菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品的制备方法

摘要

本发明公开了一种菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品的制备方法，选取菲牛蛭活体抗凝血剂含量最多的部位，通过碾磨打破组织细胞壁和超微粉碎动物组织纤维，增加了抗凝血活性成分的析出量，同时有效控制低温环境保证关键技术环节的操作，最终得到了了抗凝血剂活性含量非常高的粗品，按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，其抗凝血酶活性含量≥1200.0U。应用本发明获取的菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品，可制成胶囊、片剂等制剂，由于天然抗凝血物质含量大，可有效改善血液微循环、溶解血栓、降低尿酸、降低血液粘度、降低血脂等，对心脑血管疾病功效良好。

说明书

技术领域

本发明属于菲牛蛭提取技术领域，尤其涉及一种菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品的制备方法。

背景技术

医蛭科动物菲牛蛭已成功列入《广西壮族自治区壮药质量标准壮药典》第二卷（2011年版），为菲牛蛭作为药物合法利用提供了依据。广西壮药典里规定每1克菲牛蛭干燥品的抗凝血剂活性不低于220.0U；2010年版《中国药典》里规定水蛭1克干品的抗凝血剂活性不低于16.0U，蚂蟥、柳叶蚂蟥的干品抗凝血剂活性不低于3.0U。按药典标准生产所得到的药品，抗凝血剂活性含量偏低，患者服用剂量大，见效时间慢。通过改良药品的制备方法，得到含抗凝血剂浓度高的药品，进而制成胶囊、片剂、微丸剂型，可减少患者服用量，疗效更好。现有直接利用水蛭制作干品的方法中，基本都是整体入药，且大多数采用传统烘干或冷冻干燥后再粉碎的方式，实施过程中大多数环节均无温度控制，最后所得干品粉剂的抗凝血活性含量都偏低。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简单、操作方便、产品抗凝血剂活性高的菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品的制备方法，包括以下步骤：

<1>切取菲牛蛭头部，将其与氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24～36h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥，然后粉碎成细粉，即得高活性抗凝剂粗品。

菲牛蛭是生长时间超过一年的健康菲牛蛭活体。

菲牛蛭头部为菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺。

氯化钠溶液质量浓度为0.8～1.2%，菲牛蛭原料与氯化钠溶液重量比为1:4～8。

混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上。

冷冻干燥至物料水分≤15%。

高活性抗凝剂粗品中抗凝血酶活性含量≥1200.0U。

上述制备方法获得的菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品。

上述菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品在制备心脑血管疾病药物方面的应用。

针对目前药典法生产水蛭类药品抗凝血剂活性含量偏低的问题，发明人选取菲牛蛭活体抗凝血剂含量最多的部位，通过碾磨打破组织细胞壁和超微粉碎动物组织纤维，增加了抗凝血活性成分的析出量，同时有效控制低温环境保证关键技术环节的操作，最终得到了了抗凝血剂活性含量非常高的粗品，按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，其抗凝血酶活性含量≥1200.0U。应用本发明获取的菲牛蛭中高活性抗凝剂粗品，可制成胶囊、片剂等制剂，由于天然抗凝血物质含量大，可有效改善血液微循环、溶解血栓、降低尿酸、降低血液粘度、降低血脂等，对心脑血管疾病功效良好。

具体实施方式

实施例1

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:4将其与质量浓度0.8%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分10%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品1.4kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1250.0U、12770.0U、1285.0U，平均值为1270.7U，均大于1200.0U。

实施例2

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:4将其与质量浓度1.0%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分12%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品1.2kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1247.0U、1229.0U、1254.0U，平均值为1243.3，均大于1200.0U。

实施例3

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:6将其与质量浓度0.8%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分11%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品2.0kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1321.0U、1289.0U、1309.0U，平均值为1306.3，均大于1200.0U。

实施例4

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:8将其与质量浓度0.8%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分14%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品2.3kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1216.0U、1225.0U、1232.0U，平均值为1224.3，均大于1200.0U。

实施例5

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:4将其与质量浓度1.2%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置24h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分10%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品1.0kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1210.0U、1218.0U、1223.0U，平均值为1217.0U，均大于1200.0U。

实施例6

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:8将其与质量浓度1.2%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置36h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分14%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品1.6kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1233.0U、1215.0U、1224.0U，平均值为1224.0U，均大于1200.0U。

实施例7

<1>取l龄以上的健康菲牛蛭20kg，机械或手工切取菲牛蛭头部（菲牛蛭躯干前面1/3的部位并且包含菲牛蛭的唾液腺），得6kg原料，按重量比1:6将其与质量浓度1.2%的氯化钠溶液混合，将混合物置于4～6℃的冷室中静置，使混合物温度达到在4～6℃；

<2>用带有冷却装置的胶体磨机反复碾磨步骤<1>中的混合物并控制温度在4～6℃（同一批次整个过程最高温度不超过10℃），混合物在胶体磨机中反复碾磨每次停留时间不超过30s，转速在2800n/min以上，使混合物中菲牛蛭原料成2～50μm的浆状物，然后将磨好的浆状物在4～6℃的冷室中放置30h；

<3>步骤<2>中的浆状物冷冻干燥（物料水分11%），然后粉碎成细粉（粉碎时物料在粉碎机内停留时间不超过10s），即得高活性抗凝剂粗品1.5kg。

本例所得抗凝剂粗品为褐色的细粉状物，流动性好，有淡腥味。按《中国药典》（2010年版一部）中“水蛭”项下的凝血酶滴定法测定，三次测定的值为1231.0U、1218.0U、1246.0U，平均值为1231.7U，均大于1200.0。