一种福建野生金线莲野外自然回归迁地种植技术

摘要

本发明公开了一种福建野生金线莲野外自然回归迁地种植技术，包括野外取材、材料消毒处理、不定芽诱导培养、一次性成苗培养、瓶苗移栽、林下种植、成品制备。本发明解决了金线莲种子微小，胚发育不完全，在自然条件下发芽难的问题；解决了现有技术中金线莲药源稀少，特别是植物内所含有的强镇痛、消炎、抗癌成分不能满足临床以及日常增强人体免疫力需要等问题。用一次性成苗方法培养并进行野外自然回归迁地种植金线莲成活率高，产量上提高1~2倍，植株内含物质充分、品相、品质优良。

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种福建野生金线莲野外自然回归迁地种植技术。

背景技术

金线莲(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl)是珍贵的草药之一，属于兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）植物，又称金线城、鸟人参，享有“药王”、“神药”等美称。金线莲为陆生兰，多年生草本，高4~18cm；根状茎匍匐伸长，淡红褐色，稍肉质，长4~9cm，具明显节，节上长有不定根；叶互生，宽卵形至卵状椭圆形，长1.5~3.5cm，宽1~3cm，叶脉网状，金黄色，叶下表面为淡紫红色，主要生长在海拔300~600米深山密林下或溪涧旁潮湿的草丛中或竹林下，特别是阔叶林下的荫湿地带，自然环境生长的金线莲一般呈稀疏、零星分布，很少成片密生，种质资源稀缺，为濒危保护植物。金线莲种子微小，胚发育不完全，在自然条件下发芽难。主要分布于亚洲的日本、中国、斯里兰卡、印度和尼泊尔等国，台湾和福建是我国主要的产地之一。

金线莲含糖类、牛磺酸、强心甙类、酯类、生物碱、甾体、多种氨基酸、微量元素及无机元素等。有研究表明，金线莲具有提高机体免疫力、抗衰老、降血糖等作用。其中，金线莲多糖是非常有前景的抗肿瘤药物或辅助抗肿瘤药物。金线莲的植物中萃取物质，可以成功抑制最难对付的乳癌(MCF-7)，加速并诱导乳癌细胞死亡，阻断癌细胞结构生成，这种萃取物也有抑菌效果，能杀死常见的感染细菌。金线莲在福建各地民问用药情况略有不同：闽西地区(宁北、清流、泰宁等县)民间多用于小儿高烧不退、惊风等；闽南地区多用于治疗肾炎、膀胱炎、糖尿病等；闽中地区多用于消炎镇痛，治疗胆结石、胆道炎等；闽东地区多用于祛风湿。通经络、养血、通痹，治疗风湿骨节病，腰膝痹痛等。

目前，金线莲产业化已经初具规模。主要分布在福建，广东等环境较为适合其生长的地区，年产值已经超过10亿元大关。但是金线莲产业化生产过程中，受到瓶内营养物质、生长激素含量、生长空间的限制，导致其植物体内一些营养物质的含量低于野生环境下的金线莲。多数企业在建立金线莲生产线时，种植主要以大棚种植为主，没有进行合理的林下种植，无成熟完整的规模生产体系，出产金线莲的质量参差不齐。因此构建一个金线莲产业化标准，建立一个成套的金线莲生产体系模式，开发利用“金线莲林下种植”技术，并加速其产业化对提高民生健康水平，促进中国特色的养生保健食品具有重要的现实意义。

发明内容

本发明目的一是提供一种应用一次性成苗培养技术，为林下迁地种植栽培金线莲促进产业发展提供关键技术。二是解决金线莲种子微小，胚发育不完全，在自然条件下发芽难的问题；解决现有技术中金线莲药源稀少，特别是植物内所含有的强镇痛、消炎、抗癌成分不能满足临床以及日常增强人体免疫力需要等问题。

本发明的方法是以如下方式实现的：

一种福建野生金线莲野外自然回归迁地种植技术，其特征是包括取材、材料消毒处理、不定芽诱导培养、一次性成苗培养、瓶苗移栽、林下种植、成品制备。具体步骤如下：

1）取材：野生金线莲植株茎段，采自福建永泰海拔300~600m山涧，采摘后用湿布包好带回；

2) 材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点1~2cm处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴0.5~1小时，再用双蒸水冲洗2~3次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1%升汞处理5~10min，再用无菌水冲3~4遍后置工作台备用；

3） 不定芽诱导培养：将消毒后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.2~0.4cm，然后将材料切成1~2cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的不定芽诱导培养基中，培养温度为23±2℃，光照时间10h/d，培养前10天进行黑黯培养，11天以后光照强度调整为500-1000lx, 芽诱导培养35~45天，得到丛生芽；

4） 一次性成苗培养：将经诱导培养得到丛生芽，高3~4cm，具3~4节间，1~2片叶的无根幼苗，切成1~2cm 长的茎段接种于经高温、高压灭菌的一次性成苗培养基中，茎段必须平铺置放，培养温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度为1500～2500lx，培养4~5个月获得生长完整并生根率达99%的可直接移植瓶苗植株；

5）瓶苗移栽：将经一次性成苗诱导培养4~5个月并同步生根且株高为6~10cm的金线莲瓶苗，放在自然光下炼苗3~5天，再打开瓶盖炼苗2~3天，然后从培养瓶中取出植株，洗去附着在根系上的培养基；

6）林下种植：选择海拔300~800米土质松散、透气、排水、保水性能好的山地，避免阳光直射，移栽前基质用45%多菌灵可湿性粉剂900倍溶液浇透消毒；种植时，每株行距5*5cm，栽培床高20~30cm，床面宽1~1.2m，密度500~1000株/m²；栽培期间，保持土壤湿润且温度12~15℃，施肥在金线莲生长季节每隔半个月使用农家液态肥或之气液，稀释至1000倍使用；在林下自然状态栽培6~8个月，株高10~15cm，生长出5~8片叶时即可采收，通过林下种植金线莲的成活率为99%；

7）成品制备：采收后的金线莲可以制成新鲜金线莲产品、金线莲的冻干产品、金线莲晒干或烘干产品三种。

其中，所述的步骤3）不定芽诱导培养基的配方为MS+BA 2mg·L^-1+NAA 1mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1 + N6-异戊稀基腺嘌呤1mg·L^-1 + 蔗糖30g·L^-1+活性炭 1g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.4~1.6cm。

所述的步骤4）一次性成苗培养基的配方为1/3MS+N6-异戊稀基腺嘌呤 0.5~1.5mg·L^-1 +NAA 1~2mg·L^-1+HyponexI 2~3g·L^-1+Hyponex2 2~3g·L^-1 +Peptone 1~3g·L^-1 +土豆100~150g·L^-1+蔗糖35g·L^-1+活性炭 1~2g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.4~1.6cm。

本发明具有以下显著优点：

1、应用一次性成苗技术组培金线莲，提高了金线莲移栽苗成活率和生根率。通过林下自然回归迁地种植，释放培养过程一些激素的含量，进一步提高金线莲的生长能力和有益物质的积累，种植后金线莲比瓶苗移栽期重量增加1~2倍。

2、本发明建立一次性成苗培养技术、移栽和模拟林下生长，自然回归迁地种植的全套生产技术体系，为整个金线莲产业的产业化、规模化、规范化培育体系的构成提供技术支持，同时在保质、保量的基础上，加快了投资资金回收进程，满足了市场需求，节约投资企业大量时间和资金。

3、节约土地资源，保护农民利益，在农业产业结构调整中，充分利用林地资源，发展适合林下生长的福建野生金线莲，这样农民既得利益不受损害，又不影响农业生产同时又创造了高附加值的农业产品，增加了农民收入，真实做到并达到了高新技术服务农业、服务农民的宗旨。

4、利用林地资源，提高经济效益。充分发挥山区林地资源丰富的优势，提高林地使用率，极大地提高森林的经济效益，为山区劳动力的合理安排提供了条件，同时对于回归和厚实当前山区的劳动力是最好的号召力。

   5、有利于森林生态保护，结合抚育、踢枝、追肥、促进林木生长。

6、林下进行人工栽培既能满足金线莲野生状态所需的生长环境，同时节约遮阳网的投入。因此，保护金线莲这一物种具有重要的科研、医学、生态意义和价值，将为人类医治疾病和健康起着重要作用。按照目前的种植情况进行计算以6个月为一个生产周期，滚动发展，一亩山地每年种植可以有两次收成，按（现行市场价格）林下种植的鲜品300元/kg，每亩收获鲜品500kg*2，每亩年产值60万人民币，所以福建金线莲林下种植前景广阔。

本发明立足福建山区林地资源优势，“实行林药间作，生态栽培”的原则，对金线莲采用林下回归迁地栽培，营造适合金线莲瓶苗的最佳生长环境，提高移植成活率，形成金线莲组培苗林下种植的规模化，建立福建金线莲的人工林下栽培体系，完善金线莲产业化推广体系这样既不占用农民可耕土地,又能保护生态环境, 经过多年、多点栽培试验，发展福建金线莲产业，必须进行林下开发，实施生态栽培，达到经济效益和生态效益双赢的效果。

附图说明

图1一次性成苗培养平铺放置的生长情况

图2一次性培养的移植苗

图3准备移植的大量瓶苗

图4是移植后瓶苗生长情况

图5林下种植生境

图6林下种植苗

图7林下种植6个月生长情况

图8烘干完成的金线莲

图9成品金线莲

具体实施方式

为了充分公开本发明的福建野生金线莲野外自然回归迁地种植技术，以下对本发明做进一步的说明，但本发明不限于此。

实施例1

1）取材：野生金线莲植株茎段，采自福建永泰海拔500m山涧，采摘后用湿布包好带回。

2) 材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点2cm处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴1小时，再用双蒸水冲洗3次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1%升汞处理8min，再用无菌水冲4遍后置工作台备用。

3） 不定芽诱导培养：将经消毒处理后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.2cm，然后将材料切成2cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的不定芽诱导培养基中。培养基的配方为MS +BA 2mg·L^-1 +NAA 1mg·L^-1 +KT 0.5mg·L^-1 + N6-异戊稀基腺嘌呤1mg·L^-1 + 蔗糖30g·L^-1+活性炭 1g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.5cm。

培养温度为23℃，光照时间10h/d，培养前10天进行黑黯培养，11天以后光照强度调整为800lx, 芽诱导培养40天，得到丛生芽。

4） 一次性成苗培养：将经芽诱导培养得到丛生芽，高3cm，具3节间，2片叶的无根幼苗，切成2cm 长的茎段接种于经高温、高压灭菌的一次性成苗培养基中，茎段必须平铺置放，见图1。培养基的配方为1/3MS +N6-异戊稀基腺嘌呤 1.0mg·L^-1 +NAA 1.5mg·L^-1 +HyponexI 2.5g·L^-1 +Hyponex2 2.5g·L^-1 +Peptone 2g·L^-1 +土豆120g·L^-1+蔗糖35g·L^-1+活性炭 1.5g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.5cm。

培养温度为23℃，光照时间12h/d，光照强度为2000lx，培养4.5个月获得生长完整并生根率达99%可直接移栽瓶苗植株，见图2、图3。

5）瓶苗移栽：将经一次性成苗诱导培养4.5个月并同步生根且株高为8cm的金线莲瓶苗，放在自然光下炼苗5天，再打开瓶盖炼苗2天，见图4。然后从培养瓶中取出植株，洗去附着在根系上的培养基。

6）林下种植：包括植地选择、植地清理、搭盖遮阴棚、基质消毒处理、林下栽植、移栽后管理、林下采收。

A）植地选择

选择海拔500米土质松散、透气、排水、保水性能好的山地，湿度应保持在70％-85％之间，避免阳光直射，透光率50%-60%，适生温度为15-28℃，金线莲宜在偏酸性土壤条件下生长。

B）植地清理

土地平整、松土除草、对周围的灌木以及一些树木枝叶进行间疏，砍除，同时做成平哇，哇埂宽30-60厘米，高20厘米，也可以根据山地的实际可以栽种位置整理和树行距灵活掌握。在自然条件下，上层乔木郁闭度65%-75%，下层植被覆盖度35-45%。

C）搭盖遮阴棚

搭盖遮阴棚，调节透光度，透光以三阳七阴为适合，4~5月气温升高，透光可降低到30%以下，种植地周围必须采用围篱笆、拉盖遮阳网来防止鼠、蛇、鸟、虫等野生动物危害的侵袭。

     林下种植生境见图5。

D）基质消毒处理

     移栽前基质用45%多菌灵可湿性粉剂900倍溶液浇透消毒，湿度保持在70％-85％之间，避免阳光直射，透光率50%-60%。

     E)林下栽植

栽培时间2月下旬-6月上旬，9月上旬-12月。生长最好的时间是9月-11月。经实践，在海拔500-800米的林下种植，在酷夏成活率为99%。

合理密植是金线莲高产的一项重要措施，地肥应该疏、地薄应该密，株行距5*5厘米。不宜种植太深，栽培床高25厘米，床面宽1.2米，密度800株/m^2,  大小分栽，便于管理和收成等级区分，栽种后压实小苗四周，种植后用山泉水浇一次透水，达到土壤完全湿润，施肥在金线莲生长季节每隔半个月使用农家液态肥或之气液，稀释至1000倍进行，施肥时切忌污染金线莲叶片，如有不慎污染，必须立即喷洒清水。林下种植情况见图6。

F） 移栽后管理

保持土壤温度13℃，气温20-25℃；栽培5天植株即可成活，通过林下种植金线莲的成活率为99%。但是应注意不能浇水过量，宁干勿湿。

G）病虫害防治

由于林下生态环境比较复杂，加上金线莲是鼠蛇鸟飞虫喜欢啃食的食物，所以栽种后必须用目的网围起来。蜗牛、红蜘蛛、蛞蝓为多，可以人工捕杀，茎枯病、猝倒病、立枯病等病害，要及时拔除或施有机农药。

    H）林下采收

采收适期的确定与栽培时间长短有密切关系，必须在林下自然状态栽培6个月以上株高10厘米以上，生长出6片叶时即可采收，见图7。这时金线莲内含物质充分金线莲植株健康、茎干粗壮，根系发达、气生根明显，叶片颜色深厚、绒布状明显，叶脉金线明晰，成活率达99%，每株重量达3.5-5.5克，采摘采用人工拔摘，提倡随拔随放，轻拔轻放。

    I）清洗

拨苗时按照大小分类放好，鲜植株进行逐株清理，去除植株表面泥土尤其是根部的土壤、杂质及部分附生生物，避免水流直接冲刷叶片，影响金线莲品相，经林下种植的金线莲在产量上比瓶苗移栽期的重量增加2倍。

7）成品制备：采收后的金线莲可以制成新鲜金线莲产品、金线莲的冻干产品、金线莲晒干或烘干产品三种，见图8，图9。

金线莲采后应用：新鲜金线莲直接入肴，药食同源，既是药物又是食物。将金线莲叶磨成粉入肴，主要是做一些汤羹的菜肴。选择新鲜的金线莲清洗干净置榨汁机进行鲜榨金线莲汁，加入上好的蜂蜜后直接饮用对于消热解暑、消炎、提高免疫有很好的效果。采用冻干（零下30°C）的低温保鲜技术，使金线莲保鲜更加持久。

 

实施例2

1）取材：野生金线莲植株茎段，采自福建永泰海拔300m山涧，采摘后用湿布包好带回；

2) 材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点1.5cm处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴1小时，再用双蒸水冲洗2次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1%升汞处理10min，再用无菌水冲4遍后置工作台备用；

3） 不定芽诱导培养：将消毒后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.3cm，然后将材料切成1.5cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的不定芽诱导培养基中（培养基配方同实施例1，培养基厚度1.4cm），培养温度为21℃，光照时间10h/d，培养前10天进行黑黯培养，11天以后光照强度调整为1000lx, 芽诱导培养35天，得到丛生芽；

4） 一次性成苗培养：将经诱导培养得到丛生芽，高4cm，具4节间， 2片叶的无根幼苗，切成1cm 长的茎段接种于经高温、高压灭菌的一次性成苗培养基中，培养基的配方为1/3MS+N6-异戊稀基腺嘌呤 1.5mg·L^-1 +NAA 2mg·L^-1+HyponexI 3g·L^-1+Hyponex2 3g·L^-1 +Peptone 3g·L^-1 +土豆150g·L^-1+蔗糖35g·L^-1+活性炭 2g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.4cm。茎段必须平铺置放，培养温度为21℃，光照时间12h/d，光照强度为1500lx，培养5个月获得生长完整并生根率达99%的可直接移植瓶苗植株；

5）瓶苗移栽：将经一次性成苗诱导培养5个月并同步生根且株高为10cm的金线莲瓶苗，放在自然光下炼苗4天，再打开瓶盖炼苗3天，然后从培养瓶中取出植株，洗去附着在根系上的培养基；

6）林下种植：包括植地选择、植地清理、搭盖遮阴棚、基质消毒处理、林下栽植、移栽后管理、林下采收。关键是要选择海拔300米土质松散、透气、排水、保水性能好的山地，避免阳光直射，移栽前基质用45%多菌灵可湿性粉剂900倍溶液浇透消毒；种植时，每株行距5*5cm，栽培床高30cm，床面宽1.2m，密度1000株/m²；栽培期间，保持土壤湿润且温度15℃，施肥在金线莲生长季节每隔半个月使用农家液态肥或之气液，稀释至1000倍使用；在林下自然状态栽培7个月以上株高12cm以上，生长出5片叶时即可采收。采收的金线莲每株重量达3.5~5.5克，通过林下种植金线莲的成活率为99%；

7）成品制备：采收后的金线莲可以制成新鲜金线莲产品、金线莲的冻干产品、金线莲晒干或烘干产品三种。

 

实施例3

1）取材：野生金线莲植株茎段，采自福建永泰海拔600m山涧，采摘后用湿布包好带回；

2) 材料消毒处理：将采集的野生金线莲用自来水冲洗干净，在距离芽点1cm处剪取茎段，去除多余的叶片，置饱和漂白粉上清液中漂洗15min并用软毛刷轻轻刷洗，冲洗干净后，置于流水中冲滴0.5小时，再用双蒸水冲洗3次，在超净工作台内用75%的酒精消毒30s，加入0.1%升汞处理5min，再用无菌水冲3遍后置工作台备用；

3） 不定芽诱导培养：将消毒后的材料放在灭过菌的培养皿上，用手术刀切掉与升汞接触的切口部分0.4cm，然后将材料切成1cm 长的茎段分别接种于经高温、高压灭菌的不定芽诱导培养基中（培养基配方同实施例1，培养基厚度1.6cm），培养温度为25℃，光照时间10h/d，培养前10天进行黑黯培养，11天以后光照强度调整为500lx, 芽诱导培养45天，得到丛生芽；

4） 一次性成苗培养：将经诱导培养得到丛生芽，高3.5cm，具3节间，1片叶的无根幼苗，切成1.5cm 长的茎段接种于经高温、高压灭菌的一次性成苗培养基中，培养基的配方为1/3MS+N6-异戊稀基腺嘌呤 0.5mg·L^-1 +NAA 1mg·L^-1+HyponexI 2g·L^-1+Hyponex2 2g·L^-1 +Peptone 1g·L^-1 +土豆100g·L^-1+蔗糖35g·L^-1+活性炭 1g·L^-1+琼脂 6.5g·L^-1，培养基厚度为1.6cm。茎段必须平铺置放，培养温度为25℃，光照时间12h/d，光照强度为2500lx，培养4个月获得生长完整并生根率达99%的可直接移植瓶苗植株；

5）瓶苗移栽：将经一次性成苗诱导培养4个月并同步生根且株高为6cm的金线莲瓶苗，放在自然光下炼苗3天，再打开瓶盖炼苗3天，然后从培养瓶中取出植株，洗去附着在根系上的培养基；

6）林下种植：包括植地选择、植地清理、搭盖遮阴棚、基质消毒处理、林下栽植、移栽后管理、林下采收。关键是要选择海拔800米土质松散、透气、排水、保水性能好的山地，避免阳光直射，移栽前基质用45%多菌灵可湿性粉剂900倍溶液浇透消毒；种植时，每株行距5*5cm，栽培床高20cm，床面宽1m，密度500株/m²；栽培期间，保持土壤湿润且温度12℃，施肥在金线莲生长季节每隔半个月使用农家液态肥或之气液，稀释至1000倍使用；在林下自然状态栽培8个月以上株高15cm以上，生长出8片叶时即可采收。采收的金线莲每株重量达3.5~5.5克，通过林下种植金线莲的成活率为99%；

7）成品制备：采收后的金线莲可以制成新鲜金线莲产品、金线莲的冻干产品、金线莲晒干或烘干产品三种。