一种用于促通读药物筛选的有限细胞株的建立方法

摘要

本发明公开了一种表达绿色荧光蛋白（EGFP）和红色荧光蛋白（DsRed）的真核生物表达载体；突变体在绿色荧光蛋白EGFP的445氨基酸位置含有一个提前终止密码子，该突变位点能有效的阻止绿色荧光蛋白EGFP的表达。将构建的双荧光表达载体及其突变体导入非洲绿猴肾细胞Cos-7中，经促通读药物PTC124处理，利用流式细胞术对绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的表达强度进行检测，能高效测定出促通读药物对该载体的促通读效率。另外该表达载体的多克隆位点可以引入不同的无义突变以及其上下游相关序列，从而可以特异性的筛选针对不同无义突变引发的疾病的靶向药物。