含氮杂环衍生物,其制备方法及其在制备组蛋白去乙酰化酶Ⅰ抑制剂中的应用

摘要

本发明公开了一种结构如式I所示的含氮杂环衍生物或者其药用盐，其制备方法及其应用。R选自式Ia所示含氮杂环基团时，M选自双键、-(CH2)m-或-C(O)NH(CH2)2-,m选自4-8的正整数；R选自式Ib所示含氮杂环基团时，M选自-(CH2)4-；Ar选自苯环、萘环、或含1个或两个取代基的苯环,n选自0或1；X、Y、Y’、Z选自碳或氮且X和Y不能同时选自氮；L选自氢、烷基或芳基。本发明的含氮杂环衍生物或者其药用盐可用于治疗由于组蛋白去乙酰化酶I活性异常而导致的一系列疾病，具有广阔的应用前景。其制备方法简易、快速有效，原料价廉易得，适应于工业化生产。

说明书

技术领域：

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种含氮杂环衍生物及其制备方法和在制备组蛋白 去乙酰化酶Ⅰ抑制剂中的应用，以及含有该含氮杂环衍生物的药物组合物。

背景技术：

真核基因的表达异常在许多疾病的发病机制中有着重要的作用，其表达受遗传调控和表 观遗传调控双重调控。遗传调控包括基因转录、转录后加工、翻译以及翻译后修饰等环节； 表观遗传调控是指转录前基因在染色质水平上的结构调整，它是真核生物一种独特的调控机 制。表观遗传调控主要包括DNA甲基化、RNA干涉、组蛋白修饰三方面，可以在不改变D NA编码序列的前提下使基因发生可遗传的沉默。由组蛋白修饰所引起的染色体局部构象的 改变，在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用。组蛋白的翻译后修饰，包括对组蛋白 尾部的赖氨酸和精氨酸残基的乙酰化、甲基化、磷酸化、以及泛素化等，这些修饰构成了组 蛋白密码。组蛋白密码作为一种DNA序列之外的基因信息的储存和补充机制，大大扩展了 基因编码的信息量。其中，组蛋白的乙酰化修饰较为普遍，也是近年来研究最为深入的组蛋 白密码。

含4种组蛋白的组蛋白核心围绕DNA双链组成染色质的基本重复单位核小体，这个组 蛋白核心包含一个H3-H4四聚体和两个H2A-H2B二聚体，组蛋白H1附着在核小体间的连 接部分，并通过它富含正电核的氨基末端和DNA链上的负电荷作用以保持染色质结构的稳 定性。组蛋白在H3和H4上的乙酰化修饰较H2A和H2B更为普遍，比较重要的乙酰化位点 是H3上的Lys9和Lys14、以及H4上的Lys5、Lys8、Lys12、Lys16。一般认为，基因的转录 活性和染色体的局部构象密切相关。组蛋白的乙酰化/去乙酰化可以改变染色体的局部构象， 影响DNA与转录调控的非核小体复合物之间的相互作用，进而调控特定基因的表达。组蛋 白的乙酰化水平是由组蛋白乙酰化酶（Histone acetylases,HATs）和组蛋白去乙酰化酶（Hist one deacetylases,HDACs)共同调控的。HATs能催化乙酰辅酶A上的乙酰基转移到组蛋白的 N-端赖氨酸残基，中和正电荷，使DNA与组蛋白之间的相互作用减弱，染色体呈具转录活 性的松散结构，有利于转录因子与DNA结合，转录激活。反之，HDACs的去乙酰化作用造 成转录抑制。

近年的研究表明，抑制HDACs有望用于治疗多种疾病，如：白血病，肿瘤，炎症和神 经退行性疾病。而其对肿瘤的有效作用最为引人关注。HDACs抑制剂可以抑制白血病或实体 肿瘤细胞增殖，并诱导肿瘤细胞分化。HDAC抑制剂一般可使肿瘤细胞停滞于G1期，但有 时也会观察到G2期细胞增多。几乎所有HDACs抑制剂都会激活周期蛋白依赖激酶抑制因子 P21CIPI/WAF1（由CHKN1A基因编码）的转录，P21CIPI/WAF1可以与cyclin E-CDK2及c yclin A-CDK2复合物结合，使其失活；另外，很多HDACs抑制剂还能下调细胞内cyclin A 和cyclin D的水平，阻止肿瘤抑制蛋白视网膜母细胞瘤蛋白Rb磷酸化，细胞不能进入S期， 细胞周期无法进行。CDKN1A对于HDACs抑制剂介导的G1期抑制起关键作用，如果细胞 缺失CDKN1A基因，刚细胞进入S期，DNA复制，可以检测到细胞内的DNA为4n，细胞 易于发生凋亡。HDAC抑制剂对于P21CIPI/WAF1的激活作用是不依赖于p53的，这点尤为 重要，因为肿瘤细胞普遍存在于P53功能异常而导致的增殖失控。

HDACs抑制剂还能使人正常纤维原细胞及某些肿瘤细胞产生一个G2期调控点，因此， 正常细胞可以以一种安全的方式退出细胞周期，这也可能是HDAC抑制剂对正常细胞或组织 几乎无毒副作用的原因之一。

另外，很多研究都观察到HDACs诱导的调亡是与蛋白质的合成相关的。如果抑制蛋白 质的合成，会拮抗HDACs诱导的调亡。

HDACs抑制剂促使细胞退出细胞周期，或者发生分化或者发生调亡等不同的药理作用是 与多种因素相关的。一般来说，细胞退出细胞周期是发生分化的前提，当用量较高时，HDA Cs抑制剂通常具有细胞毒作用，能够诱导细胞调亡，而在低剂量时，刚会将细胞阻滞于G期， 使其退出细胞周期。另外，这与细胞类型有关，同一剂量可能会促进某一种细胞分化，而诱 导另一种细胞调亡。这可能是由于药物在具体细胞内的吸收和代谢速度不同引起的；也可能 是由于某些肿瘤细胞内缺失调节细胞周期或者发生调亡所需的基因，例如，过量表达Bcl2的 细胞不会发生由HDACs抑制剂诱导的调亡，但是却不会影响HDACs抑制剂对细胞周期的作 用。通常情况下，HDACs抑制剂激活P21CIPI/WAF1,使细胞停滞于G1期控制点，DNA进 一步复制为4n，则这些细胞很可能会发生调亡。

除了促进细胞退出细胞周期，发生分化，诱导细胞调亡之外，HDACs抑制剂还能通过其 它方式影响肿瘤细胞的生长。HDACs抑制剂能够激活第1类和第2类组织相容性蛋白基因的 转录，还能上调辅助刺激因子CD40，CD89和CD86，细胞间粘附因子ICAM1，以及1型和 2型干扰素的水平，因此可以放大免疫细胞的识别和激活。例如，HDACs抑制剂能够提高肿 瘤细胞对异基因混合白细胞的敏感度。另外，由于实体瘤的迅速增殖，需要新生血管提供肿 瘤细胞所需的氧气和营养物质，HDACs抑制剂能够阻止组织缺氧导致的表皮生长因子（EGF R）的表达，从而抑制新生血管的形成。

目前已发现几类HDACs抑制剂：（1）短链脂肪酸，如：丁酸和苯丁酸；（2）羟胺类， 如：suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)和trichostatin A(TSA)；（3）环肽类，如：Ap icidin,trapocin，FK228和近期发现的largazole；（4）苯甲酰胺类化合物，如：MS-275。

随着对HDACs家族的进一步发现和相关的研究，具有类选择性（class selectivity）和亚 型选择性（isoform selectivity）的抑制剂已经成为目前HDACs抑制剂发展的主流，以便于探 索各亚型在疾病中的作用和开发更有效、毒副作用更小的药物。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一种对组蛋白去乙酰化酶Ⅰ具有抑制作用的含氮杂环衍生物 或者其药用盐。

本发明的对组蛋白去乙酰化酶Ⅰ具有抑制作用的结构如式I所示含氮杂环衍生物或者其 药用盐：

其中R选自式Ia所示含氮杂环基团时，M选自双键、-(CH2)_m-或-C(O)NH(CH₂)₂-,m为 4-8的正整数；所述双键为碳碳双键；

R选自式Ib所示含氮杂环基团时，M为-(CH₂)₄-；

式Ia中，Ar选自苯环、萘环、或含1个或两个取代基的苯环，取代基选自卤素、二甲 氨基、硝基、烷基、烷氧基、全氟烷基、芳基、芳环氧基、芳环甲氧基、芳环氨基、吗啉基 或吲哚基；n选自0或1；X、Y、Z选自碳或氮且X和Y不能同时选自氮；L选自氢、烷基 或芳基;

式Ib中，Y’选自碳或氮；

所述含氮杂环衍生物药用盐是式I所示含氮杂环衍生物与无机酸有机酸反应生成的药用 盐。

本发明所述的“卤素”，选自氟、氯、溴、碘；

本发明所述的“烷基”，选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等；

本发明所述的“烷氧基”，选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁 氧基等；

本发明所述的“全氟烷基”，包括三氟甲基、五氟乙基等；

本发明所述的“芳基”，包括含取代基或不含取代基的芳环，取代基选自卤素、二甲氨基、 硝基、烷基、烷氧基、全氟烷基、芳基、芳环氧基、芳环甲氧基、芳环氨基、吗啉基或吲哚 基；

式Ia中，Ar优选为苯环、联苯、萘环、苄氧基取代的苯环、苯氧基取代的苯环、苯胺 基取代的苯环、吲哚基取代的苯环或苯并[d][1,3]亚甲基二氧基。

本发明的第二个目的是提供含氮杂环衍生物或者其药用盐的制备方法。

本发明所述的化合物的合成，包括四步：

一、芳基的卤化物或醇或酸或醛在碳酸钾的作用下与五元含氮杂环醛室温反应，得到式 B所示的醛基化合物；

二、或Ph₃P＝CH(CH₂)_m-2CO₂Et与式B所示的醛基化合物反应得到式C 所示的烯酸酯；

三、式C所示的烯酸酯经加氢还原再水解或经加氢还原、分子内Heck反应成环或 Buchwald-Hartwig反应或Ullmann反应后再水解得到相应的式D所示的酸；

四、式D所示的酸与草酰氯加热回流反应,产物浓缩后于0℃滴加到新鲜制备的羟胺的二 氯甲烷溶液里（向50ml两颈瓶中加入196mg盐酸羟胺，依次加入9ml二氯甲烷，0.93ml DIPEA， 室温反应30min制得)反应，减压浓缩，分离得到目标产物。

以芳基的溴化物与五元含氮杂环醛作为起始原料为例，合成本发明所述的化合物的合成 路线如式Ⅱ所示：

式Ⅱ,其中n’=m-3

经酶活性实验证明，本发明的式I所示的含氮杂环衍生物或者其药用盐具有很好的抑制 组蛋白去乙酰化酶Ⅰ的活性，并有一定的选择性，可用于治疗由于组蛋白去乙酰化酶Ⅰ活性 异常而导致的一系列疾病，如：肿瘤、白血病、炎症和神经退行性疾病。

因此本发明的第三个目的是提供式I所示的含氮杂环衍生物或者其药用盐在制备组蛋白 去乙酰化酶Ⅰ抑制剂中的应用。

本发明的第四个目的是提供式I所示的含氮杂环衍生物或者其药用盐在制备治疗由于组 蛋白去乙酰化酶Ⅰ活性异常而导致的疾病的药物中的应用。

本发明的第五个目的是提供一种药物组合物，其含有有效剂量的作为活性成份的式I所 示的含氮杂环衍生物或者其药用盐和药用载体。添加药学上可接受的载体可制成常用的药用 制剂，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、液剂、悬浮剂、针剂，可以加入香料、甜味剂、液体或 固体填料或者稀释剂等常用药用辅剂。

本发明的含氮杂环衍生物或者其药用盐具有很好的抑制组蛋白去乙酰化酶Ⅰ的活性，并 有一定的选择性，可用于治疗由于组蛋白去乙酰化酶I活性异常而导致的一系列疾病，如： 肿瘤、白血病、炎症和神经退行性疾病，具有广阔的应用前景。其制备方法简易、快速有效， 原料价廉易得，适应于工业化生产。

具体实施方式：

以下是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的制备

第一步：1-苄基-1H-吡唑-3-甲醛（化合物2）的制备

向50ml茄形瓶中依次加入300mg1H-吡唑-3-甲醛，1.29g碳酸钾，用21ml乙腈溶解， 接着加入0.56ml苄溴(化合物1)，室温反应过夜。减压浓缩，乙酸乙酯萃取，水洗，合并有 机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱色谱分离得到248mg浅黄色 油状液体（化合物2，产率32%）。

第二步：(Z)-5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)戊-4-烯酸乙酯（化合物3）的制备

向50ml双颈瓶中加入1.52g(4-乙氧基-4-氧基-丁基)三苯基溴化鏻，抽真空，充惰气，重 复三次，加入6ml四氢呋喃，将反应瓶放入-78℃反应器中，往其中滴加1.66mlNaHMDS，-78 ℃反应30min，接着加入1-苄基-1H-吡唑-3-甲醛（化合物2）的四氢呋喃溶液（248mg，6ml）， -78℃反应2h，停止制冷，升至室温，反应过夜。减压浓缩，乙酸乙酯萃取，水洗，合并有机 相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱色谱分离得到221mg无色油状 液体（化合物3，产率58%）。

第三步：5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)戊酸（化合物4）的制备

向25ml茄形瓶中加入221mg(Z)-5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)戊-4-烯酸乙酯（化合物3）和 22mg Pd-C，8ml甲醇溶解，抽真空，充氢气，重复三次，室温反应2h。硅藻土过滤，滤液减 压浓缩，往残留物中加入4ml甲醇，2ml四氢呋喃，2ml水和65mg LiOH,室温反应2h。减 压浓缩，乙酸乙酯反相萃取，合并有机相，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压 浓缩，得到182mg浅黄色固体（化合物4，两步总产率91%）。

第四步：5-(1-苄基-1H-吡唑-3基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的制备

向50ml双颈瓶中加入182mg5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)戊酸（化合物4），7ml二氯甲烷溶解， 依次加入两滴DMF，0.30ml草酰氯，回流2h。减压浓缩，油泵抽干，残留物用9ml二氯甲烷稀 释，于0℃滴加到新鲜制备的羟胺的二氯甲烷溶液里（向50ml两颈瓶中加入196mg盐酸羟胺， 依次加入9ml二氯甲烷，0.93ml DIPEA，室温反应30min制得)，0℃反应2h，减压浓缩，柱色 谱分离得到157mg白色固体（化合物5，产率79%），经结构鉴定为5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N- 羟基戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.53(d,J=2.4Hz,1H),7.33-7.24(m,3H),7.16(d, J=6.8Hz,2H),6.12(d,J=2.0Hz,1H),5.25(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz,2H),2.10(t,J=7.0Hz,2H), 1.66-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,151.9,138.0,130.7,128.4,127.4, 127.3,103.9,54.4,32.1,28.7,27.4,24.9ppm.MS(ESI)m/z273.15(100%)(M+H)⁺。

实施例2：5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡咯-2-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成,以间苯基苄溴，1H-吡咯-2-甲醛为起始原料，经过四步反 应得到103mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡咯-2-基)-N-羟基戊 酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.52-7.50(m,2H),7.47(d,J=7.6Hz,1H),7.41-7.33(m,3H), 7.32-7.28(m,1H),7.19(s,1H),6.95(d,J=7.6Hz,1H),6.68(dd,J=2.0,2.4Hz,1H),6.04(t, J=3.2Hz,1H),5.90(s,1H),5.14(s,2H),2.48(t,J=7.2Hz,2H),2.02(t,J=7.0Hz,2H),1.62-1.53(m, 4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ168.9,140.4,140.0,139.8,132.3,129.1,128.9,127.5, 126.6,125.4,124.7,120.9,106.7,105.7,49.2,32.0,28.0,25.2,24.8ppm.MS(ESI)m/z348.18 (100%)(M+H)⁺。

实施例3：5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间苯基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到157mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.60(d,J=2.0Hz,1H),7.56-7.51(m,3H),7.40(q, J=7.6Hz,4H),7.31(t,J=7.2Hz,1H),7.14(d,J=7.6Hz,1H),6.14(d,J=2.0Hz,1H),5.32(s,2H), 2.62(t,J=7.0Hz,2H),2.09(t,J=6.8Hz,2H),1.64(t,J=3.6Hz,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz, DMSO-d₆):δ169.0,152.0,140.3,139.9,138.7,130.8,129.1,128.9,127.5,126.6,126.4,125.8, 104.0,54.4,32.0,28.7,27.4,24.8ppm.MS(ESI)m/z349.18(100%)(M+H)⁺。

实施例4：5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间苯基苄溴，1H-吡唑-4-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到153mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-N-羟基 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.84(s,1H),7.69(s,1H),7.59-7.56(m,3H),7.50(s,1H), 7.43(q,J=7.6Hz,3H),7.33(t,J=7.2Hz,1H),7.21(d,J=7.6Hz,1H),5.47(s,2H),2.54(t,J=6.8Hz, 2H),2.41(t,J=6.8Hz,2H),1.63-1.53(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,140.3, 139.9,138.6,138.4,129.1,128.9,128.2,127.5,126.6,126.5,125.9,125.8,120.8,54.6,30.0,29.8, 24.7,23.3ppm.MS(ESI)m/z349.18(100%)(M+H)⁺。

实施例5：5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间苯基苄溴，1H-咪唑-2-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到159mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.64-7.21(m,11H),5.43(s,2H),2.95(t,J=7.2Hz,2H), 2.08(t,J=6.8Hz,2H),1.68-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ172.3,149.1,143.6, 141.6,136.8,130.9,130.0,128.8,128.4,128.0,127.5,127.3,123.3,121.6,51.7,32.9,27.4,25.8 ppm.MS(ESI)m/z349.18(100%)(M+H)⁺。

实施例6：(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N羟基丙烯酰胺的制备

(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N羟基丙烯酰胺的制备，以间苯基苄溴， 1H-咪唑-2-甲醛为起始原料，第一、三、四步参照实施例1化合物5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N- 羟基戊酰胺（化合物5）的第一、三、四，第二步不一样。

第二步：(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)丙烯酸乙酯的制备

将1.62g乙氧甲酰基亚甲基三苯基膦和1.01g1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-甲醛置 于100ml双颈瓶中，加入39ml甲苯溶解，回流2h。减压浓缩，柱色谱分离得到1.21g黄色油状 液体（产率94%）。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.63(d,J=15.6Hz,1H),7.56(d,J=7.6Hz,3H), 7.44-7.39(m,5H),7.35-7.31(m,1H),7.17(d,J=0.4Hz,1H),7.12(d,J=8.0Hz,1H),6.67(d, J=15.6Hz,1H),5.46(s,2H),4.19(q,J=7.2Hz,2H),1.25(t,J=7.2Hz,3H)ppm.MS(ESI)m/z 332.15(100%)(M+H)⁺。

经过四步反应得到66mg白色固体，经结构鉴定为(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H- 咪唑-2-基)-N羟基丙烯酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.59-7.11(m,12H),6.83(d, J=15.2Hz,1H),5.44(s,2H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ165.3,144.6,143.3,141.8, 138.6,130.6,130.2,129.9,128.6,128.0,127.8,126.8,126.6,125.7,124.4,121.9,50.6ppm.MS (ESI)m/z319.13(100%)(M+H)⁺。

实施例7：(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡咯-2-基)-N羟基丙烯酰胺的制备

参照实施例6(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N羟基丙烯酰胺的合成，以 间苯基苄溴，1H-吡咯-2-甲醛为起始原料，经过四步反应得到164mg白色固体，经结构鉴定 为(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡咯-2-基)-N羟基丙烯酰胺。¹H NMR(400MHz, DMSO-d₆):δ10.51(s,1H),8.84(s,1H),7.59-7.35(m,9H),7.15(s,1H),7.00(d,J=7.6Hz,1H), 6.58(d,J=1.6Hz,1H),6.19(d,J=2.8Hz,1H),6.10(d,J=15.6Hz,1H),5.38(s,2H)ppm.¹³C NMR (125MHz,DMSO-d₆):δ163.5,140.5,140.0,139.3,129.2,128.9,127.6,126.7,126.6,126.0,125.7, 125.3,124.7,114.2,109.7,109.1,49.6ppm.MS(ESI)m/z318.14(100%)(M+H)⁺。

实施例8：5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-5-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间苯基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到85mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-5-基)-N-羟基 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.54-7.28(m,9H),7.02(d,J=7.6Hz,1H),6.19(d, J=1.6Hz,1H),5.41(s,2H),2.63(t,J=6.8Hz,2H),2.04(t,J=6.6Hz,2H),1.61-1.58(m,4H)ppm. ¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ168.8,142.5,140.3,139.8,138.4,137.9,128.9,128.8,127.3, 126.4,125.7,125.5,125.0,104.1,51.7,31.8,27.5,24.5,24.2ppm.MS(ESI)m/z349.18(100%) (M+H)⁺。

实施例9：(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基丙烯酰胺的制备

参照实施例6(E)-3-(1-([1,1'-联苯基]-3-基甲基)-1H-咪唑-2-基)-N羟基丙烯酰胺的合成，以 对二甲氨基苯甲醛，1H-咪唑-2-甲醛为起始原料，经过四步反应得到222mg橘黄色固体，经 结构鉴定为(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基丙烯酰胺。¹H NMR(400MHz, DMSO-d₆):δ10.80(s,1H),9.03(s,1H),7.40-7.34(m,2H),7.01-6.87(m,3H),6.68-6.63(m,3H), 5.20(s,2H),2.85(s,6H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ162.3,149.8,142.6,128.9,127.7, 124.3,123.9,122.6,120.6,112.2,48.1ppm.MS(ESI)m/z286.14(100%)(M+H)⁺。

实施例10：(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-5-基)-N-羟基丙烯酰胺的制备

参考实施例9(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基丙烯酰胺的合成，以对二 甲氨基苯甲醛，1H-咪唑-4-甲醛为起始原料，经过四步反应得到150mg白色固体，经结构鉴 定为(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-5-基)-N-羟基丙烯酰胺。¹H NMR(400MHz, DMSO-d₆):δ10.58(s,1H),8.85(s,1H),7.74(s,1H),7.39(s,1H),7.24(d,J=15.2Hz,1H),7.15(d, J=8.4Hz,2H),6.68(d,J=8.8Hz,2H),6.36(d,J=15.2Hz,1H),5.01(s,2H),2.86(s,6H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ163.6,150.1,138.5,137.8,131.1,128.8,124.4,121.4,115.3,112.3, 49.4,40.0ppm.MS(ESI)m/z286.14(100%)(M+H)⁺。

实施例11：(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-4-基)-N-羟基丙烯酰胺的制备：

参考实施例9(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-2-基)-N-羟基丙烯酰胺的合成，以对二 甲氨基苯甲醛，1H-咪唑-4-甲醛为起始原料，经过四步反应得到184mg白色固体，经结构鉴 定为(E)-3-(1-(4-(二甲氨基)苄基)-1H-咪唑-4-基)-N-羟基丙烯酰胺。¹H NMR(400MHz, DMSO-d₆):δ10.63(s,1H),8.95(s,1H),7.87(s,1H),7.35(s,1H),7.30(d,J=16Hz,1H),6.99(d, J=8.4Hz,2H),6.67(d,J=8.8Hz,2H),6.20(d,J=16Hz,1H),5.18(s,2H),2.85(s,6H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ162.8,149.9,140.2,129.7,128.3,127.8,124.5,124.1,117.0,112.3, 47.4ppm.MS(ESI)m/z286.14(100%)(M+H)⁺。

实施例12：N-羟基-5-(5H-咪唑[5,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺的制备：

N-羟基-5-(5H-咪唑[5,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺的制备与5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊 酰胺（化合物5）的制备大致相同，只是在氢气还原和酯水解中间多了一步：分子内Heck反应 成环。

5-(5H-咪唑[5,1-a]异吲哚-3-基)戊酸乙酯的制备（分子内Heck反应）

向一个25ml的双颈瓶中依次加入63mg醋酸钯，147mg三苯基磷，1.93g碳酸钾和14ml DMF，抽真空，充惰气，重复三次，接着加入5-(1-(2-溴苄基)-1H-咪唑-2-基)戊酸乙酯的DMF 溶液（1.02g,14ml)，120℃反应6h。硅藻土过滤，滤液减压浓缩，柱色谱分离得到716mg浅 黄色晶体（产率90%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.50(d,J=7.6Hz,1H),7.35(q,J=7.6Hz,2H), 7.21(t,J=7.6Hz,1H),7.08(s,1H),4.85(s,2H),4.10(q,J=7.2Hz,2H),2.75(t,J=7.6Hz,2H),2.35 (t,J=7.2Hz,2H),1.89-1.69(m,4H),1.23(t,J=7.2Hz,3H)ppm.MS(ESI)m/z284.15(100%) (M+H)⁺。

以邻溴苄溴，1H-咪唑-2-甲醛为起始原料，经过四步反应得到273mg白色固体，经结构 鉴定为N-羟基-5-(5H-咪唑[5,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.08(s, 1H),8.71(s,1H),7.85(d,J=5.6Hz,2H),7.68(d,J=7.2Hz,1H),7.56-7.48(m,2H),5.43(s,2H), 3.05(t,J=7.6Hz,2H),2.03(t,J=7.2Hz,2H),1.83-1.75(m,2H),1.59-1.52(m,2H)ppm.¹³C NMR (125MHz,DMSO-d₆):δ168.8,143.9,140.8,137.5,128.9,128.8,127.5,124.3,121.4,108.9,50.5, 31.6,24.8,24.4ppm.MS(ESI)m/z271.13(100%)(M+H)⁺。

实施例13：N-羟基-5-(5H-吡咯[2,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺的制备

参照实施例12N-羟基-5-(5H-咪唑[5,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺的合成，以邻溴苄溴，1H-吡 咯-2-甲醛为起始原料，经过四步反应得到273mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(5H-吡 咯[2,1-a]异吲哚-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.36(s,1H),8.67(s,1H),7.44 (d,J=7.6Hz,2H),7.29(t,J=7.4Hz,1H),7.13(t,J=7.6Hz,1H),6.16(d,J=3.2Hz,1H),5.94(d, J=3.2Hz,1H),4.88(s,2H),2.60(t,J=6.6Hz,2H),2.00(t,J=6.4Hz,2H),1.59(s,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,140.2,135.5,133.6,130.2,127.7,124.1,123.5,117.7,109.0, 97.9,48.3,32.0,27.0,25.9,24.9ppm.MS(ESI)m/z270.14(100%)(M+H)⁺。

实施例14：N-羟基-5-(1-(3-苯氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间苯氧基苯甲醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过 四步反应得到151mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(3-苯氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊 酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.54(d,J=2.0Hz,1H),7.34-7.27(m,3H),7.10(t,J=7.4Hz, 1H),6.95-6.85(m,4H),6.73(s,1H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),5.23(s,2H),2.59(t,J=6.8Hz,2H), 2.11-2.07(m,2H),1.64-1.61(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ170.0,156.7,156.2, 151.9,140.0,130.5,129.8,123.3,122.0,118.5,117.1,103.7,53.9,28.5,27.2,20.5,13.8ppm.MS (ESI)m/z365.17(100%)(M+H)⁺。

实施例15：5-(1-(4-(叔丁基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对叔丁基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四 步反应得到201mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(4-(叔丁基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰 胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.50(d,J=2.4Hz,1H),7.35(d,J=8.4Hz,2H),7.10(d,J=8.4Hz, 2H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),5.20(s,2H),2.60(t,J=6.8Hz,2H),2.11-2.08(m,2H),1.66-1.62(m, 4H),1.28(s,9H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ172.8,154.3,151.9,135.5,132.2,128.2, 126.6,105.5,55.8,35.3,33.5,31.7,30.2,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z329.21(100%)(M+H)⁺。

实施例16：N-羟基-5-(1-(4-甲基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对甲基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到174mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(4-甲基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.49(d,J=2.4Hz,1H),7.13(d,J=8.0Hz,2H),7.06(d,J=8.0Hz, 2H),6.11(d,J=2.0Hz,1H),5.19(s,2H),2.60(t,J=7.0Hz,2H),2.29(s,3H),2.09(t,J=6.8Hz,2H), 1.65-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ168.9,151.6,136.4,134.6,130.1,128.7, 127.2,103.6,54.1,31.9,28.5,27.2,24.7,20.4ppm.MS(ESI)m/z287.16(100%)(M+H)⁺。

实施例17：N-羟基-5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

N-羟基-5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备与5-(1-苄基-1H-吡唑-3- 基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的制备大致相同，只是在氢气还原和酯水解步骤中间多了一步 Buchwald-Hartwig反应。

5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酸乙酯的制备（Buchwald-Hartwig反应）

向一个25ml的双颈瓶中依次加入15mg醋酸钯，65mg BINAP，592mg碳酸铯和6ml 甲苯，抽真空，充惰气，重复三次，接着依次加入5-(1-(3-溴苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酸乙酯的 甲苯溶液（474mg,6ml），0.14ml苯胺。120℃反应6h，硅藻土过滤，滤液减压浓缩，柱色谱 分离得到363mg黄色油状液体（产率74%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.28-7.23(m,3H), 7.20(t,7.8Hz,1H),7.04(d,J=7.6Hz,2H),7.00(dd,J=1.6,8.0Hz,1H),6.93(t,J=7.4Hz,1H),6.78 (s,1H),6.72(d,J=7.6Hz,1H),6.06(d,J=2.4Hz,1H),5.86(s,1H),5.20(s,2H),4.11(q,J=7.2Hz, 2H),2.68-2.65(m,2H),2.34-2.30(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.24(t,J=7.2Hz,3H)ppm.MS(ESI) m/z377.21(100%)(M+H)⁺。

以间溴苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到287mg白色泡沫状固体， 经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz, DMSO-d₆):δ10.35(s,1H),8.67(s,1H),8.18(s,1H),7.65(d,J=2.0Hz,1H),7.22-7.15(m,3H), 7.03(d,J=8.0Hz,2H),6.95(dd,J=1.4,8.2Hz,1H),6.87(s,1H),6.81(t,J=7.4Hz,1H),6.65(d, J=7.6Hz,1H),6.04(d,J=2.4Hz,1H),5.17(s,2H),2.50(t,J=1.4Hz,2H),1.96(t,J=6.4Hz,2H), 1.53(d,J=3.2Hz,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.1,151.9,143.5,143.1,140.0, 130.7,129.2,129.1,119.8,118.5,116.8,115.6,115.3,103.8,54.5,32.0,28.7,27.4,24.9ppm.MS (ESI)m/z364.19(100%)(M+H)⁺。

实施例18：N-羟基-5-(1-(萘基-2-基甲基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以2-(溴甲基)萘，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到251mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(萘基-2-基甲基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.82-7.78(m,3H),7.62(s,1H),7.60(d,J=2.4Hz,1H),7.48-7.43 (m,2H),7.29(dd,J=1.6,8.4Hz,1H),6.16(d,J=2.4Hz,1H),5.42(s,2H),2.65-2.61(m,2H),2.10(t, J=7.0Hz,2H),1.65(q,J=3.4Hz,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,152.0,135.5, 132.8,132.3,130.7,128.1,127.7,127.5,126.3,126.1,126.0,125.6,104.0,54.6,32.0,28.7,27.4, 24.9ppm.MS(ESI)m/z323.16(100%)(M+H)⁺。

实施例19：N-羟基-5-(1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对三氟甲基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过 四步反应得到250mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑-3-基) 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.63-7.61(m,3H),7.31(d,J=8.0Hz,2H),6.17(d, J=2.0Hz,1H),5.36(s,2H),2.62(t,J=7.0Hz,2H),2.10(t,J=6.8Hz,2H),1.67-1.63(m,4H)ppm. ¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,152.4,142.8,131.1,127.9,125.4,125.3,104.1,53.8,32.0, 28.6,27.4,24.8ppm.MS(ESI)m/z341.14(100%)(M+H)⁺。

实施例20：5-(1-(3-溴苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间溴苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反 应得到220mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(3-溴苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR (400MHz,CD₃OD):δ7.59(d,J=2.0Hz,1H),7.42(d,J=8.0Hz,1H),7.30(s,1H),7.24(t,J=7.8Hz, 1H),7.13(d,J=7.6Hz,1H),6.15(d,J=2.4Hz,1H),5.25(s,2H),2.62(t,J=7.2Hz,2H),2.10(t, J=6.8Hz,2H),1.67-1.63(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.0,152.3,140.7, 130.9,130.6,130.2,130.0,126.4,121.6,104.0,53.6,32.0,28.7,27.4,24.8ppm.MS(ESI)m/z 351.06(100%)(M+H)⁺。

实施例21：5-(1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-吡唑-3基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以3-氯-4-氟苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四 步反应得到293mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(3-氯-4-氟苄基)-1H-吡唑-3基)-N-羟基戊酰 胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.59(d,J=2.0Hz,1H),7.28(dd,J=2.0,6.8Hz,1H),7.19(t, J=8.8Hz,1H),7.15-7.11(m,1H),6.15(d,J=2.4Hz,1H),5.23(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz,2H),2.10(t, J=7.0Hz,2H),1.65-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ163.3,150.3,148.4,145.5, 126.9,126.8,123.0,121.2,119.2,112.4,112.3,108.4,108.2,96.4,45.2,24.0,20.6,19.0,16.8ppm. MS(ESI)m/z325.10(100%)(M+H)⁺。

实施例22：5-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到200mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.59-7.56(m,5H),7.41(t,J=7.6Hz,2H),7.31(t,J=7.2Hz, 1H),7.25(d,J=8.0Hz,2H),6.14(d,J=2.0Hz,1H),5.30(s,2H),2.63(t,J=7.0Hz,2H),2.10(t, J=6.8Hz,2H),1.65(t,J=3.6Hz,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,150.6,138.1, 137.9,133.7,128.4,125.9,124.9,124.4,124.3,124.0,101.6,51.8,29.5,26.2.24.5,22.3ppm.MS (ESI)m/z349.18(100%)(M+H)⁺。

实施例23：N-羟基-5-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

N-羟基-5-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备与5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰 胺（化合物5）的制备大致相同，只是第一步采用了Ullmann反应实现碳氮键偶联。

1-苯基-1H-吡唑-3-甲醛的制备（Ullmann反应）

依次往封管中加入79mg碘化亚铜，134mg8-羟基喹啉-N-氧化物，2.71g碳酸铯和400mg 1H-吡唑-3-甲醛，抽真空，充惰气，重复三次，接着在惰气保护下依次加入0.70ml碘苯和5ml DMSO，90℃反应48h。反应液加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无 水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱色谱分离得到329mg浅黄色固体（产率46%）。¹H NMR (400MHz,CDCl₃):δ10.10(s,1H),7.98(d,J=2.0Hz,1H),7.77-7.75(m,2H),7.54-7.50(m,2H), 7.40(t,J=7.4Hz,1H),7.00(d,J=2.8Hz,1H)ppm.MS(ESI)m/z172.06(100%)(M+H)⁺.

以碘苯，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到254mg黄色蜡状固体，经结构 鉴定为N-羟基-5-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ8.06(d,J=2.4Hz, 1H),7.68-7.66(m,2H),7.45(t,J=8.0Hz,2H),7.30-7.26(m,1H),6.34(d,J=2.4Hz,1H),2.71(t, J=7.0Hz,2H),2.14(t,J=6.8Hz,2H),1.73-1.69(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ 168.8,152.2,137.5,126.5,125.7,123.4,116.2,103.6,29.5,26.1,24.6,22.4ppm.MS(ESI)m/z 259.13(100%)(M+H)⁺。

实施例24：N-羟基-5-(1-(4-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参照实施例17N-羟基-5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的合成，以对溴苄溴， 1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到270mg白色泡沫状固体，经结构鉴定为N-羟 基-5-(1-(4-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.47(d,J=2.0Hz, 1H),7.21-7.17(m,2H),7.08-7.00(m,6H),6.83(t,J=7.4Hz,1H),6.09(d,J=2.0Hz,1H),5.14(s, 2H),2.61(t,J=6.8Hz,2H),2.10(t,J=6.8Hz,2H),1.66-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz, CD₃OD):δ172.8,154.2,145.2,144.8,131.9,130.1,129.7,129.4,121.5,118.7,118.0,105.4,55.9, 33.5,30.2,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z364.19(100%)(M+H)⁺。

实施例25：5-(1-(4-(1H-吲哚-1-基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

5-(1-(4-(1H-吲哚-1-基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备与5-(1-苄基-1H-吡唑 -3-基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的制备大致相同，只是在氢气还原和酯水解步骤中间多了一 步Ullmann反应。

5-(1-(4-(1H-吲哚-1-基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酸乙酯的制备(Ullmann反应)

向封管中依次加入23mg碘化亚铜，167mg吲哚和528mg磷酸钾，抽真空，充惰气，重 复三次，接着在惰气保护下依次加入5-(1-(4-溴苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酸乙酯的甲苯溶液 （433mg，1.5ml）和26ul N1,N2-二甲基-1,2-乙二胺。110℃反应24h，硅藻土过滤，滤液减 压浓缩，柱色谱分离得到467mg黄色油状液体（98%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.68(d, J=7.2Hz,1H),7.54(d,J=8.4Hz,1H),7.47(d,J=8.4Hz,2H),7.35(d,J=2.0Hz,1H),7.33-7.30(m, 3H),7.24-7.19(m,1H),7.18-7.14(m,1H),6.67(d,J=3.6Hz,1H),6.12(d,J=2.4Hz,1H),5.33(s, 2H),4.12(q,J=7.2Hz,2H),2.69(t,J=7.0Hz,2H),2.34(t,J=7.4Hz,2H),1.73-1.70(m,4H),1.24(t, J=7.2Hz,3H)ppm.MS(ESI)m/z401.21(100%)(M+H)⁺。

以对溴苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到273mg浅黄色粘稠液，经 结构鉴定为5-(1-(4-(1H-吲哚-1-基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR(400MHz, CD₃OD):δ7.63(d,J=2.0Hz,1H),7.60(d,J=8.0Hz,1H),7.51-7.49(m,3H),7.40(d,J=3.2Hz,1H), 7.36(d,J=8.4Hz,2H),7.18-7.14(m,1H),7.11-7.07(m,1H),6.63(d,J=3.6Hz,1H),6.16(d, J=2.0Hz,1H),5.35(s,2H),2.64(t,J=6.8Hz,2H),2.11(t,J=6.8Hz,2H),1.66(t,J=3.6Hz,4H)ppm. ¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ172.8,154.7,140.8,137.1,136.8,132.5,131.0,129.8,128.9, 125.3,123.4,122.0,121.3,111.2,105.7,104.7,55.5,33.5,30.2,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z 388.19(100%)(M+H)⁺。

实施例26：5-(1-(4-溴苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对溴苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反 应得到165mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(4-溴苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR (400MHz,CD₃OD):δ7.56(d,J=2.0Hz,1H),7.47(dd,J=1.8,6.6Hz,2H),7.08(d,J=8.8Hz,2H), 6.14(d,J=2.0Hz,1H),5.23(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz,2H),2.11-2.08(m,2H),1.65-1.62(m,4H) ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ172.8,154.8,138.0,132.8,132.5,130.2,122.6,105.8,55.3, 33.5,30.2,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z351.06(100%)(M+H)⁺。

实施例27：N-羟基-5-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对硝基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到95mg浅黄色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(4-硝基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ8.19(d,J=8.8Hz,2H),7.64(d,J=2.0Hz,1H),7.34(d,J=8.8Hz, 2H),6.18(d,J=2.4Hz,1H),5.41(s,2H),2.62(t,J=6.8Hz,2H),2.10(t,J=6.8Hz,2H),1.64(t, J=3.4Hz,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ172.8,155.3,148.9,146.3,133.0,129.1,124.8, 106.0,55.2,33.5,30.1,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z318.13(100%)(M+H)⁺。

实施例28：1-苄基-N-(3-(羟胺)-3-氧杂丙基)-1H-吡唑-3-酰胺的制备

1-苄基-N-(3-(羟胺)-3-氧杂丙基)-1H-吡唑-3-酰胺可以按照下面的方法制备，第二、三步与 5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的第一、三步分别对应。

第一步：3-(1H-吡唑-3-酰胺基)丙酸甲酯（化合物7）的制备

向100ml茄形瓶中加入1.00g1H-吡唑-3-羧酸（化合物6）和1.87g3-氨基-丙酸甲酯盐酸 盐，用36ml DMF溶解，于0℃下加入5.16ml DIPEA，0℃反应15min，接着加入5.09g HATU， 室温反应过夜。减压旋掉溶剂，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，柱色谱分离得到1.12g浅黄色油状液体（化合物7，产率 64%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.83(t,J=6.0Hz,1H),7.57(d,J=2.4Hz,1H),6.80(d, J=2.4Hz,1H),3.68-3.64(m,5H),2.67(t,J=6.2Hz,2H).MS(ESI)m/z211.10(100%)(M+H)⁺。

第四步：1-苄基-N-(3-(羟胺)-3-氧杂丙基)-1H-吡唑-3-酰胺（化合物10）的制备

向一个50ml的两颈瓶中加入360mg3-(1-苄基-1H-吡唑-3-酰胺基)丙酸,用13ml DMF溶 解，依次加入636mgTBTU和0.37ml三乙胺，室温反应2h。将上述溶液滴加到新鲜制备的羟 胺溶液中（向一个50ml两颈瓶中加入148mg氢氧化钾，用1.5ml甲醇溶解，接着加入184mg 盐酸羟胺，室温反应15min制得），室温反应过夜，减压浓缩，柱色谱分离得到323mg白色 固体（10，产率85%）。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.43(s,1H),8.74(s,1H),8.02(s,1H), 7.91(d,J=2.4Hz,1H),7.37-7.22(m,5H),6.65(d,J=2.0Hz,1H),5.39(s,2H),3.40(t,J=6.4Hz,2H), 2.22(t,J=7.0Hz,2H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ168.0,161.7,147.1,137.5,132.7, 129.1,128.3,127.9,106.6,55.6,35.7,32.8ppm.MS(ESI)m/z288.12(100%)(M+H)⁺。

实施例29：5-(1-(4-(苄氧基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

以5-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺（化合物5）的合成为例，以对苄氧基苄醇， 1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到595mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(4-(苄 氧基)苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.49(d,J=2.0Hz,1H), 7.41-7.26(m,5H),7.12(d,J=8.8Hz,2H),6.94(d,J=8.4Hz,2H),6.10(d,J=2.0Hz,1H),5.17(s, 2H),5.05(s,2H),2.60(t,J=6.8Hz,2H),2.09(t,J=6.8Hz,2H),1.65-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR (125MHz,CD₃OD):δ172.8,159.9,154.4,138.6,132.1,130.8,129.9,129.5,128.9,128.5,116.1, 105.5,71.0,55.6,33.5,30.2,28.5,26.3ppm.MS(ESI)m/z379.19(100%)(M+H)⁺。

实施例30：N-羟基-5-(1-(4-苯氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯氧基苯甲酸，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过 四步反应得到280mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(4-苯氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊 酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.54(d,J=2.0Hz,1H),7.35-7.31(m,2H),7.18(d,J=8.8Hz, 2H),7.09(t,J=7.4Hz,1H),6.97-6.92(m,4H),6.12(d,J=2.0Hz,1H),5.23(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz, 2H),2.10(t,J=6.8Hz,2H),1.66-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ163.3,149.0, 145.1,123.9,122.7,121.4,120.6,115.1,110.5,110.3,96.1,46.0,24.0,20.7,19.0,16.8ppm.MS (ESI)m/z365.17(100%)(M+H)⁺。

实施例31：N-羟基-5-(1-(3-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以间甲氧基苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四 步反应得到258mg白色固体，经结构鉴定为N-羟基-5-(1-(3-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰 胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.53(d,J=2.4Hz,1H),7.22(t,J=7.8Hz,1H),6.82(dd,J=2.2, 8.2Hz,1H),6.74-6.70(m,2H),6.13(d,J=2.4Hz,1H),5.22(s,2H),3.74(s,3H),2.62(t,J=7.0Hz, 2H),2.11-2.08(m,2H),1.66-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,157.5, 150.5,136.2,128.4,126.7,116.5,110.3,110.0,101.6,52.0,51.7,29.5,26.2,24.5,22.3ppm.MS (ESI)m/z303.16(100%)(M+H)⁺。

实施例32：5-(1-(苯并[d][1,3]亚甲基二氧基-5-甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以苯并[d][1,3]亚甲基二氧基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起 始原料，经过四步反应得到206mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(苯并[d][1,3]亚甲基二氧基 -5-甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.50(d,J=2.4Hz,1H), 6.77-6.67(m,3H),6.11(d,J=2.0Hz,1H),5.91(s,2H),5.14(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz,2H),2.10(t, J=6.8Hz,2H),1.66-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,150.5,145.4,144.8, 128.3,128.1,118.1,105.2,104.9,101.6,98.5,51.9,29.5,26.2,24.5,22.3ppm.MS(ESI)m/z 317.14(100%)(M+H)⁺。

实施例33：5-(1-(2,4-二氟苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以2,4-二氟苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到231mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(2,4-二氟苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.55(d,J=2.4Hz,1H),7.16-7.10(m,1H),7.00-6.90(m,2H),6.13 (d,J=2.4Hz,1H),5.28(s,2H),2.60(t,J=7.0Hz,2H),2.09(t,J=7.0Hz,2H),1.65-1.61(m,4H)ppm. ¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,161.3,161.2,159.3,159.2,159.0,157.0,150.9,128.5, 128.3,128.2,117.9,117.8,108.6,108.5,108.4,101.7,100.9,100.7,100.5,29.5,26.2,24.5,22.3 ppm.MS(ESI)m/z309.13(100%)(M+H)⁺。

实施例34：5-(1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对氟苄溴，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反 应得到214mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-(4-氟苄基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。¹H NMR (400MHz,CD₃OD):δ7.54(d,J=2.0Hz,1H),7.22-7.18(m,2H),7.06-7.02(m,2H),6.12(d, J=2.4Hz,1H),5.23(s,2H),2.61(t,J=7.0Hz,2H),2.11-2.08(m,2H),1.65-1.62(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,160.8,158.8,150.7,130.7,128.3,126.4,112.5,112.3,101.7, 51.3,29.5,26.2,24.5,22.3ppm.MS(ESI)m/z291.14(100%)(M+H)⁺。

实施例35：5-(1-苄基-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以苄溴，4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯为起始原料，经过 四步反应得到72mg白色固体，经结构鉴定为5-(1-苄基-4-甲基-1H-吡唑-3-基)-N-羟基戊酰胺。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.32-7.23(m,4H),7.14(d,J=7.2Hz,2H),5.18(s,2H),2.57(t, J=7.0Hz,2H),2.10(t,J=6.8Hz,2H),2.00(s,3H),1.63-1.59(m,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz, CD₃OD):δ168.8,148.4,134.9,127.2,125.7,124.7,124.3,111.3,51.9,29.5,25.8,22.7,22.4,4.4 ppm.MS(ESI)m/z287.16(100%)(M+H)⁺。

实施例36：N-羟基-5-(1-(4-吗啉基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的制备

参考实施例17N-羟基-5-(1-(3-(苯胺基)苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺的合成，以对溴苄溴， 1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步反应得到286mg白色泡沫状固体，经结构鉴定为N-羟 基-5-(1-(4-吗啉基苄基)-1H-吡唑-3-基)戊酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.46(d,J=2.0Hz, 1H),7.11(d,J=8.8Hz,2H),6.91(d,J=8.8Hz,2H),6.09(d,J=2.0Hz,1H),5.15(s,2H),3.80(t, J=4.8Hz,4H),3.10(t,J=4.8Hz,4H),2.60(t,J=6.8Hz,2H),2.09(s,2H),1.65-1.62(m,4H)ppm. ¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ168.8,150.3,148.6,128.0,125.7,125.6,113.0,101.4,63.9,51.7, 46.6,29.5,26.2,24.5,22.3ppm.MS(ESI)m/z358.20(100%)(M+H)⁺。

实施例37：6-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基己酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到217mg白色固体，经结构鉴定为6-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 已酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.59-7.57(m,5H),7.41(t,J=7.8Hz,2H),7.31(t, J=7.2Hz,1H),7.25(d,J=8.0Hz,2H),6.14(d,J=2.0Hz,1H),5.30(s,2H),2.61(t,J=7.6Hz,2H),2.07 (t,J=7.4Hz,2H),1.69-1.59(m,4H),1.40-1.33(m,2H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ170.9, 154.9,142.1,141.9,137.7,132.4,129.9,128.9,128.4,128.3,127.9,105.6,55.8,33.7,30.5,30.1, 29.7,28.8ppm.MS(ESI)m/z363.19(100%)(M+H)⁺。

实施例38：7-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基庚酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到193mg白色固体，经结构鉴定为7-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 庚酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.57(d,J=6.0Hz,5H),7.41(t,J=7.6Hz,2H),7.31(t, J=7.4Hz,1H),7.25(d,J=8.0Hz,2H),6.13(d,J=1.6Hz,1H),5.30(s,2H),2.60(t,J=7.4Hz,2H), 2.05(t,J=7.4Hz,2H),1.64-1.57(m,4H),1.35(s,4H)ppm.¹³C NMR(125MHz,CD₃OD):δ173.0, 155.0,142.1,141.9,137.7,132.4,129.9,128.9,128.4,128.3,127.9,105.6,55.8,33.7,30.7,29.9, 29.8,28.8,26.7ppm.MS(ESI)m/z377.21(100%)(M+H)⁺。

实施例39：8-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基辛酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到398mg白色固体，经结构鉴定为8-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 辛酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.59-7.56(m,5H),7.41(t,J=7.6Hz,2H),7.31(t,J=7.4Hz, 1H),7.25(d,J=8.0Hz,2H),6.13(d,J=2.4Hz,1H),5.30(s,2H),2.60(t,J=7.6Hz,2H),2.05(t, J=7.4Hz,2H),1.65-1.57(m,4H),1.33(s,6H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.7,152.6, 140.0,139.6,137.3,131.0,129.2,128.3,127.7,127.0,126.8,104.3,54.3,32.5,29.3,28.8,28.7, 27.8,25.3ppm.MS(ESI)m/z391.23(100%)(M+H)⁺。

实施例40：9-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基壬酰胺的制备

参考实施例1化合物5的合成，以对苯基苄醇，1H-吡唑-3-甲醛为起始原料，经过四步 反应得到204mg白色固体，经结构鉴定为9-(1-([1,1'-联苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基)-N-羟基 壬酰胺。¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ7.58-7.56(m,5H),7.41(t,J=7.6Hz,2H),7.31(t,J=7.2Hz, 1H),7.25(d,J=8.0Hz,2H),6.13(d,J=2.0Hz,1H),5.30(s,2H),2.60(t,J=7.6Hz,2H),2.05(t, J=7.4Hz,2H),1.65-1.58(m,4H),1.31(s,8H)ppm.¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ169.3,152.3, 139.8,139.4,137.2,130.8,129.0,128.1,127.5,126.8,126.7,104.0,54.2,32.3,29.2,28.8,28.7, 28.6,27.7,25.1ppm.MS(ESI)m/z405.24(100%)(M+H)⁺。

实施例41：酶活性实验

化合物生化活性测定是用HDAC荧光试剂测试盒（catalog#:50033，BPS Bioscience San  Diego，CA，USA）来测试。主要是根据化合物抑制HDAC酶的去乙酰化作用程度来确定其 活性的。其测试原理为：用荧光标记的乙酰化的去乙酰化酶赖氨酸侧链底物和重组的人HDAC 酶作用之后，该荧光底物被去乙酰化。去乙酰化后的荧光标记底物被胰蛋白酶裂解后，释放 出荧光物质，该荧光物质在360nm光的激发下产生460nm的发射光。根据激发光的强度来计 算酶的活性变化。

具体步骤：

1.用BPS HDAC荧光试剂测试盒内的反应缓冲液将5mM的BPS HDAC荧光底物 （catalog#:50032BPS Bioscience，San Diego，CA，USA）稀释25倍成为200uM。

2.用BPS HDAC荧光试剂测试盒内的反应缓冲液将重组人HDAC1酶（catalog#:50051，BPS  Bioscience，San Diego，CA，USA）稀释至适当浓度为50ng/ul(反应终浓度为：5ng/ul)。 3.将下列反应混合物加入一个低吸附的黑色384孔板中,37℃孵育30分钟：

6ul BPS HDAC荧光试剂测试盒内的反应缓冲

1ul1mg/ml小牛血清白蛋白

1ul50ng/ul的重组人HDAC1酶

1ul化合物

1ul200uM的底物

4．终止反应

加入10ul两倍浓度的BPS HDAC荧光试剂测试盒内反应发生液(2×HDAC assay  developer)室温反应15分钟。

5．用激发光350-380nm,发射光440-460检测荧光值。

6.用Prim数据分析计算机软件对数据进行分析。化合物的活性测试结果如表1所示。

表1：活性测试结果

N.S.表示没有明显的抑制作用(Not Significant)

由上述活性实验可知，本发明的含氮杂环衍生物或者其药用盐对HDAC1（组蛋白去乙酰 化酶I型）具有很好的抑制活性，尤其是当引入萘环或含芳香取代基如苯基、苯胺基、吲哚 基、苄氧基、苯氧基的苯环时，得到的实施例18、2、7、22、24、25、29和30对HDAC1 的IC₅₀值分别可以达到42.6、63.9、35.1、33.2、35.3、75.2、67.3、86.6nM，这表明适当地 在此类化合物分子中引入芳香性更强的基团，可以有效地提高此类化合物的抗肿瘤活性。本 发明的含氮杂环衍生物或者其药用盐对抑制组蛋白去乙酰化酶的活性具有一定的选择性，可 用于治疗由于组蛋白去乙酰化酶I活性异常而导致的一系列疾病，如肿瘤、白血病、炎症和 神经退行性疾病。