剂能有效抑制米氏凯伦藻的生长,米氏凯伦藻抑 制率达到83%以上,抑制效果好,抑制效率高,而且对水体不产生二次污染, 绿色、安全、环保。
2、所述米氏凯伦藻抑制剂的原材料为地锦草,原料易得、价格便宜,成本 低,有利于实际推广使用,而且使用时不受地域、节气、温度等条件的限制。
3、所述米氏凯伦藻抑制剂的制备周期短,制备工艺简单,制备过程中不 涉及有机溶剂或其他化学物质,环境友好度高。
附图说明
图1为实施例1中米氏凯伦藻抑制剂对米氏凯伦藻的生长抑制效果对比 图,其中米氏凯伦藻抑制剂使用量为50mL/L。
图2为实施例1中米氏凯伦藻抑制剂对米氏凯伦藻的生长抑制效果对比 图,其中米氏凯伦藻抑制剂使用量为100mL/L。
图3为实施例2中米氏凯伦藻抑制剂对米氏凯伦藻的生长抑制效果对比 图,其中米氏凯伦藻抑制剂使用量为50mL/L。
图4为实施例2中米氏凯伦藻抑制剂对米氏凯伦藻的生长抑制效果对比 图,其中米氏凯伦藻抑制剂使用量为100mL/L。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步说明:
实施例1
本实施例中所用的藻种材料为米氏凯伦藻,是我国近岸水域常见种,是形 成赤潮的主要种类,藻类起始浓度为7300个/mL。
(1)米氏凯伦藻抑制剂的制备方法:
将中草药地锦草采回后洗净、烘干,称取20g干燥的地锦草,加入至1000mL 的蒸馏水中煎煮1-1.5h,过滤后得到浓度为80mg/L的过滤液,即为米氏凯伦 藻抑制剂。
(2)米氏凯伦藻抑制剂的使用方法:
在米氏凯伦藻液中加入步骤(1)中制得的米氏凯伦藻抑制剂,实验时分 成两组,A组的米氏凯伦藻液中加入50mL的米氏凯伦藻抑制剂,对照组中将米 氏凯伦藻抑制剂替代为50mL的蒸馏水,其他条件不变;B组的米氏凯伦藻液中 加入100mL的米氏凯伦藻抑制剂,对照组中将米氏凯伦藻抑制剂替代为100mL 的蒸馏水。然后将A组和B组共培养12天,第0天、第4天、第12天取样记 数,并记录其变化,具体如图1、图2所示,结果显示,加入抑制剂后,米氏 凯伦藻生长显著下降,抑藻效果明显,而且浓度越大,米氏凯伦藻生长越差, 两组实验组均在第12天时,对米氏凯伦藻的抑制率达到最大,A组的抑制率分 别为97.9%,B组的抑制率为98.2%。所制备的米氏凯伦藻抑制剂的抑制率随着 时间的增加而增大,并表现出浓度效应。
实施例2
本实施例中所用的藻种材料为米氏凯伦藻,它是我国近岸水域常见种,是 形成赤潮的主要种类,藻类起始浓度为53000个/mL。
(1)米氏凯伦藻抑制剂的制备方法同实施例1。
(2)米氏凯伦藻抑制剂的使用方法同实施例1。
然后将A组和B组共培养12天,第0天、第4天、第12天取样记数,并 记录其变化,具体如图3、图4所示,结果显示,加入抑制剂后,米氏凯伦藻 生长显著下降,抑藻效果明显,而且浓度越大,米氏凯伦藻生长越差,两组实 验组均在第12天时,对米氏凯伦藻的抑制率达到最大,A组的抑制率分别为 83.3%,B组的抑制率为92%。所制备的米氏凯伦藻抑制剂的抑制率随着时间的 增加而增大,并表现出浓度效应。
实施例3
本实施例中所用的藻种材料为米氏凯伦藻,它是我国近岸水域常见种,是 形成赤潮的主要种类,藻类起始浓度为40000个/mL。
(1)米氏凯伦藻抑制剂的制备方法:
将中草药地锦草采回后洗净、烘干,称取25g干燥的地锦草,加入至1000mL 的超纯水中煎煮1-1.5h,过滤后得到浓度为100mg/L的过滤液,即为米氏凯伦 藻抑制剂。
(2)在米氏凯伦藻液中加入步骤(1)中制得的米氏凯伦藻抑制剂,实验 时分成两组,A组的米氏凯伦藻液中加入50mL的米氏凯伦藻抑制剂,对照组中 将米氏凯伦藻抑制剂替代为50mL的超纯水,其他条件不变;B组的米氏凯伦藻 液中加入100mL的米氏凯伦藻抑制剂,对照组中将米氏凯伦藻抑制剂替代为 100mL的超纯水。然后将A组和B组共培养12天,第0天、第4天、第12天 取样记数,并记录其变化,结果显示,加入抑制剂后,米氏凯伦藻生长显著下 降,抑藻效果明显,A组的抑制率分别为94%,B组的抑制率为96%。所制备的 米氏凯伦藻抑制剂的抑制率随着时间的增加而增大,并表现出浓度效应。
以上所述为本发明的较佳实施例而已,但本发明不应该局限于该实施例所 公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改,都落 入本发明保护的范围。
机译: 检测并在必要时定量待分析混合物中至少一种蛋白酶抑制剂活性的方法,以及该方法在确定一种(或多种)单独(同)型(残余)活性(残留)活性中的应用(一种或多种)蛋白酶抑制剂和确定混合物的总(残余)活性的方法的应用,可能在诸如蛋白酶抑制剂的去除或失活过程等加工过程之后。
机译: 提到了一种新的抑制胃蛋白酶活性的物质的混合物的制备方法,其中提到了胃蛋白酶抑制剂胃酶抑素b和胃蛋白酶抑制剂c。制备这两种胃蛋白酶抑制剂的异构体的药物的方法,并介绍了该方法的应用,该方法由指令补剂第19a条组成
机译: 提到了一种新的抑制胃蛋白酶活性的物质的混合物的制备方法,其中提到了胃蛋白酶抑制剂胃酶抑素b和胃蛋白酶抑制剂c。制备这两种胃蛋白酶抑制剂的异构体的药物的方法,并介绍了该方法的应用,该方法由指令补剂第19a条组成