利用结晶法分步提取阿维菌素B1组分和B2组分的工艺

摘要

本发明涉及一种利用结晶法分步提取阿维菌素B1组分和B2组分的工艺，包括如下步骤：使用乙醇充分浸取阿维菌素菌丝体；浸取液初步浓缩后使用活性炭脱色；脱色完成后过滤，继续浓缩滤液，然后静置结晶，得到阿维菌素B1晶体，即B1a和B1b的混合物；结晶母液蒸发除去溶剂得油膏，加入甲苯，水洗除杂；洗涤完毕，浓缩甲苯相后降温结晶，晶体为阿维菌素B2晶体，即B2a和B2b的混合物。本工艺可以充分利用现有工艺条件，设备改动少，投资低，收益高。

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用结晶法分步提取阿维菌素B1组分和B2组分的工艺。 

背景技术

阿维菌素是阿佛曼灰色链霉菌的发酵代谢产物，属于抗生素类药物，它的化学结构是带双糖支链的大环内酯，由Ａ1ａ、Ａ1ｂ、Ａ2ａ、Ａ2ｂ、Ｂ1ａ、Ｂ1ｂ、Ｂ2ａ、Ｂ2ｂ等 8个组分所组成（各组分结构见式1），在 八个组分中Ｂ组分（Ｂ1ａ、Ｂ1ｂ、Ｂ2ａ、Ｂ2ｂ）的生物活性优于Ａ组分（Ａ1ａ、Ａ1ｂ、Ａ2ａ、Ａ2ｂ）。该产品发酵过程中， B1(B1a和少量B1b)组分和B2(B2a和少量B2b)组分的含量基本相当，但现有的提取工艺只对B1组分进行了提取纯化，而没有对B2组分进行分离纯化，研究表明，B2组分作为农药和兽药均具有良好的效果。 

发明内容

本发明的目的是提供一种可用于工业生产的利用结晶法分步提取阿维菌素B1组分和B2组分的工艺。 

本发明所采用的技术方案是： 

一种利用结晶法分步提取阿维菌素B1组分和B2组分的工艺，包括如下步骤：使用乙醇充分浸取阿维菌素菌丝体；浸取液初步浓缩后使用活性炭脱色；脱色完成后过滤，继续浓缩滤液，然后静置结晶，得到阿维菌素B1晶体，其中B1a和B1b的质量比大于15；结晶母液蒸发除去溶剂得油膏，加入甲苯，水洗除杂；洗涤完毕，浓缩甲苯相后降温结晶，晶体为阿维菌素B2晶体，其中B2a和B2b的质量比大于15。

优选地，本工艺步骤如下： 

将阿维菌素发酵液使用板框过滤收集菌丝体，干燥至水分含量10%～70%（w/w），然后使用干燥后菌丝体重量（千克）7～13倍体积（升）的乙醇进行浸取；充分浸取后，滤除浸取液；将浸取液浓缩至阿维菌素B1a含量0.5%～2.5%（w/w），加入菌丝体重量0.3%～0.8%的活性炭，在40～70摄氏度下脱色30分钟，然后过滤脱去活性炭得滤液；将滤液继续浓缩至阿维菌素B1a含量3%～10%（w/w），以3-5℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B1一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶得到含量大于90%的阿维菌素B1晶体，其中B1a和B1b的质量比大于15，烘干后即可包装为产品；第一次结晶的母液蒸发除去溶剂得油膏，按油膏中阿维菌素B1a重量（千克）8～15倍体积（升）加入甲苯，加热到70℃进行充分溶解；溶解后，使用与甲苯同温度、1～3倍体积的热水对甲苯溶液进行洗涤，经过1～5次水洗后，收集甲苯相；甲苯相浓缩至油膏（千克）：甲苯溶液（升）为1:2~5:2时，以3-5℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B2一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶得到含量大于90%的阿维菌素B2晶体，其中B2a和B2b的质量比大于15，烘干后即可包装为产品。

本发明的有益效果是：采用本发明工艺，在不增加发酵成本的前提下，分步从菌丝体中提取B1组分和B2组分，提高了企业经济效益，减少了资源浪费和废弃物的产生，同时为B2组分的开发利用奠定了工业生产的基础。本工艺可以充分利用现有工艺条件，设备改动少，投资低，收益高。 

具体实施方式

下面用具体实例对本发明的技术方案做进一步说明。 

实施例1 

将阿维菌素发酵液使用板框过滤收集湿菌丝体，干燥至水分含量25%，取干燥后菌丝体1000千克，然后使用10m3的乙醇充分浸取6小时；充分浸取后，滤除菌丝体得浸取液；将浸取液浓缩至其中阿维菌素B1a含量2.5%，加入3千克活性炭，在40～70℃下脱色30分钟，然后过滤脱去活性炭；滤液继续浓缩至阿维菌素B1a含量3%，以3℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B1一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B1晶体95千克，其中B1a和B1b的质量比为20，烘干后即可包装为产品；第一次结晶的母液蒸发除去溶剂，使用4000升的甲苯加热至70℃充分溶解；溶解后，使用与甲苯溶液同温度、1倍体积的热水对甲苯溶液进行洗涤，经过5次水洗后，收集甲苯相；甲苯相浓缩至油膏（千克，甲苯溶解前）：甲苯溶液（升，浓缩剩余）为1:2时，以3℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B2一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B2晶体83千克，其中B2a和B2b的质量比为18，烘干后即可包装为产品。

实施例2 

将阿维菌素发酵液使用板框过滤收集湿菌丝体，干燥至水分含量15%，取干燥后菌丝体1000千克，然后使用7m3的乙醇充分浸取6小时；充分浸取后，滤除菌丝体得浸取液；将浸取液浓缩至其中阿维菌素B1a含量0.5%，加入5千克活性炭，在40～70℃下脱色30分钟，然后过滤脱去活性炭；滤液继续浓缩至阿维菌素B1a含量7%，以4℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B1一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B1晶体92千克，其中B1a和B1b的质量比为20，烘干后即可包装为产品；第一次结晶的母液蒸发除去溶剂，使用4000升的甲苯加热至70℃充分溶解；溶解后，使用与甲苯溶液同温度、2倍体积的热水对甲苯溶液进行洗涤，经过3次水洗后，收集甲苯相；甲苯相浓缩至油膏（千克，甲苯溶解前）：甲苯溶液（升，浓缩剩余）为3:2时，以4℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B2一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B2晶体82千克，其中B2a和B2b的质量比为18，烘干后即可包装为产品。

实施例3 

将阿维菌素发酵液使用板框过滤收集湿菌丝体，干燥至水分含量65%，取干燥后菌丝体1000千克，然后使用13m3的乙醇充分浸取6小时；充分浸取后，滤除菌丝体得浸取液；将浸取液浓缩至其中阿维菌素B1a含量1.5%，加入8千克活性炭，在40～70℃下脱色30分钟，然后过滤脱去活性炭；滤液继续浓缩至阿维菌素B1a含量10%，以5℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B1一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B1晶体90千克，其中B1a和B1b的质量比为20，烘干后即可包装为产品；第一次结晶的母液蒸发除去溶剂，使用4000升的甲苯加热至70℃充分溶解；溶解后，使用与甲苯溶液同温度、3倍体积的热水对甲苯溶液进行洗涤，经过2次水洗后，收集甲苯相；甲苯相浓缩至油膏（千克，甲苯溶解前）：甲苯溶液（升，浓缩剩余）为5:2时，以5℃/h降温至20℃结晶，晶浆过滤得到的晶体是阿维菌素B2一次晶，该晶体再经过1～4次重结晶可得到含量大于90%的阿维菌素B2晶体80千克，其中B2a和B2b的质量比为18，烘干后即可包装为产品。