公开/公告号CN103285391A
专利类型发明专利
公开/公告日2013-09-11
原文格式PDF
申请/专利权人 武汉生物制品研究所有限责任公司;
申请/专利号CN201310201134.5
申请日2013-05-27
分类号A61K39/295(20060101);A61K39/145(20060101);A61P31/16(20060101);
代理机构42104 武汉开元知识产权代理有限公司;
代理人樊戎;徐绍新
地址 430060 湖北省武汉市武昌区临江大道9号
入库时间 2024-02-19 19:33:17
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2015-02-25
授权
授权
2013-10-16
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K39/295 申请日:20130527
实质审查的生效
2013-09-11
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种人用季节性流感与大流行流感联合疫苗及其制备方法 。
背景技术
长期以来，流感的发病率一直以来居高不下，据世界卫生组织（WHO） 发布的公告，全球每年流感病例为6亿~12亿，死亡50~100万人，给人 类健康带来了严重的危害。自1878年Perroncito首次报道了意大利的 鸡感染禽流感病毒至今，禽流感由禽传播给人的病例在世界性范围内 时有发生。1997年在中国香港发现H5N1禽流感病毒首次突破种间障碍 感染人，并致人死亡以来，疫情有日益严重的趋势，WHO发布的报告显 示，2003年1月2日至2009年2月2日，全世界共有15个国家出现404人感 染H5N1型禽流感病例，254人死亡，死亡率高达62.9%；其中中国报道 38例病例，25人死亡。可见人类感染H5N1型流感病毒而造成的严重疾 病和病死率远比其它流感病毒严重。目前全球主要发达国家均已开始 了H5N1疫苗的临床研究。美国在2007年批准了巴斯德公司的H5N1疫苗 的上市。我国北京科兴公司生产的H5N1禽流感疫苗也于2008年6月获s FDA批准，并作为2008年北京奥运会的期间的应急储备疫苗。
虽然禽流感感染人类后有较高的致死率，并且流感病毒存在较高的变 异性，并有在人体内重组导致在人类爆发流行的可能性，但到目前为 止尚未发现禽流感病毒有在人与人之间传播的迹象，感染者也均为与 禽类有密切接触者。基于这一原因，世界各国均不愿意在大范围人群 中进行禽流感疫苗的免疫接种，而仅将该疫苗作为一类应急储备疫苗 使用。而各疫苗制造商也缺乏禽流感疫苗开发和研究的兴趣和积极性 。这一局面可能造成的结果将是禽流感病毒在人际之间传播的风险进 一步增加。一旦H5N1型禽流感病毒获得人际间传播的能力，在1~2个月 内即可传遍全球，若这种情况发 生，在短时间内各疫苗厂家生产出能满足全世界需求的禽流感疫苗几 乎是不可能。而如果我们在每年的季节性流感疫苗株中加入H5N1型禽 流感毒株生产季节性流感与大流行流感联合疫苗，成本仅仅在原有季 节性流感疫苗的基础上提高了三分之一左右，因而更易被消费者所接 受，并且很好的解决了目前禽流感疫苗难以大规模接种的难题。从而 在预防季节性流感流行的同时有效的预防和控制H5N1型流感爆发性流 行的可能，将目前对禽流感被动预防的策略，转为积极预防的局面， 很好地防范禽流感在人际间传播。
发明内容
本发明的目的是提供一种人用季节性流感与大流行流感联合疫苗，该 疫苗在用于人季节性流感预防的同时，也可预防H5N1人禽流感。
本疫苗为一种联合疫苗，该疫苗包括H1N1型人流感疫苗, H3N2型人流 感疫苗, B型人流感疫苗，和可能引起大流行的H5N1的人禽流感疫苗 。各疫苗的有效成分为各血清型血凝素抗原，以μg/ml计算血凝素含 量：H1N1型人流感疫苗为10~60μg/ml, H3N2型人流感疫苗为10~60μ g/ml, B型人流感疫苗为10~60μg/ml H5N1的人禽流感疫苗为10~60 μg/ml。
作为优选的方案，各血清型疫苗组分血凝素浓度分别为：H1N1型人流 感疫苗30μg/ml，H3N2型人流感疫苗30μg/ml，B型人流感疫苗30μg /ml，H5N1型的人禽流感疫苗30μg/ml。
本疫苗的辅助成分仅包括溶剂缓冲液：PH 7.2~7.4，0.01M的磷酸盐 生理氯化钠缓冲液（PBS），不含任何防腐剂。在传统流感疫苗的生产 过程中，通常在疫苗原液中加入适量防腐剂提高疫苗的稳定性。防腐 剂的加入虽然解决了疫苗稳定性的问题，但另一方面却给接种者带来 了一定的危害。特别是硫柳汞的加入，其有较高的神经毒性，可引起 儿童汞的储积和中毒。而本疫苗不含防腐剂，其稳定性同样可以达到 规定要求。
本疫苗中，不同血清型流感疫苗毒株均为世界卫生组织(WHO)推荐毒株 ，购于英国国家生物制品检定所（NIBSC）。H5N1型人禽流感疫苗毒种 为NIBRG-14(H5N1)；H1N1型人流感疫苗毒种为NYMC X-179A(H1N1)； H3N2型人流感疫苗毒种为NIB-79(H3N2)；B型人流感疫苗毒种为NYMC BX-49(B)。
所述人用季节性流感与大流行流感联合疫苗中，还可以含有氢氧化铝 或磷酸铝佐剂。
本疫苗采用以下方法制备：
1）用人H1N1型毒株，人H3N2型毒株，人B型毒株，H5N1型人禽流感毒 株分别制备H1N1型人流感疫苗、H3N2型人流感疫苗、B型人流感疫苗和 H5N1型人禽流感疫苗各单价疫苗原液。
2）将各单价疫苗原液按比例混合，以0.01M，pH7.2~7.4的磷酸盐缓冲 生理氯化钠溶液为溶剂，将H1N1型单价疫苗原液血凝素含量稀释至10 ~60μg/ml；H3N2型单价疫苗原液血凝素含量稀释至10~60μg/ml；B型 单价疫苗原液血凝素含量稀释至10~60μg/ml；H5N1型单价疫苗原液血 凝素含量稀释至10~60μg/ml，微滤。
步骤1）中所述的单价疫苗原液优选的制备方法是：各毒株经稀释后接 种鸡胚尿囊腔，33℃培养48~72小时；筛选去除死胚后，将活胚置于2 ~8℃下20~24小时，收集鸡胚尿囊液，加入终浓度为100μg/ml的甲醛 ，2~8℃下病毒灭活144小时；灭活后的尿囊液经澄清过滤、超滤浓缩 、凝胶过滤后得到纯化的病毒原液，纯化的病毒原液加入终浓度为10 mg/ml 的Triton X-100，作为病毒裂解剂，2~8℃下病毒裂解2小时 ，得到病毒裂解物；病毒裂解物经超速离心纯化、超滤去裂解剂后， 微滤得到单价疫苗原液。
本发明的有益效果是：本发明的联合疫苗各血清型之间无免疫抑制或 增强效果，本联合疫苗与对照苗具有相同的抗原谱，试验结果表明， 本发明高剂量和低剂量组均未诱发豚鼠的被动过敏反应和全身主动过 敏反应，对人体无局部刺激性，说明本发明安全性较高。本发明解决 了目前禽流感疫苗难以大规模接种的难题，在预防季节性流感流行的 同时有效的预防和控制了H5N1型流感的爆发性流行，产生了较大的社 会和经济效益。本发明还具有方法简单，生产成本低等特点。
附图说明
图1：免疫后不同组别小鼠H1N1型血凝抑制抗体变化趋势图
图2：免疫后不同组别小鼠H3N2型血凝抑制抗体变化趋势图
图3：免疫后不同组别小鼠B型血凝抑制抗体变化趋势图
图4：免疫后不同组别小鼠H5N1型血凝抑制抗体变化趋势图
图5：被动皮肤过敏试验阳性对照图
图6：被动皮肤过敏试验阴性对照图
图7：联合疫苗低剂量组被动皮肤过敏试验结果
图8：联合疫苗高剂量组被动皮肤过敏试验结果
图9：联合疫苗2ml/只剂量肌肉注射后21天豚鼠注射部位组织
图10：正常豚鼠腿部肌肉组织
图11：联合疫苗SDS-PAGE电泳，并进行银染后结果。
具体实施方式
下面结合具体实例进一步阐述本发明。这些实例仅用于说明本发明， 而不是限制本发明的范围。下列实例中未注明具体条件的实验方法， 通常按照常规条件进行，例如《中国药典》2010版三部中所述的条件 ，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1 联合疫苗的制备
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、实验动物等应符合《中 国药典》2010版三部中“凡例”的有关要求。
2.1 生产用鸡胚
毒种传代和制备用鸡胚来源于SPF鸡群；疫苗生产用鸡胚应来源于封闭 式房舍饲养的健康鸡群，并选用9~10日龄无畸形、血管清晰、活动的 鸡胚。
2.2 毒种
2.2.1名称和来源
季节性流感毒株为WHO推荐并提供的季节性流行的甲型和乙型流行性感 冒病毒株；禽流感毒株为世界卫生组织（WHO）推荐并提供的NIBRG-1 4（A/Vietnam/1194/2004 (H5N1)）病毒株。
2.2.2种子批的建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。以世界卫生组 织 （WHO）推荐的病毒株为原始种子批，从原始种子批传一代和扩增后保 存为主种子批，从主种子批再传一代和扩增后保存为工作种子批，工 作种子批用于疫苗生产。
2.2.3种子批毒种的检定
主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1~2.2. 3.4项检定。
2.2.3.1 鉴别试验
应用相应（亚）型流感病毒特异性免疫血清单向免疫扩散试验（方法 见3.1.3项），结果应证明其抗原性与推荐的病毒株相一致。
2.2.3.2 病毒滴度
应用鸡胚半数感染剂量法（EID50）检查，病毒滴度应不低于6.5LgEI D50/ml。
2.2.3.3血凝滴度
采用血凝法检测，血凝效价应不低于1：160。
2.2.3.4 无菌检查
依照现行《中华人民共和国药典》三部无菌检查方法，应符合规定。
2.2.3.5支原体检查
依照现行《中华人民共和国药典》三部支原体检查方法，应符合规定 。
2.2.3.6 外源性禽白血病病毒检测
用抗流感病毒血清中和毒种后，接种SPF鸡胚细胞，经培养，用酶联免 疫法检测培养物，结果应为阴性。
2.2.3.7外源性禽腺病毒检测
用抗流感病毒血清中和毒种后，接种SPF鸡胚肝细胞，经培养，分别用 适宜的血清学方法检测其培养物中的Ⅰ型和Ⅲ型禽腺病毒，结果均应 阴性。
2.2.4毒种保存
毒种应于-60℃以下保存。
2.3 单价原液
2.3.1病毒接种和培养
于鸡胚尿囊腔接种经适当稀释的工作种子批毒种，置33~35℃培养48~ 72小时。一次未使用完的工作种子批毒种，不得再回冻继续使用。
2.3.2病毒液收获
筛选活鸡胚，置2~8℃冷胚24小时后，收获尿囊液于容器内，每个容器 内应进行相应检测。
2.3.3尿囊收获液检定
2.3.3.1 微生物限度检查
按细菌、霉菌及酵母菌计数法检测，菌数应小于105CFU/ml，沙门菌检 测应为阴性（依照《中华人民共和国药典》2010版三部附录Ⅻ G进行 ）。
2.3.3.2 血凝滴度
按2.2.3.3项进行，血凝滴度应不低于1：256。
2.3.4尿囊收获液合并
每个收获容器检定合格的病毒尿囊液可合并为病毒合并液。
2.3.5病毒灭活
病毒合并液的中加入终浓度为100μg/ml的甲醛溶液，置2~8℃下进行 病毒灭活，灭活144±2小时后取样进行病毒灭活验证试验。病毒灭活 后进行细菌内毒素含量测定，内毒素含量应不高于10EU/ml。（依照《 中华人民共和国药典》2010版三部附录Ⅻ E 凝胶限度试验进行）
2.3.6浓缩及纯化
2.3.6.1 浓缩
采用0.80+0.65μm、0.45+0.22μm的柱式滤芯过滤法将单价病毒合并 液进行澄清过滤后，然后采用300KD超滤膜包超滤法将病毒液浓缩60－ 80倍。浓缩后的病毒液应取样进行细菌内毒素超滤浓缩后病毒液取样 进行细菌内毒素含量测定，内毒素含量应不高于80EU/ml。
2.3.6.2 纯化
超滤浓缩后的病毒合并液采用Sephrose4FF凝胶层析柱纯化，以0.01M , pH值为7.2~7.4磷酸盐缓冲液洗脱，流速7－8mm/min, 以260nm/2 80nm波长紫外检测器监测流出液的吸光度变化，收集目标峰,即为纯化 后的病毒原液。 纯化后病毒液取样进行细菌内毒素含量测定和微生物限度检查。细菌 内毒素含量应小于20 EU/ml，微生物限度检查细菌数应小于10CFU/m l。
2.3.7病毒裂解
将纯化后的单价病毒合并液中加入终浓度为10mg/ml Triton X-100 ，2－8℃ 2小时搅拌，裂解。
2.3.8裂解后纯化
采用蔗糖密度梯度离心法进行病毒裂解后的再纯化，病毒裂解液在0－ 50％的蔗糖梯度中，3小时，30000rpm离心，收集蔗糖浓度在2%－30% 液段，采用100KD超滤法进行洗滤去除蔗糖和裂解剂，洗滤液为0.01M ，pH7.2－7.4的磷酸盐缓冲生理氯化钠溶液，洗滤体积为离心后裂解 物体积的15－20倍。超滤后的病毒液取样进行细菌内毒素含量测定和 微生物限度检查，微生物限度检查菌数应小于10CFU/ml。
2.3.9 除菌过滤
纯化后的病毒裂解液经0.22μm除菌过滤后即为单价原液。
2.3.10 单价原液检定
按3.1项进行。
2.3.11保存
于2~8℃保存。
2.4 联合疫苗半成品
2.4.1配制
根据各单价原液血凝素含量，用0.01M，pH7.2的磷酸盐缓冲生理氯化 钠溶液进行配制，使各血清型血凝素最终含量应在30μg/ml，即为半 成品。
2.4.2半成品检定
按3.2项进行。
2.5 成品
2.5.1分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.5.2分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.5.3规格
每瓶0.5ml。每1次人用剂量为0.5ml，含病毒株血凝素应不低于15μg 。
2.5.4包装
3 检定
3.1 病毒原液的检定
3.1.1鉴别试验
用相应（亚）型流感病毒特异性免疫血清进行血凝抑制试验或单向免 疫扩散试验，结果应证明抗原性与推荐病毒株一致。
3.1.2病毒灭活验证试验
将病毒原液原倍及10-1、10-2稀释度的病毒液分别接种鸡胚尿囊腔， 每稀释度接种10枚9~10日龄鸡胚，每胚接种0.2ml，置33~35℃培养72 小时。24小时内死亡的不计数，每组鸡胚须至少存活80%。自存活的鸡 胚中每胚取0.5ml尿囊液，按组混合后，再盲传一代，每稀释度各接种 10个胚，每胚尿囊腔接种0.2ml，经33~35℃培育72小时后，取尿囊液 进行血凝试验，结果应不出现血凝反应。
3.1.3血凝素含量
采用单向免疫扩散试验检测血凝素含量。
将抗原参考品和原液分别加入到含有标准参考品抗体的1.5%琼脂糖凝 胶板上，孔径为3mm，每孔10μl，于20~25℃放置至少18个小时。用P BS浸泡1小时后，干燥、染色、脱色。准确测量抗原参考品和原液形成 的沉淀环的直径，以抗原参考品形成的沉淀环的直径对其相应抗原浓 度进行直线回归，求出直线回归方程，代入原液的沉淀环直径，即可 得到原液的血凝素含量，应不低于120μg/ml。
3.1.4无菌检查
依照现行《中华人民共和国药典》三部无菌检查方法，应符合规定。
3.1.5蛋白质含量
依照现行《中华人民共和国药典》三部（附录Ⅵ B第二法）进行，应 不高于血凝素含量的4倍。
3.2 半成品检定
3.2.1血凝素含量
按3.1.3项进行，各型别流感病毒株血凝素含量应为配制量的80％~12 0％。
3.2.2裂解剂残留量
裂解剂Triton X-100残留量应小于300μg/ml。
3.2.3无菌检查
依法检查（《中国药典》三部附录XII A），应符合规定。
3.3 成品检定
3.3.1鉴别试验
用相应（亚）型流感病毒特异性免疫血清进行单向免疫扩散试验，结 果应证明抗原性与推荐病毒株相一致。
3.3.2外观
应为微乳白色液体，无异物。
3.3.3装量
依照现行《中华人民共和国药典》三部装量项进行，应不低于标示量 。
3.3.4 pH值
应为6.8~8.0。
3.3.5游离甲醛含量
依照现行《中华人民共和国药典》三部（附录Ⅶ L）进行应不高于2 5μg/ml。
3.3.6总蛋白质含量
应不高于400μg/ml；并不得超过疫苗中血凝素总含量的4倍。
3.3.7血凝素含量
按3.1.3项进行，各型别流感病毒株血凝素含量应为配制量的80%~120 %。
3.3.8卵清蛋白含量
采用酶联免疫法检测，卵清蛋白含量应不高于200ng/ml。
3.3.9无菌检查
依照现行《中华人民共和国药典》三部无菌检查法检查，应符合规定 。
3.3.10异常毒性检查
依照《中华人民共和国药典》三部异常毒性检查法检查，应符合规定 。
3.3.11细菌内毒素含量
依照现行《中华人民共和国药典》三部（附录Ⅶ E凝胶限度试验）进 行，应小于20EU/ml。
按以上方法，连续生产3批本联合疫苗，成品检定结果见下表1~3。
表1 流感病毒联合疫苗20110901批检定结果
表2 流感病毒联合疫苗20110902批检定结果
表3 流感病毒裂解疫苗20110903批检定结果
实施例2 疫苗的免疫原性
用实施例1所获得的联合疫苗和单价原液为抗原，采用SPF级BABL/c小 鼠为动物模型，根据免疫后小鼠血清中不同血清型HA血凝抑制抗体滴 度变 化判定疫苗的免疫原性。将联合疫苗或单价疫苗原液梯度稀释后免疫 小鼠，实验分组为联合疫苗0.3μg、0.15μg、0.075μg；联合疫苗加 铝佐剂0.3μg、0.15μg、0.075μg；H1N1、H3N2、B、H5N1型单价原 液0.3μg、 0.15μg、 0.075μg ；H1N1、H3N2、B、H5N1型单价 原液加铝佐剂0.3μg、 0.15μg、 0.075μg；PBS对照组。每组10 只5周龄BALB/c小鼠，皮下注射，0.1ml/只，初次免疫后21天加强免疫 一次，于初次免疫后第0天、7天、14天、21天、28天、35天、42天眼 眶采血，分离血清，检测血清中HA血凝抑制抗体水平变化。不同组别 ，不同时间点小鼠血清中血凝抑制抗体的水平见表4~7，血清中血凝抑 制抗体变化趋势见图1~4。将血凝抑制抗体效价的对数值进行t检验分 析，结果表明：
四价联合疫苗各血清型与单价原液HI滴度无显著性差别(P＞0.05)，表 明多血清型抗原制备成联合疫苗后，各血清型之间无免疫抑制或增强 效果。
各个血清型抗原加入铝佐剂和不加铝佐剂比较无显著性差别(P＞0.05 )表明联合疫苗在试验剂量组别铝佐剂无显著免疫增强作用。
联合疫苗在0.3μg和0.15μg剂量组别HI滴度在第三或第四周时均能达 到1：40以上。
表4-1 四价H1N1血清型血凝抑制效价
表4-2 单价H1N1血清型血凝抑制效价
表5-1 四价H3N2血清型血凝抑制效价
表5-2 单价H3N2血清型血凝抑制效价
表6-1 四价B血清型血凝抑制效价
表6-2 单价B血清型血凝抑制效价
表7-1 四价H5N1血清型血凝抑制效价
表7-2 单价H5N1血清型血凝抑制效价
实施例3 疫苗的安全性
本联合疫苗根据《药品注册管理办法》附件3生物制品注册分类及申报 资料要求的相关条款，参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究 技术指导原则》的条款，进行了联合疫苗的被动皮肤过敏试验（PCA） 和全身主动过敏试验（ASA）来考察动物过敏试验。
1．被动皮肤过敏试验（PCA）
本试验根据抗原的性质，选用300~400g豚鼠作为实验动物,并设立阴性 、阳性对照组和受试物不同剂量组，皮下免疫。联合疫苗高剂量组： 15μg血凝素抗原/只，联合疫苗低剂量组：3μg血凝素抗原/只，阳性 对照：牛血清白蛋白5mg/只，PBS作为阴性对照。隔日一次每组以同等 剂量免疫，共4次。末次致敏后11天心脏采血，2000转/分离心10分钟 ，分离血清，-20℃保存，2周内备用。上述各组抗血清用生理盐水稀 释成1：2、1：4、1：8、1：16、 1：32。在300~400g豚鼠背部预先 脱毛3×4cm2的皮内注射各对应组的抗血清0.1ml，进行被动致敏，每 组6只豚鼠。被动致敏24后，各组静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原 ，并在抗原中加入等量的0.5-1%伊文思兰染料，共1ml，进行激发。3 0分钟后麻醉处死各组动物，剪取背部皮肤，测量皮肤内层的斑点大小 ，直径大于5mm者判定为阳性。不规则斑点的直径为长径与短径之和的 一半。实验结果见表8和图5~8，结果表明联合疫苗高剂量和低剂量组 均未诱发豚鼠的被动过敏反应。
表8 被动皮肤过敏试验结果（PCA）
2、全身主动过敏试验（ASA）
选用体重为300-400克的豚鼠作为实验动物, 并设立阴性、阳性对照 组和受试物不同剂量组，皮下免疫。采用高剂量组：15μg血凝素抗原 /只，低剂量组：3μg血凝素抗原/只，阳性对照：牛血清白蛋白5mg/ 只，PBS作为阴性对照。隔日一次每组以同等剂量免疫，共4次，使豚 鼠致敏。末次注射后第10日一次性静脉注射5倍于致敏剂量的抗原量， 高剂量组：75μg血凝素抗原/只，低剂量组：15μg血凝素抗原/只， 阳性对照：牛血清白蛋白25mg/只，PBS作为阴性对照，给药量0.5~1m l，激发过敏反应。静脉注射后0~30分钟，按表9~10症状详细观察每只 动物的反应，判断过敏反应发生程度，计算过敏反应发生率，症状的 出现及消失时间，若发现有过敏反应症状时，可取健康未致敏豚鼠2只 ，自静脉注射激发剂量的受试物，观察有无由于受试物作用引起的类 似过敏反应症状，以供结果判断时参考。
实验结果见表11，结果表明，联合疫苗高剂量和低剂量组均未诱发豚 鼠的全身主动过敏反应。
表9 过敏反应症状
表10全身致敏性评价标准
表11 全身主动过敏试验（ASA）实验结果
三、最大耐受剂量、局部刺激性
参考《预防用生物制品临床前安全性评价技术审评一般原则》要求， 选取400g的豚鼠，腿部肌肉各注射2ml/只、1ml/只、0.5ml/只，观察 21天，并设立PH7.2的0.02M PBS腿部肌肉注射2ml/只为对照组。观察 动物是否产生明显的毒性反应，并参照《化学药物刺激性、过敏性和 溶血性研究技术指导原则》重点观察疫苗的局部刺激性，21天后，取 豚鼠注射部位肌肉组织进行组织病理学检查。
实验结果见表12和图9~10。结果显示，在设定的浓度梯度内，豚鼠注 射部位肌肉组织病理学检查表明注射部位无炎症反应和组织病变。根 据人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值（附件），计算约相当 于为670~1300个人用剂量。本制品人用剂量拟订为15μg（30μg/ml） ，远低于以上剂量，说明本联合疫苗对人体应无局部刺激性。
表12 局部刺激性
实施例4 疫苗的抗原谱
将本联合疫苗与市售的三价流感裂解疫苗进行抗原谱比较。将两种疫 苗分别进行去糖基化和还原剂处理，然后进行SDS-PAGE电泳，并进行 银染，实验结果表明：本联合疫苗与对照苗具有相同的抗原谱。实验 结果表明：本研究试制的流感裂解疫苗抗原组分含有HA、NA以及部分 的NP蛋白和M蛋白，与目前市场上销售的对照苗具有相同的抗原谱（见 图11）。
机译： 季节性和大流行性流感联合疫苗
机译： 季节性和大流行性流感联合疫苗
机译： 季节性和大流行性流感联合疫苗
