新黄酮类化合物及其在制备抗缺血性心脏病药物中的应用

摘要

本发明涉及医药技术领域，是新黄酮类化合物在制备抗缺血性心脏病药物中的应用。本发明是从黄檀属植物中提取分离得到的一类具有C

说明书

技术领域

本发明涉及一种新黄酮类化合物及其在制备抗缺血性心脏病药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

随着生活水平的提高和人口老龄化，同时受社会、环境等因素影响，心血管疾病发病率逐年增加，已成为人类死亡率最高的疾病之一。在冠心病、心绞痛等多种缺血性心肌病的发生发展过程中多伴有心肌细胞损伤，进而发生细胞凋亡、钙超载等，引起心血管功能的紊乱。现在药理研究表明，作为民间药用植物，黄檀属（Dalbergia）植物在治疗缺血性心肌病方面具有明显的药效作用，可扩张冠状动脉，降低血脂、降低血压、抗氧化和强心等。作为该属植物中的主要特征成分，新黄酮类化合物在抗缺血性心脏病方面的相关药理研究至今未见报道。本发明针对新黄酮类化合物通过减少自由基及脂质过氧化物所导致的细胞膜损伤及抑制心肌细胞凋亡，保护心肌，从而达到治疗缺血性心脏病的目的。本发明为今后开发抗缺血性心脏病药物，奠定了良好的药效物质基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种新黄酮类化合物，该类化合物是从黄檀属植物中提取制得的新黄酮类化合物。

本发明的另一目的是提供新黄酮类化合物在制备抗缺血性心脏病药物中的应用，为缺血性心脏病提供一类疗效较好的治疗药物。

本发明是这样来实现的，从黄檀属植物中提取制得的新黄酮类化合物，其特征在于该类化合物所具有的结构通式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别如下所示：

上述结构式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅为H、甲氧基、乙酰氧基以及羟基。

其制备方法是取黄檀属植物药材粗粉500 g，采用甲醇溶剂冷浸提取2次，每次1h，合并提取液，减压浓缩，干燥，得浸膏。将浸膏制成混悬液，石油醚（60~90℃）萃取，萃取3次，合并萃取液，回收石油醚，干燥，称重，得石油醚萃取部位10 g。将石油醚萃取部位干法上样进行硅胶柱（200目）色谱分离，用石油醚（60~90℃）-丙酮混合溶剂(30:1~3:1)进行梯度洗脱，收集4:1~3:1流份浓缩、粗结晶、反复重结晶，制备得到高纯度达95%以上的单一化合物结晶体。

该类化合物在制备缺血性心脏病药物中的应用，是将该化合物及其生理上可以接受的盐或水合物应用于缺血性心脏病，所述缺血性心脏病是指冠心病、心绞痛、心肌梗死。

 

上述结构通式中，具有结构通式Ⅰ的化合物是：

化合物1

化合物名称： R(-)-Latifolin ，化学分子式：C₁₇H₁₈O₄，无色方晶，有紫外（365nm）吸收，可见光下呈黄色斑点。

¹H NMR (600 MHz, MeOD)  δ 7.01 – 6.97 (m, H-4′, H-6′), 6.75 – 6.72 (m, H-5′, H′-3), 6.59 (s, H-6), 6.56 (s, H-3), 6.19-6.14 (m, H-2′′), 5.36 – 5.37 (br d, J= 6, H-1′′), 5.09 (dt, J = 10.2, 1.8 Hz, H-3_a′′), 4.72 (dt, J = 16.8, 1.8 Hz, H-3_b′′), 3.82 (s, 2-OCH₃), 3.68 (s, 4-OCH₃).

¹³C NMR (150MHz, MeOD)  δ 153.6 (C-2′), 149.4(C-2), 145.43(C-4),140.0(C-5), 138.9(C-2′′), 129.2 (C-1′), 128.4 (C-4′), 127.5 (C-6′),122.6 (C-1), 120.5 (C-5′), 116.5(3′′=CH₃), 116.2(C-3′), 115.1(C-6), 97.1 (C-3), 57.0 (2-OCH₃), 55.9 (4-OCH₃), 40.0(C-1′′).

化合物2

化合物名称：2-O-Methyllatifolin，化学分子式：C₁₈H₂₀O₄。黄褐色粉末，溶于甲醇。

¹H NMR (400 MHz, CDCl3, δ ppm) : 6.77-7.13 (4H, m, Bring), 6.60(1H,s,6-H), 6.44 (1H, s, 3-H), 6.13(1H,ddd,C-H_X, J=17.20,10.41, 5.54), 5.36 (1H, brd, C-H_A, J=5.92), 5.07 (1H, ddd, =CH_2cis, J=10.18, 1.59,1.59), 4.70 (1H, ddd, =CH_2trans, J=17.08, 1.71, 1.71), 3.80 (3H, s, -OCH3), 3.69 (3H, s, -OCH₃), 3.65(3H, s, -OCH₃).

¹³C NMR(100MHz, CDCl₃, δ ppm) : 158.50 (C-2'), 152.27 (C-2), 146.36 (C-4), 141.64 (C-7), 140.64 (C-5), 130.75(C-6'), 128.69 (C-4'), 121.72 (C-5'), 119.17 (C-1'), 116.93 (=CH2), 116.75 (C-6), 112.27 (C-3'), 111.52 (C-1), 99.32 (C-3), 58.85 (-OCH₃), 57.53 (-OCH₃), 57.16 (-OCH₃), 41.56 (C-8).

化合物3

化合物名称：R(+)-Dalbergiphenol, 化学分子式：C₁₇H₁₈O₃，易被光学氧化的黄褐色油状物。

¹H  NMR (60MHz, CDCl_3,  δ ppm, TMS): 7.33 (5H, s, H-2' -6'), 6.59 and 6.83 (2H, 2s, H-3, H-6), 6.07-6.53 ( 1H, m, -CH=CH₂, J= 17.0, 10.0 and 6.0Hz), 5.25 ( 1H, s, OH), 3.91 (3H, s, OMe), 4.81-5.32 (3H, m, CH-CH=CH₂  and =CH₂, J=17.0, 10.0, 6.0 and 1.6Hz), 3.74 (3H, s, OMe). 

¹³C NMR(60MHz, CDCl₃, δ ppm, TMS): 150.52 (C-2), 145.10 (C-4), 143.25 (C-1'), 140.39 (C-7), 139.39 (C-5), 128.42 (C-3'), 128.42 (C-5'), 127.98 (C-2'), 127.98 (C-6'), 125.84 (C-4'), 124.74 (C-1), 115.73 (=CH₂), 115.27 (C-6), 97.54 (C-3), 56.91 (4-OCH₃), 56.06 (2-OCH₃), 46.97 (C-8).

化合物4

化合物名称：3'-Hydroxy-2,4,5-trimethoxydalbergiquinol ，分子式：C₁₈H₂₀O₄，白色结晶(MeOH-H₂O)。

¹H NMR (300MHz, CDCl₃) δ 7.11( 1H, dd, J=8, 7.6Hz,  H-5'), 6.74(1H, d, J=7.6Hz, H-6'), 6.66(1H, s, H-6), 6.64( 1H, dd, J=8.2Hz, H-4'), 6.62( 1H, d, J=2Hz, H-2'), 6.52 (1H, s, H-3), 6.22 ( 1H, ddd, J=17.1, 10.2, 6.7Hz, -CH=CH₂), 5.17( 1H, dd, J=10.2, 1.6Hz,  =CH_2cis), 5.03(1H, d, J=6.7Hz, CH-CH=CH₂), 4.92(1H, dd, J= 17.1, 1.6 Hz, =CH_2trans ), 3.75(3H, s, 5-OCH₃), 3.75(3H, s, 4-OCH₃), 3.71(3H, s, 2-OCH₃).  

¹³C NMR(75.4MHz, CDCl₃)  δ 155.43(C-3'), 151.24(C-2), 148.17(C-4), 145.23(C-1'), 142.99(C-5), 140.13(C-7), 129.17(C-5'), 123.20 (C-1), 120.89(C-6'), 116.09(CH₂), 115.38(C-2'), 113.58(C-6), 112.91(C-4'), 98.34(C-3), 56.80(2-OCH₃), 56.66(5-OCH₃),   56.07(4-OCH₃), 46.89(C-8) .

化合物5

化合物名称：R(+)-Dalbergiphenol ，易光学氧化的褐色油状浸膏，分子式：C₁₈H₂₀O_3 , 

    ¹H NMR(60MHz, CDCl₃, δ ppm, TMS):  7.33  (5H, s, H-2' -6' ), 6.59 and 6.83 (2H, 2s, H-3, H-6), 6.07-6.53 ( 1H, m, -CH=CH₂, J=17.0, 10.0 and 6.0Hz), 4.81-5.32 (3H, m, CH-CH=CH2 and =CH₂, J=17.0, 10.0, 6.0 and 1.6Hz), 5.25 ( 1H, s, OH), 3.91 (3H, s, OMe ), 3.74 (3H, s, OMe ).  

¹³C NMR(60MHz, CDCl₃)  δ 150.52 (C-2) ,145.10 (C-4) , 143.25 (C-1') ,  140.39 (8-CH) , 139.39 (C-5) , 128.42 (C-3') ,128.42 (C-5') , 127.98 (C-6') , 127.98 (C-2') , 125.84 (C-4') , 124.74 (C-1) , 115.73(=CH₂) , 115.27 (C-6) , 97.54(C-3) , 56.91(4-OCH₃), 56.06(2-OCH₃) , 46.97 (7-CH) . 

上述结构通式中，具有结构通式Ⅱ的化合物是：

化合物1

化合物名称：  1,6- dyhydroxy -4-Methoxydalbergione，分子式：C₁₆H₁₅O₅ 。

¹H NMR(500MHz, CDCl_3 , δ ppm ) : 7.30 (1H ,tt , J=7.0, 1.5Hz, H-3' ), 7.30 (1H ,tt , J=7.0, 1.5Hz, H-5' ), 7.26 (1H ,tt , J=7.0, 1.5Hz, H-4' ), 7.22 (1H ,tt , J=7.0, 1.5Hz, H-6' ),7.22 (1H , dd, J=7.0, 1.5Hz, H-2' ), 5.94 (1H , ddd ,J=17.0, 8.5, 7.0Hz, H-8), 5.74 (1H , s , H-3 ), 5.27 (1H , dt , J=8.5, 1.4Hz, H-9a ), 5.04 (1H , dt , J=17.0, 1.4Hz, H-9b),  4.54 (1H , d , J=7.0Hz, H-7 ), 3.76 (1H , s , H-6 ), 3.75 (1H , s , 4-OMe ); 

 ¹³C NMR (125MHz, CDCl_3, δ ppm ) : 190.2 (C-2), 187.7 (C-5), 158.8 (C-4), 137.6 (C-1'), 134.0 (C-8),  128.8 (C-2'), 128.8 (C-6'), 128.6 (C-3'), 128.6 (C-5'), 127.4 (C-4'), 119.8 (C-9), 108.7 (C-3), 64.0 (C-1), 56.4 (4-OMe), 55.7 (C-6), 44.9 (C-7) . 

化合物2

化合物名称：R(+)-4-Methoxydalbergione，分子式：C₁₆H₁₄O₃，黄色结晶。

¹³C NMR (60MHz, CDCl₃, δ ppm , TMS): 186.01 (C-2) , 182.06 (C-5) , 158.32 (C-4) , 150.79 (C-1) , 139.23 (C-1') , 137.08 (8-CH) , 131.34 (C-4') , 128.54 (C-3') , 128.54 (C-5') , 128.32 (C-2') ,128.32 (C-6') , 126.94 (C-6) , 117.92 (=CH₂) , 107.66 (C-3) , 56.01 (4-OCH₃) 46.84 (7-CH) ,另外氢谱。

 

上述结构通式中，具有结构通式Ⅲ的化合物是：

化合物1

化合物名称：6-Hydroxy-2,7-dimethoxyneoflavene ，分子式：C₁₇H₁₅O₄，淡黄色无定形态。

¹H  NMR (400 MHz, CDCl₃):  δ_H  7.39-7.30 (5H, m, H-2', H-3', H-4', H-5' and H-6'), 6.71  (1H, s, H-5), 6.65 (1H, s, H-8), 5.73 (1H, d, J = 4.2 Hz, H-3), 5.60 (1H, d, J = 4.2 Hz, H-2), 5.28 (1H, s, 6-OH), 3.90 (3H, s, 7-OMe), 3.52 (3H, s, 2-OMe);  

¹³C  NMR (100 MHz, CDCl₃):  147.4 (C-7) , 145.4 (C-9) ,139.9 (C-6) ,138.6  (C-10) , 137.7 (C-1') ,  128.7 (C-2') , 128.7 (C-6') , 128.3 (C-3') , 128.3 (C-5') , 128.0 (C-4') , 115.6 (C-3) , 114.5 (C-4) , 111.6 (C-5) , 100.4 (C-8) , 96.2 (C-2) , 56.0 (7-OCH₃) , 54.9 (2-OCH₃) . 

该类化合物在制备缺血性心脏病药物中的应用，该类化合物在制备缺血性心脏病药物中的应用，

具体实施方式

实施例1  制备(R)-Latifolin化合物

取黄檀属植物药材粗粉500 g，采用甲醇溶剂冷浸提取2次，每次1h，合并提取液，减压浓缩，干燥，得浸膏。将浸膏制成混悬液，石油醚（60~90℃）萃取，萃取3次，合并萃取液，回收石油醚，干燥，称重，得石油醚萃取部位10 g。将石油醚萃取部位干法上样进行硅胶柱（200目）色谱分离，用石油醚（60~90℃）-丙酮混合溶剂(30:1~3:1)进行梯度洗脱，收集4:1~3:1流份浓缩、粗结晶、反复重结晶，制备得到高纯度达95%以上的单一化合物结晶体。

 

  实施例2  药效试验

一、精制冠心方新黄酮成分对大鼠H9c2心肌细胞H₂O₂损伤的影响

1. 实验方法

1.1 细胞培养

体外培养H9c2心肌细胞，培养液为DMEM（高糖）+10%FBS +0.1%双抗。取对数生长期的细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养36 h后，分组处理。

1.2分组

① 空白对照组：换用新的培养基培养4 h后，加入不含血清的培养基处理6 h。

② H₂O₂组：换用新的培养基培养4 h后，加入无血清培养基配制的H₂O₂，使其终浓度为90 μM作用6 h。

③ 给药组：分别换用含有四个新黄酮成分，R(-)-latifolin(以下简称SF-1)、2-O-Methyllatifolin(以下简称SF-2)、R(+)-dalbergiphenol(以下简称SF-3)、2,4-dihydroxy-5-methoxy- benzophenone(以下简称SF-4)）的培养基（终浓度为100、50、25、12.5、6.25 ）作用4 h，再加入无血清培养基配制的终浓度为90 μM H₂O₂作用6 h。

1.3 指标测定

     采用MTT法测定细胞活力。

2.实验结果(见表1-1～1-4)

   表1-1 不同浓度SF-1对H₂O₂致H9c2心肌细胞损伤的影响（）

注：与模型组比较，*为P＜0.05，**为P＜0.01

表1-2  不同浓度SF-2对H₂O₂致H9c2心肌细胞损伤的影响（）

注：与模型组比较， **为P＜0.01

表1-3  不同浓度SF-3对H₂O₂致H9c2心肌细胞损伤的影响（）

注：与模型组比较，*为P＜0.05，**为P＜0.01

表1-4  不同浓度SF-4对H₂O₂致H9c2心肌细胞损伤的影响（）

注：与模型组比较，*为P＜0.05，**为P＜0.01

4.结论

从表中可以看出，细胞缺氧6 h后，与正常组相比，缺氧模型组细胞存活率明显降低，各浓度的SF-1干预后细胞存活率较模型组均有升高，有显著性差异。SF-2低浓度有升高细胞存活率的作用但没有统计学意义。SF-3的各浓度都有升高细胞存活率，但100 没有统计学差异，其余浓度有显著性差异。SF-4的25、12.5、6.25、3.125 升高细胞存活率，有显著性差异。提示SF-1、SF-3、SF-4适当的浓度可以提高细胞的存活率，对细胞缺氧损伤有保护作用。

 

（二）精制冠心方新黄酮成分对乳鼠心肌细胞缺氧损伤的影响

1.实验方法

1.1 乳鼠心肌细胞培养

取出生1～3 d 的SD大鼠，无菌操作取出心脏，迅速置于冷的D-Hanks液中。仔细剥离心脏大血管及多余碎组织，用D-Hanks液反复认真冲洗至少3遍，洗去残留的血细胞及其它杂质。用眼科剪将心脏剪成1 mm³ 大小组织块，再用D-Hanks洗一次，移入两个具塞三角烧瓶中，然后分别加入5 ml 0.06% 胰蛋白酶溶液，37 ℃水浴消化5 min，自然沉淀后吸取上层混悬液移弃，再加入胰蛋白酶溶液5 ml于组织中同法消化（消化时间约为 5 min，观察上清变浑浊终止消化），吸取消化后的上层混悬液加等量含10% 胎牛血清的DMEM 培养基终止消化，吹打混匀，1200 r，离心10 min，弃去上清。再用10％胎牛血清DMEM培养基悬浮心肌细胞沉淀混匀。重复上述步骤，反复多次消化，直至剩余少许组织。 将所得细胞悬液接种到培养瓶中，放入37 ℃ 5%CO₂培养箱培养1.5 h，吸出细胞悬液，在细胞悬液中加入终浓度为0.1 的Brdu(溴脱氧尿嘧啶核苷)，进行台盼蓝计数，调整细胞密度，以1×10⁶个接种于96孔板。然后将培养板放入37 ℃ 5%CO₂培养箱中继续培养，隔天换液。

1.2 缺氧模型制备

取培养72 h的心肌细胞去掉原培养基，换用低糖无血清DMEM培养基后放入厌氧培养盒，迅速把厌氧产气包放入盒中并密封，放入37 ℃培养箱中培养。厌氧产气包可以迅速消耗产气盒中的氧气，0.5 h 后达到低氧状态。

1.3 分组处理

①正常组：培养板置 37 ℃ 5%CO₂培养箱中持续培养24 h。 

②缺氧模型组：用D-Hanks冲洗2次后换用不含胎牛血清的低糖DMEM培养液，置于放有厌氧袋的厌氧培养盒中，37 ℃密闭培养24 h。

③给药组：用D-Hanks冲洗2次后，换用不含胎牛血清的低糖DMEM培养液配制的不同浓度（终浓度为50、25、12.5、6.25 ）的药物，置于放有厌氧袋的厌氧培养盒中，37 ℃密闭培养24 h。

1.4指标测定

① 采用MTT法测定细胞活力。

② 乳酸脱氢酶(LDH)活性测定：取各组样本细胞培养液上清液，按照试剂盒操作说明书，在440 nm处测定乳酸脱氢酶(LDH)活性。

2.实验结果（见表2-1～2-2）

     表2-1结果显示，与正常组比较，各组细胞存活率均下降，SF-1的12.5 、25 、50 浓度能够升高细胞存活率，其中25 、50 浓度与模型组比较有显著性差异。SF-2各浓度都没有提高细胞的存活率。SF-3只有6.25 的浓度升高了细胞存活率。SF-4的6.25 、12.5 升高了细胞存活率，与模型组比较有差异性。

表2-1  各组细胞存活率（%）的比较

注：与模型组比较，*为P＜0.05，**为P＜0.01

表2-2结果显示，给药组中SF-1的25 、50 ，SF-3的6.25 、SF-4的 6.25、12.5 浓度能降低LDH的活性，与模型组比较有显著性差异。 

表2-2  不同浓度新黄酮类化合物对缺氧损伤细胞LDH活性的影响（）

注：与模型组比较，*为P＜0.05，**为P＜0.01

   3.结论

通过厌氧培养盒＋厌氧产气包＋低糖无血清DMEM培养基建立体外原代心肌细胞缺氧模型。在心肌细胞缺氧损伤的模型中，SF-1、SF-3、SF-4适当的浓度可以提高缺氧环境下心肌细胞的存活率，减少LDH的泄漏。

 

（三） SF-1对结扎冠状动脉所致心肌缺血大鼠的影响

1.       实验方法

1.1分组

 SD大鼠随机分为空白组、模型组、硝酸甘油（5 ）组、SF-1高剂量（40 ）组、SF-1中剂量（20 ）组、SF-1低剂量（10 ），每组6只，各组实验当天各给一次药，硝酸甘油组和药物组腹腔注射不同浓度的药物，空白组和模型组腹腔注射等容量生理盐水。

1.2 模型建立

给药前大鼠禁食不禁水12 h，给药15 min后，大鼠20%乌拉坦(0.6ml/100g)麻醉，固定于恒温（37 ℃）鼠兔解剖台上；分离左股动脉、右颈动脉和气管；进行动脉插管，将含肝素钠液导管插入左股动脉和右颈动脉，导管另一头连接于压力换能器，导入Power-lab多道生理记录仪描记左心室压、动脉压曲线和心电图，心电图异常者剔除；针状电极插入四肢皮下描记心电图；于环状软骨下1-2 mm处剪开气管，接动物呼吸机(频率：90次，吸呼比为1:1.5)；剪断第3-5肋，撑开胸腔，镊子撕开心包膜，充分暴露心脏并稳定5 min；心脏表面滴蘸盐酸利多卡因注射液；用穿有5/0缝合线的小圆针从左心耳下缘2 mm处进针，垂直于左前降支由肺动脉圆锥旁出针，进针深度控制在1.5 mm左右，宽度为1.5～2 mm，结扎左冠状动脉前降支后迅速关闭胸腔，空白组只穿线不结扎。冠脉结扎成功标志：结扎线远端心肌颜色发绀，心电图表现为S-T段抬高和(或)T波高耸。造模后3 h，由腹腔取血，测定血清酶的含量。取血后，迅速开胸取心脏并染色。

            观察指标

（1）ST值、心率、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室等容期压力最大变化速率(±dp/dtmax)、平均动脉压（MAP）的变化

（2）心肌梗死面积：3 h后迅速开胸取心脏，用冷PBS溶液冲洗余血，再注入1%依文思蓝溶液；剔除血管和脂肪等非心肌组织；保鲜膜包裹于-80 ℃冷冻15 min，将心脏平行切成2 mm厚切片；将心脏切片放入1%TTC溶液中，置于37 ℃水浴中避光染色15 min，将染色后的心脏切片于10%福尔马林溶液中固定24 h；滤纸吸干心脏切片表面福尔马林溶液，按顺序称重，计算心肌缺血范围和心肌梗死范围。

（3）血清酶的检测：3 h后腹主动脉缺血，分离血清。应用黄嘌呤氧化酶法测定总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、化学酶法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量；应用一步法测定NO含量和ELISA法测定ET-1含量；应用ELISA法检测心肌肌钙蛋白T（cTnT）含量、应用比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）活性。

2.       实验结果

2.1心电图变化结果

    造模后各给药组ST较模型组均有降低趋势，部分时间点ST降低（与模型组比较，p<0.05）有统计学差异，见表3-1

    造模后模型组心率(HR)较空白组明显降低，SF-1各组心率较模型组升高，部分时间点有统计学差异（p<0.05），见表3-2。

表3-1  SF-1 对心肌缺血损伤大鼠ST值的作用

表3-1  SF-1 对心肌缺血损伤大鼠ST值的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-2  SF-1 对心肌缺血损伤大鼠心率的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

2.2 左心室功能、平均动脉压变化测定结果

表3-3  SF-1 对心肌缺血大鼠左心室收缩压的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-4  SF-1 对心肌缺血大鼠左心室舒张末压的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-5  SF-1 对心肌缺血大鼠左心室发展压的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-6  SF-1 对心肌缺血大鼠左心室等容收缩期压力最大上升速率的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-7  SF-1 对心肌缺血大鼠左心室等容舒张期压力最大下降速率的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

表3-8  SF-1 对心肌缺血大鼠平均动脉压的作用（）

注：与模型比较，*为P<0.05，**为P<0.01

造模前各组数值无显著性差异，模型组左心室收缩压(LVSP)造模后较空白组降低（p<0.05），SF-1各剂量组左心室收缩压较模型组升高，高、中剂量部分时间点有统计学差异（p<0.05或0.01），见表3-3。

模型组左室舒张末压(LVEDP)值造模后较空白组降低（p<0.05），各给药组左室舒张末压(LVEDP)值均较模型组小，部分时间点有统计学差异（p<0.05或0.01），见表3-4。

造模后模型组左心室发展压较空白组显著降低（p<0.05或0.01），SF-1各剂量组左心室发展值均较模型组大，部分时间点有显著差异（p<0.05或0.01），SF-1高、中剂量优于低剂量组，见表3-5。

模型组左心室等容收缩期室内压最大上升速率(+dp/dt max)较空白组显著降低（p<0.05），各给药组较模型组均有升高趋势，部分时间点与模型组比较有统计学差异（p<0.05），见表3-6。

模型组左心室等容舒张期室内压最大下降速率(-dp/dt max)绝对值较空白组明显降低（p<0.05 ），SF-1各剂量组较模型组均有升高趋势，部分时间点与模型组比较差异显著（p<0.05），见表3-7。说明SF-1能改善造模后大鼠心脏舒缩功能。

造模后模型组平均动脉压均较空白组降低，有显著差异（p<0.05），各给药组均有升高趋势，部分时间点与模型组比较差异显著（p<0.05），见表3-8。

2.3心肌缺血及梗死面积测定结果

模型组心肌缺血范围与空白组比较具有极显著性差异（p<0.01），各给药组均能改善心肌缺血程度，有显著性差异（p<0.05）。模型组心肌梗死范围与空白组比较具有显著性差异（p<0.01），各给药组均有减少心肌梗死的趋势，但SF-1各组与模型组比较无显著差异，说明各给药组能减轻大鼠的心肌缺血程度，见表3-9。

 

表3-9  SF-1对心肌缺血损伤大鼠心肌缺血梗死范围的影响（）

注：与模型比较，* P<0.05，** P<0.01

2.4总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量测定结果

各给药组SOD活性较模型组有升高趋势，SF-1高剂量组无统计学差异，见表3-10。各给药组GSH-PX活性较模型组有升高趋势，但无统计学差异，见表3-10。各给药组MDA含量较模型组有降低趋势，且与模型组具有显著性差异（p<0.05），见表3-10。

表3-10  SF-1对心肌缺血损伤大鼠T-SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影响（）

注：与模型比较，* P<0.05，** P<0.01

2.5 一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）含量测定结果

各给药组血清NO含量较模型组显著升高，SF-1高剂量和硝酸甘油组与模型组有显著性差异（p<0.05）。各给药组血清ET-1含量较模型组均降低，SF-1高剂量和硝酸甘油组与模型组有显著性差异（p<0.05），见表3-11。

表3-11  SF-1对心肌缺血损伤大鼠NO、ET-1含量的影响（）

注：与模型比较，* P<0.05

2.6乳酸脱氢酶（LDH）活性测定结果

LDH活性较模型组有降低趋势，但SF-1高剂量和硝酸甘油组具有显著性差异（p<0.05），见表3-12。

表3-12  SF-1对心肌缺血损伤大鼠LDH活性的影响（）

注：与模型比较，* P<0.05，** P<0.01

2.7心肌肌钙蛋白T（cTnT）含量测定结果

各给药组cTnT含量均较模型组降低，SF-1高剂

量和硝酸甘油组与模型组有显著性差异，见表3-13。

表3-13  SF-1对心肌缺血损伤大鼠cTnT含量的影响（）

注：与模型比较，* P<0.05，** P<0.01

3.结论

 精制冠心方有效成分 SF-1能够降低ST段值，升高心率，提高SOD活性，减少MDA的生成，减少心肌酶LDH及心肌标记物肌钙蛋白T的释放，调节内皮血管活性物质的平衡，减少心肌缺血面积。