法罗培南钠胃漂浮缓释制剂及制备方法

摘要

本发明提供了一种气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂，具有中空的防水气囊，可以长时间滞留在胃中，持续释放药物。本发明的气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂的防水气囊为普通胃溶型硬胶囊壳外包由硬脂酸、乙基纤维素组成的防水层制得，隔离衣层由羟丙甲纤维素、乳糖和甘露醇组成，含药层由法罗培南钠和羟丙纤维素-SL组成，缓释衣层由乙基纤维素N-100和羟丙纤维素-SL组成，与其他赋形剂相比，在含药层和缓释层中采用上述赋形剂可以避免法罗培南钠的分解，保证制剂中药物的稳定。

说明书

技术领域

本发明涉及一种新的法罗培南钠胃漂浮缓释制剂及制备方法，属于医药技术领域。 

背景技术

法罗培南钠是日本Suntory公司研制开发的碳青酶烯类抗生素，具有广谱抗菌活性，对β-内酰胺酶高度稳定。1997年首先在日本上市，商品名为Farom。目前在国外上市的剂型有普通片剂、小儿用干混悬剂。国内上市的剂型有普通片剂、颗粒剂、胶囊等。 

该药口服后主要在小肠上部吸收，药物通过这一段的时间只有约2小时，即药物的吸收时间只有约2小时，吸收窗较窄，生物利用度低(20％)。大量未吸收药物进入肠道下段，破坏肠道正常菌群，导致腹泻、腹痛、软便等肠道不良反应。因此，要提高法罗培南钠的生物利用度，减少未吸收部分，有必要将法罗培南钠制成胃漂浮缓释制剂，使其在胃中长期稳定释放，在小肠上部充分吸收，从而得到较高的生物利用度。 

胃漂浮制剂是指口服后能保持自身密度小于胃内容物密度，而在胃液中呈漂浮状态的制剂。这种制剂是根据流体动力学平衡系统(HBS)原理设计制备的，通常在胃中呈漂浮状态滞留5～6h，延长药物在胃内的释放时间，使尽可能多的药物以溶解状态到达吸收部位，改善药物吸收，提高生物利用度并延长药物作用时间。Tossounian和Sheth最早对胃漂浮制剂进行了详细的描述，称之为“生物有效性制剂”(Bioefficient Product)。20世纪80年代罗氏公司首先推出了地西泮胃漂浮缓释胶囊(商品名：Valrelease、Valium CR)，以后在国外陆续上市的胃漂浮制剂有多巴丝肼缓释胶囊(商品名：MadoparHBS)、巴氯芬缓释胶囊(商品名：Baclofen GRS)、环丙沙星胃漂浮缓释片(商品名：Cifran OD)等。国内目前上市的胃漂浮制剂有硫酸庆大霉素缓释片(商品名：瑞贝克)、西咪替丁缓释片(商品名：容大)、盐酸二甲双胍缓释胶囊(商品名：山姆士)等。 

适于制成胃内漂浮制剂的药物有：1、在胃或小肠上部吸收窗较窄的药物；2、在肠道内不稳定的药物或在胃部、小肠上部有专属性治疗的药物；3、在肠道pH值环境中溶解度很差的药物，应用该制剂可延长其胃排空时间，提高生物利用度。4、在胃中发挥作用的抗胃酸药。法罗培南钠口服后主要在小肠上部吸收，吸收窗较窄，因此适于制成胃内漂浮制剂。 

一般认为理想的胃内滞留制剂需要有如下特征：1、在体温状态下，制剂接触胃液后，表面能水化成凝胶屏障，并膨胀保持原有剂型形状；2、制剂的组成利于制剂在胃内滞留，保持漂浮状态，即制剂的密度小于1g/cm³；3、药物的性质、用量、辅料的选择都能符合胃内滞留制剂要求的体内外释放特性，能缓慢溶解、扩散，能维持胃内较长的释药时间，一般能达到 5～6h。 

目前文献报道和专利公开的胃漂浮制剂多采用低密度蜡质材料、高膨胀材料增大体积和产气等方式来降低整个制剂的密度，从而延长在胃内的滞留时间。上述现有胃滞留控制释药系统，尽管可以达到漂浮目的，但是均存在结构复杂、使用辅料多、加工工艺繁琐、成本高、稳定性不佳的缺点，而且初始阶段并不能立即漂浮，原因是初始密度较大，体积膨胀或产气从而减小密度起浮需要一定时间。另外，现有胃滞留控制释药系统的漂浮能力(一般用漂浮时间和持浮力表示)随着片芯的溶蚀体积减小而降低，不能保证稳定地漂浮在胃内。因此，上述现有胃滞留控制释药系统不适合用于制备法罗培南钠胃漂浮缓释制剂。 

本发明人申请的中国专利200810147445.7，公开了一种气囊型胃漂浮缓释制剂，采用防水气囊外包裹药物层和缓控释层的方法来制备胃漂浮缓释制剂，具有起浮迅速、持浮力稳定的优点，适合用于制备法罗培南钠胃漂浮缓释制剂。 

发明内容

本发明要解决的技术问题如下： 

1、提供一种新的法罗培南钠制剂剂型，即气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂，克服现有法罗培南钠制剂的剂型因为大量未吸收药物进入肠道下段，引起破坏肠道正常菌群，导致腹泻、腹痛、软便等肠道不良反应的缺点； 

2、在中国专利申请200810147445.7所公开内容的基础上，筛选适合于气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂的具体结构以及辅料种类。 

为解决上述技术问题，本发明提供了一种新的气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂，从内到外包括如下组成部分： 

(1)防水气囊； 

(2)隔离衣层，包裹在防水气囊外； 

(3)含药层，包裹在隔离衣层外，由法罗培南钠和医药上可接受的赋形剂构成； 

(4)缓释衣层，包裹在含药层外， 

(5)薄膜衣层，包裹在缓释衣层外。 

本发明所述的气囊型胃漂浮缓释药物释放系统的结构，见附图1。 

所述的防水气囊(1)优选由普通胃溶型硬胶囊壳外包裹防水层构成，所述防水层由高分子成膜材料和疏水性材料组成；该防水气囊可在胃肠液中长时间保持形状的完整及制剂整体密度低于胃肠液，使制剂整体迅速实现漂浮。选用普通胃溶型硬胶囊壳，是因为和其他胶囊壳相比更价廉易得。 

胶囊壳的大小要满足： 

1)、制剂整体密度小，一般小于0.6g/cm³。 

2)、制剂在体内适度膨胀为长短径为0.5×0.8cm至0.7×2.0cm的类球体，阻碍胃排空的效果明显更好，胃内的滞留时间明显更长。 

由于法罗培南钠制剂的规格(以法罗培南计为100mg)较大，以法罗培南钠投料，每粒胶囊法含罗培南钠为123.5mg，再加上必需的赋形剂，含药层的体积和重量均较大，因此需要较大的胶囊壳才能够包裹含药层并且保持足够的浮力，因此可以选择采用000号到2号的空心胶囊壳。由于采用000号到1号的空心胶囊时，胶囊壳较庞大，覆盖其上的防水层需要增重较大才能达到很好的防水效果，隔离衣层同样需要较大增重才能形成连续均一的隔离衣膜，这样会耗费大量的包衣材料以及较多的包衣时间，既费时又不经济，此外，经过实验发现，采用过大的胶囊壳制得的胃漂浮制剂体积整体过大，患者口服时会有不适感，因此本发明优选2号空心胶囊，其产生的浮力足够满足持浮力的要求，表面积大小足够包裹含药层，同时防水层和隔离衣层的增重也适中，制剂体积适于患者口服。 

上述气囊的防水层由高分子成膜材料和疏水性材料构成，所述高分子成膜材料可以选择乙基纤维素、醋酸纤维素、EudragitS、EudragitL、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)、琥珀酸乙酸羟丙甲纤维素(HPMCAS)、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素(HPMCP)、欧巴代(OPADRY)等药物高分子材料中的一种或几种，疏水性材料可以选择十六醇、硬脂酸、巴西蜡、白蜡、氢化蓖麻油等材料的一种或几种。本发明人通过比较筛选实验后发现，与其他材料的组合相比，防水层由乙基纤维素和硬脂酸组成时，成膜性最好，同时防水效果最佳，因此本发明的防水层优选由乙基纤维素和硬脂酸组成。防水层总增重一般选择为胶囊重量的10％～80％，综合考虑性能和经济两方面因素，本发明中防水层增重优选为气囊重量的20％～25％。这样制备的防水气囊在37℃，0.1N HCl中旋转6h，气囊仍保持完整，无明显软化现象。 

由于所使用的普通胃溶型硬胶囊壳体积较大，胶囊体和胶囊帽之间存在间隙，包裹上述防水层后，防水层表面在胶囊体和胶囊帽结合处存在不连续平滑的台阶，如果直接在防水层上进行含药层包衣时，台阶处不能被包衣物完全覆盖形成连续均匀的含药层，会影响药物释放，因此在包裹含药层前，先使用医药上可接受的赋形剂对气囊进行包衣形成连续平滑的隔离衣层(2)，再进行含药层包衣，可在含药层增重较少的情况下，即可形成连续的药物包衣层，更有利于对药物释放的控制，同时，此举可以适当减少含药层赋形剂的用量，从而减轻整个制剂的重量，保证漂浮的效果。 

本发明中所述的隔离衣层使用的赋形剂为乳糖、甘露醇和羟丙甲纤维素，其中羟丙甲纤维素优选羟丙甲纤维素E5；优选隔离衣层由羟丙甲纤维素E5、乳糖和甘露醇组成，重量比例为羟丙甲纤维素E5∶乳糖∶甘露醇＝1∶2∶2。隔离衣层的增重为防水气囊的70％～95％，优选 为80％～90％。 

本发明中所述的含药层(3)由法罗培南钠和医药上可接受的赋形剂构成，我们经过筛选意外地发现，与其他溶液上药法常用的赋形剂相比，赋形剂采用羟丙纤维素-SL时，可在保持良好上药性能的同时，与法罗培南钠不会发生相互作用，整个体系具有较佳的稳定性，利于长期贮存。而其他常用赋形剂例如聚乙二醇4000、聚维酮K30，则会导致法罗培南钠的分解，使得产品的杂质超出药品标准要求。因此本发明的赋形剂优选羟丙纤维素-SL，用量占含药层的25％～35％，可在上药时能够提供合适的固含量，达到均匀上药的目的。 

本发明所述的缓释衣层(4)，其组成包括高分子材料和致孔剂，所述高分子材料优选乙基纤维素N-100，用量占缓释衣层的50％～70％，优选为55％～65％，致孔剂优选羟丙纤维素-SL，用量占缓释衣层的30％～50％，优选为35％～45％。缓释衣层增重为整个制剂的5％～11％，优选为6％～8％。优选这些组合的原因，是因为缓释衣层不仅要保证药物有合适的释放速度，而且由于缓释衣层和含药层相邻，必须保证二者的原辅料之间不会产生相互作用，不影响药物的稳定性和释放性能。本发明人通过实验意外地发现，使用乙基纤维素和羟丙纤维素-SL既能保证药物的稳定性，又能达到平稳释药的目的，而其他常用致孔剂包括聚乙二醇4000、聚维酮K30，都会影响药物的稳定性。 

如果需要，本发明的气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂还可以在缓释衣层外再含有一层薄膜衣层(5)，薄膜衣层可以采用现有技术中的成熟技术来制备，例如采用亮蓝色靛的水溶液使用常规薄膜包衣技术来包衣制备。 

本发明所述气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂的制备方法如下： 

(1)防水气囊采用两阶段包衣技术制备，使气囊的密闭性达到了设计要求，有效的阻止了水份的进入，使气囊形状保持不变。具体方法如下：用高分子材料和疏水性材料的混合包衣液对未锁死的胶囊壳进行包衣，增重至包衣预计总增重的9％～15％时停止包衣，优选12％，充分干燥后，将胶囊锁死，再进行剩余部分的包衣。防水层总增重为胶囊重量的15％～30％，优选为20％～25％。测试表明，这样制备得到的防水气囊在37℃，0.1N HCl中旋转6h，气囊仍保持完整，无明显软化现象。 

(2)使用普通包衣技术制备隔离衣层，其增重为防水气囊的70％～95％，优选为80％～90％。优选气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂的隔离衣层由羟丙甲纤维素E5、乳糖和甘露醇组成，重量比例为1∶2∶2。 

(3)使用普通包衣技术制备含药层，即法罗培南钠和赋形剂通过包衣将气囊芯包裹起来。 

(4)使用普通包衣技术，在外含药层包裹缓释材料组成缓释衣层，即可制得气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂；所述缓释衣层中优选乙基纤维素N-100占50％～70％，羟丙纤维 素-SL占30％～50％，增重为整个制剂的5％～11％。 

(5)使用普通薄膜包衣技术制备薄膜衣层。 

上述制备方法中所用赋形剂的种类和用量可按照前述各部分的组成说明进行选择。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下： 

1、与现有法罗培南钠制剂的剂型相比，克服了因为大量未吸收药物进入肠道下段，引起破坏肠道正常菌群，导致腹泻、腹痛、软便等肠道不良反应的缺点； 

本发明的气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释制剂，由于具有中空的防水气囊，极大的降低了制剂整体的密度，在整个释药期间囊外的高分子成膜材料及疏水性材料(硬脂酸)可以有效的隔绝胃酸，避免囊破裂或形状发生改变，能够稳定、长期地漂浮在胃内的液面上。将药物层包裹在囊外后，在药物层外包裹缓释衣层，可以获得理想的缓释释药效果，增加了在小肠上部的吸收，防止大量未吸收药物进入肠道下段，不会引起破坏肠道正常菌群，导致腹泻、腹痛、软便等肠道不良反应。 

2、与背景技术中所述现有的胃漂浮制剂相比，本发明的优点在于： 

1)采用了中空的防水气囊，可以有效的减小整个制剂的密度，整个制剂的平均密度一般可以控制在0.6g/cm³以下，明显优于目前已上市的胃漂浮制剂；具有密度小且恒定，药物释放控制理想等优势。 

2)初始阶段即能立即漂浮，持浮力持续而恒定。持浮力是评价胃漂浮制剂的重要指标，显著影响制剂在胃内的漂浮性质，本发明的胃漂浮制剂使用附图2所示的持浮力测定装置进行了持浮力测试，结果显示：由于气囊密闭，气体不易散失，各实施例制备的法罗培南钠胃漂浮制剂起浮迅速，持浮力稳定，在静态和动态条件下均可长时间保持稳定的漂浮状态。 

3)制剂在体内适度膨胀为椭球体，尺寸较大，阻碍胃排空的效果明显更好，胃内的滞留时间更长。 

4)制剂本身为缓释制剂，对于结肠吸收较差的法罗培南钠可以有效的延长在吸收部位的停留时间，实现24h给药一次，大大提高了患者服药的顺应性。 

5)采用缓释包衣，在有效控制释放速率的同时又不会大幅增加整个制剂的重量和体积，更有利于包装和运输及患者吞服药物。 

6)由于采用了胶囊壳制备的气囊，其形状有利于患者吞咽，增加了患者的服药的顺应性。 

7)制备方法简单，使用业界已经成熟的包衣技术来制备，成本低，易于工业化生产。

8)本发明非常巧妙地通过利用现成的已经广泛市售的空胶囊壳来制备气囊，极大地简化了工艺、降低了成本。 

9)经过筛选，本发明含药层由法罗培南钠和羟丙纤维素-SL组成，缓释衣层由乙基纤维 素N-100和羟丙纤维素-SL组成，与其他赋形剂相比，在含药层和缓释衣层中采用上述赋形剂可以避免法罗培南钠的分解，保证药物制剂稳定性。 

附图说明：

图1法罗培南钠胃漂浮缓释制剂示意图 

图2持浮力测定装置 

图3 6只Beagle犬经口给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊和参比制剂法罗培南钠片后的平均血药浓度-时间曲线图 

具体实施方式：

实施例1：含药层组成的考察 

一、处方(1000个胶囊计) 

防水气囊处方： 

  2号胶囊   1000个   乙基纤维素N-100   3.0g   硬脂酸   5.0g   95％乙醇溶液   100ml

隔离衣层处方： 

  羟丙甲纤维素E5   50g   乳糖   100g   甘露醇   100g   95％乙醇溶液   400ml   水   600ml

含药层处方： 

  法罗培南钠   123.5g*   聚乙二醇4000   48g   无水乙醇   1600ml

*：按法罗培南计为100g 

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：将2号胶囊放入包衣锅内，片床温度30℃喷入配制好的防水包衣液(由硬脂酸、乙基纤维素分散于95％乙醇制得)，包衣增重10％时将胶囊锁死，再继续包衣使增重为12％～15％； 

2、制备隔离衣层：将羟丙甲纤维素E5分散于95％乙醇溶液中分散。另将乳糖、甘露醇于水中溶解后加入到羟丙甲纤维素E5溶液中，配制成隔离层包衣液，将制备好的气囊放入包衣锅中，采用常规的薄膜包衣方法在气囊外层包裹隔离层，包衣增重85％～90％； 

3、制备含药层：将法罗培南钠原料药于无水乙醇中溶解，加入聚乙二醇4000溶解，制得含药层包衣液，避光条件下，采用常规的薄膜包衣方法在包好隔离衣层的防水气囊外裹含药层。 

三、杂质测定 

有关物质照高效液相色谱法测定(中国药典2010年版二部附录V D)。 

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠4.8g，磷酸氢二钾5.4g，加水溶解并稀释至1000ml)-10％四丁基氢氧化铵水溶液(15∶85∶2)为流动相；检测波长为306nm。理论塔板数按法罗培南钠峰计算应不低于2000。 

测定法取本品10粒，剪开，除去内部胶囊壳部分，其余部分置乳钵中充分研磨得细粉，称取细粉适量(约相当于法罗培南25mg)，置50ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，用水稀释制成每1ml中含5μg的溶液作为对照溶液。精密量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高度约为满量程的20％；再分别量取上述两种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/2(0.5％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0％)。 

测得结果为：单个杂质：1.80％，总杂质：1.90％，结论：杂质含量过大，不符合标准要求。杂质测定结果表明：聚乙二醇4000和法罗培南钠混合后促进法罗培南钠的分解，导致杂质增加，不适合作为赋形剂使用。 

实施例2：含药层组成的考察 

一、处方(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方： 

  法罗培南钠   123.5g   滑石粉   3g   聚维酮K30   48g   无水乙醇   1600ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：将法罗培南钠原料药于无水乙醇中溶解，加入聚维酮K30溶解，加入滑石粉混匀制得含药层包衣液，避光条件下，采用常规的薄膜包衣方法在包好隔离衣层的防水气囊外裹含药层。 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测定结果为：单个杂质：1.80％，总杂质：2.30％。结论：杂质含量过大，不符合标准要求。 

杂质测定结果表明：含药层采用聚维酮K30作为赋形剂时，聚维酮K30和法罗培南钠混合后促进法罗培南钠的分解，导致杂质增加，因此不适合作为含药层的赋形剂使用。 

实施例3：含药层组成的考察 

一、处方(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方： 

  法罗培南钠   123.5g   羟丙纤维素-SL   48g   无水乙醇   1600ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：将法罗培南钠原料药于无水乙醇中溶解，加入羟丙纤维素-SL溶解，加入滑石粉混匀制得含药层包衣液，避光条件下，采用常规的薄膜包衣方法在包好隔离衣层的 防水气囊外裹含药层。 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.10％，总杂质：0.30％，符合要求。说明羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为赋形剂使用。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月， 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.12％，总杂质：0.31％；符合要求。 

4、结果分析：说明羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后，即使长期放置，也不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为含药层的赋形剂使用。 

实施例4含药层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方： 

  法罗培南钠   123.5g   羟丙纤维素-SL   41g   无水乙醇   1600ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.11％，总杂质：0.28％，符合要求。说明羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后(羟丙纤维素-SL占混合物总重量25％)不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为赋形剂使用。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月， 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.13％，总杂质：0.31％； 

4、结果分析：羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后(羟丙纤维素-SL占混合物总重量35％)，即使长期放置，也不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为含药层的赋形剂使用。 

实施例5：含药层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方： 

  法罗培南钠   123.5g   羟丙纤维素-SL   66.5g   无水乙醇   1600ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.11％，总杂质：0.29％，符合要求。说明羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后(羟丙纤维素-SL占混合物总重量35％)不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为赋形剂使用。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月， 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.13％，总杂质：0.32％；符合要求。 

4、结果分析：羟丙纤维素-SL和法罗培南钠混合后(羟丙纤维素-SL占混合物总重量35％)，即使长期放置，也不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加，适合作为含药层的赋形剂使用。 

实施例6：缓释衣层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方： 

 乙基纤维素N-100   30g   聚维酮K30   20g   95％乙醇溶液   1000ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：乙基纤维素N-100于乙醇中溶解后加入聚维酮K30溶解制得缓释衣层包衣液，于高效包衣机内包衣，缓释衣增重约为整个制剂重量的8％； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：1.80％，总杂质：2.40％。杂质含量过大，不符合标准要求。杂质测定结果表明：缓释衣层采用聚维酮K30作为致孔剂包在含药层外后，同样会促进含药层的法罗培南钠的分解，导致杂质增加，因此聚维酮K30不适合作为缓释衣层的致孔剂使用。 

实施例7：缓释衣层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方 

  乙基纤维素N-100   30g   聚乙二醇4000   20g   95％乙醇溶液   1000ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：乙基纤维素N-100于乙醇中溶解后加入聚乙二醇4000溶解制得缓释衣层包衣液，于高效包衣机内包衣，缓释衣增重约为整个制剂重量的6％； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：1.60％，总杂质：2.20％。杂质含量过大，不符合要求。 

测定结果表明：缓释衣层采用聚乙二醇4000作为致孔剂，也会促进含药层中法罗培南钠的分解，导致杂质增加，因此聚乙二醇4000也不适合作为缓释衣层的致孔剂使用。 

实施例8：缓释衣层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方： 

  乙基纤维素N-100   30g   羟丙纤维素-SL   20g   95％乙醇溶液   1000ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：乙基纤维素N-100于乙醇中溶解后加入羟丙纤维素-SL溶解制得缓释衣层包衣液，于高效包衣机内包衣，缓释衣增重为整个制剂重量的6.0％、8.0％、10.0％； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.15％，总杂质：0.34％，符合标准要求。 

测定结果表明：缓释衣层采用羟丙纤维素-SL作为致孔剂，包在含药层外后，不会促进含药层中法罗培南钠的分解，导致杂质增加，因此羟丙纤维素-SL适合作为缓释衣层的致孔剂使用。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验条件，即40℃/RH75％环境下放至6个月； 

2、杂质测定方法：同实施例1；6个月后测定结果为：单个杂质：0.16％，总杂质：0.35％；符合要求。 

稳定性考察结果表明：缓释衣层采用羟丙纤维素-SL作为致孔剂使用，即使长期放置，也不会促进法罗培南钠的分解，不会导致杂质增加。 

五、释放度测定： 

取本品，照释放度测定法(中国药典2010年版二部附录X D)第一法，采用溶出度测定(中国药典2010年版二部附录X C)第二法的装置，将胶囊置沉降篮中测定。以pH3.6醋酸盐缓冲液1000ml为释放介质，转速为每分钟75转，依法操作，经1小时、2小时和5小时时分别取样10ml，滤过，并即时补充同温等体积的释放介质，取续滤液作为供试品溶液；另精密称法罗培南钠对照品适量，用pH3.6醋酸盐缓冲液溶解并稀释制成每1ml中约含法罗培南20μg的溶液，作为对照品溶液。照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录IVA)，于312nm的波长处分别测定吸收度，计算每片在不同时间的释放量。本品每片在第1小时、2小时和5小时的释放量应分别为标示量的10％～40％，40％～70％与75％以上，均应符合规定。 

取样品在室温和加速实验条件分别放置6个月后，测定释放度结果如下表1所示： 

表1法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊释放度测定结果 

六、结果分析：缓释衣层中乙基纤维素N-100占60％，羟丙纤维素-SL占40％时，缓释衣层 包衣增重为6％～10％之间时，释放均合格，相对而言，包衣增重为8％时释放最均匀。 

此外，综合稳定性考察结果和释放度结果可以分析得出结论：羟丙纤维素-SL作为致孔剂使用，即使长期放置，既不会促进法罗培南钠的分解，也不会导致杂质增加，更不会影响释放，非常适合作为缓释衣层致孔剂使用。 

实施例9：缓释衣层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方： 

  乙基纤维素N-100   27.5g   羟丙纤维素-SL   22.5g   95％乙醇溶液   1000ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：乙基纤维素N-100于乙醇中溶解后加入羟丙纤维素-SL溶解制得缓释衣层包衣液，于高效包衣机内包衣，缓释衣增重为整个制剂重量的7.0％、9.0％、11.0％； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.13％，总杂质：0.33％；符合要求。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月； 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.14％，总杂质：0.34％；符合要求。 

五、释放度测定： 

1、测定方法：同实施例6；释放度测定结果见表2所示。 

表2法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊释放度测定结果 

2、结果分析：缓释衣中乙基纤维素N-100占55％，羟丙纤维素-SL占45％时，缓释衣增重为7％～11％时释放合格，且长期放置后释放度不下降。 

实施例10：缓释衣层组成的考察 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方： 

 乙基纤维素N-100   32.5g   羟丙纤维素-SL   17.5g   95％乙醇溶液   1000ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：乙基纤维素N-100于乙醇中溶解后加入羟丙纤维素-SL溶解制得缓释衣层包衣液，于高效包衣机内包衣，缓释衣增重为整个制剂重量的5.0％、7.0％、9.0％； 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.12％，总杂质：0.34％；符合要求。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月； 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.13％，总杂质：0.35％；符合要求。 

五、释放度测定： 

1、测定方法：同实施例6；释放度测定结果见表3所示。 

表3法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊释放度测定结果 

2、结果分析：缓释衣中乙基纤维素N-100占65％，羟丙纤维素-SL占35％时，缓释衣增重为5％～9％释放合格，且长期放置后释放度不下降。 

实施例11：加薄膜衣层 

一、处方组成：(1000个胶囊计) 

防水气囊处方：同实施例1 

隔离衣层处方：同实施例1 

含药层处方：同实施例3 

缓释衣层处方：同实施例8 

薄膜衣层组成： 

  欧巴代II   10g   亮蓝色靛   0.015g   水溶液   100ml

二、制备工艺： 

1、制备防水气囊：同实施例1； 

2、制备隔离衣层：同实施例1； 

3、制备含药层：同实施例3； 

4、制备缓释衣层：同实施例8，包衣增重为8.0％； 

5、制备薄膜衣层：将欧巴代II于水中混匀，加入亮蓝色靛剪切得到薄膜衣包衣液，于高效包衣机内包衣，包衣增重为整个胶囊的2.5％，得到具有蓝色薄膜衣层的法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊。 

三、杂质测定方法：同实施例1； 

测得结果为：单个杂质：0.10％，总杂质：0.30％，符合要求。 

四、稳定性考察： 

1、采用加速试验，条件为40℃/RH75％，6个月； 

2、杂质测定方法：同实施例1； 

3、结果为：单个杂质：0.11％，总杂质：0.32％，符合要求。 

4、结果分析：在缓释衣层外包薄膜衣层不会影响药物的稳定性。 

五、释放度测定： 

1、测定方法：同实施例6；释放度测定结果见表4所示。 

表4法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊释放度测定结果 

2、结果分析：在缓释衣层外包薄膜衣不会对释放造成影响。 

实施例12漂浮性能的测定 

1、起漂时间测定 

将实施例8、9、10、11制备的法罗培南钠缓释胶囊各6粒，分别投入含有37℃人工胃液的测定杯内，可观察到各实施例样品均立即起漂，无起漂时间的延迟。 

2、持续漂浮时间测定 

静态持续漂浮时间：将实施例8、9、10、11制备的法罗培南钠缓释胶囊各6粒，分别投入含有37℃人工胃液的测定杯内，分别在1h、4h、8h、16h、24h、36h、48h观察漂浮情况，结果表明各实施例样品均可持续漂浮至少48h，且外形保持完整。 

动态持续漂浮时间：取实施例8、9、10、11制备的法罗培南钠缓释胶囊各6粒，采用溶出度测定(中国药典2010年版二部附录X C)第一法的装置，将胶囊置转篮中测定。以37℃人工胃液900ml为介质，转速为每分钟75转，模拟人体胃部的蠕动，分别在1h、4h、8h、16h、24h观察胶囊漂浮情况。结果表明各实施例样品均可持续漂浮至少24h，且外形保持完整。 

3、持浮力测定： 

将实施例8、9、10、11制备的法罗培南钠缓释胶囊各6粒，分别用细线固定在附图2所示持浮力测定装置的石英弹簧顶端，浸没于37℃人工胃液中，观察并记录指针指向的刻度值，每隔1小时记录一次，至8小时。结果表明，本发明实施例8、9、10、11制备的胃漂浮型法罗培南钠缓释胶囊漂浮8小时内指针的位置均无变化，表明浮力8小时内均未降低。 

实施例13：动物药代动力学实验 

1、实验动物 

Beagle犬，6条，雄性，体重：10.6～12.5kg，来源于嘉兴市嘉安实验动物养殖有限公司，许可证号：SCXK(浙)2003-2007。 

2、试验药品 

受试制剂：气囊型法罗培南钠胃漂浮缓释胶囊，规格：0.1g，批号：091101，北京天衡药物研究院提供。 

参比制剂：法罗培南钠片，规格：0.2g；批号：100401；鲁南贝特制药有限公司生产。 

3、给药方法及研究过程 

采用双周期两制剂交叉试验设计，服药前禁食过夜(12小时以上)，于次日早晨空腹经口给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊1粒(0.1g)，或参比制剂法罗培南钠片1片(0.2g)，并用100ml温开水灌送，分别于给药前(0)和给药后10min、20min、30min、45min、1h、 1.5h、2h、2.5h、3h、4h、6h、8h、10h、12h从犬后肢静脉取血3ml，放入试管中静置约半小时，3000rpm离心15分钟，取血浆于离心管中，-70℃冷冻待测。服药后2h可饮水；间隔1周两组交叉服药，第二周期采血时间点与第一周期相同。 

4、血浆中法罗培南HPLC测定方法 

4.1色谱条件 

色谱柱：岛津VP-ODS 150×4.6mm，流速：1.0ml/min； 

流动相：乙腈∶水(含0.1％甲酸，5mmol/L乙酸铵)＝18∶82(V∶V)， 

灵敏度：0.001AUFS；检测波长：318nm；柱温：30℃，进样量：20μl。 

4.2血浆样品处理方法 

精密量取100μl血浆置于空白离心管中，加入10μl昂丹司琼内标溶液(14μg/ml)，涡旋30s，再加入80μl高氯酸溶液(7％)沉淀，涡旋3min，14000rpm离心10min，取上清液，14000rpm离心5min，20μl进样分析。 

4.3血浆中法罗培南标准曲线和定量下限 

4.3.1法罗培南标准曲线 

法罗培南标准溶液的配制：精密称取法罗培南钠对照品6.25mg于25ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，即得217.916μg/ml的法罗培南储备液(即8号标准溶液)。标准溶液配制过程见表5。 

表5法罗培南标准溶液配制过程 

其中7、6、5、4、3、2、1作为法罗培南标准曲线七个浓度的标准溶液。 

内标溶液的配制：精密称取15.74mg盐酸昂丹司琼对照品于10ml容量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，即得1400μg/ml的储备液，取1ml该储备液于100ml容量瓶中，甲醇定容，即配制成14μg/ml的昂丹司琼溶液作为内标溶液。 

标准曲线的制备：精密量取不同浓度的法罗培南标准溶液10μl于7个空白离心管中，N₂ 下吹干，加入100μl的Beagle犬空白血浆，配制成法罗培南血药浓度分别为：0.327、0.654、1.308、2.615、4.358、8.717、17.433μg/ml的样品，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样分析，建立法罗培南的标准曲线。以待测物峰面积与内标峰面积的比值(x)为横坐标，待测物浓度(y，ng/ml)为纵坐标，用加权(1/x²)最小二乘法进行线性回归运算，求得的直线方程即为标准曲线。小结：法罗培南血样的标准曲线线性范围为0.327～17.733μg/ml，线性关系良好。 

4.3.2定量下限 

分别精密量取3.269μg/ml法罗培南标准溶液10μl于5个空白离心管中，N₂下吹干，加入100μl的Beagle犬空白血浆，配制成法罗培南血药浓度0.327μg/ml的样品，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样分析，结果见表6。 

表6法罗培南的定量下限结果 

小结：法罗培南药物峰SN＞10，定量下限偏差在15％范围内，RSD为4.63％，符合相关技术指导原则要求，法罗培南血样定量下限为0.327μg/ml。 

4.3.3提取回收率的测定 

取空白离心管分别加入不同浓度的法罗培南QC标准溶液各10μl，N₂下吹干，再加入100μl空白血浆配制成低、中、高三个浓度(分别为0.654，4.358和13.075μg/ml)的样品各3份，按“血浆样品处理方法”项下操作，20μl进样分析，得到相应药物峰面积和内标峰面积，分别为As(H)、Ai(H)；另取法罗培南QC标准溶液和昂丹司琼内标溶液各10μl，N₂下吹干，加入180μl流动相，配制成低、中、高相同浓度的对照品溶液，涡旋混匀后20μl进样分析，得到法罗培南和内标峰面积，分别为As(T)、Ai(T)，每一浓度三样本分析。法罗培南提取回收率按下式计算＝[As(H)/As(T)_平均值]×100％，内标昂丹司琼提取回收率＝[Ai(H)/Ai(T)_平均值]×100％，结果见表7。 

表7血浆中法罗培南和内标提取回收率结果 

小结：血浆中法罗培南提取回收率为72.12％～83.36％，内标昂丹司琼提取回收率为31.80％～40.99％。 

4.3.4方法的精密度与准确度考察 

取空白离心管，分别加入法罗培南QC标准溶液各10μl，N₂下吹干，再加入100μl空白血浆，配制成低、中、高三个浓度(分别为0.654，4.358和13.075μg/ml)的样品，按“血浆样品处理方法”项下操作，每一浓度进行至少6样本分析，在不同天内连续制备并测定3个分析批，计算得批内和批间RSD均小于15％。 

4.3.5血浆中法罗培南的稳定性研究 

分别考察法罗培南血浆样品处理后-20℃放置稳定性、血浆样品室温放置再处理后稳定性、血浆样品反复冻融3次稳定性、血浆样品长期冷冻保存条件下的稳定性，具体如下： 

取空白离心管精密加入不同浓度的法罗培南QC溶液各10μl，N₂下吹干，加入100μl空白血浆，配制成法罗培南低、高两个浓度(0.654和13.075μg/ml)的样品，各九份，每份3个样本。每个浓度的样品均按如下方法操作：四份按“血浆样品处理方法”项下操作，在-20℃下放置0、5h、13h、23h后分别取一份进样分析，考察已处理样品在-20℃条件下的稳定性；一份在室温下放置6h后，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样分析，考察药物在血浆中室温放置再处理后的稳定性；三份在-20℃冰箱，反复冻融三次，每解冻一次后取一份，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样分析，考察血浆样品在反复冻融条件下的稳定性；一份在-20℃冰箱冷冻29天后，按“血浆样品处理方法”项下操作，进样分析，考察血浆样品在长期冷冻条件下的稳定性。 

小结：法罗培南血浆样品处理后-20℃放置23h、血样室温下放置6h再处理、反复冻融3次以及长期冷冻29天后的稳定性均较好，对试验结果无影响。 

4.3.6样品测定过程中的随行标准曲线及质量控制 

为减少系统误差，在进行样品分析时，每批建立一条随行标准曲线计算血药浓度，并测定质控样品(低、中、高浓度分别为：0.654、4.358和13.075μg/ml)，确保计算得到的药物浓度准确可靠，结果表8～表9。 

表8法罗培南随行标准曲线的峰面积比、曲线方程及相关系数 

表9质控样品测定浓度及均数、标准差 

小结：质控测定结果显示，质控样品偏差均在15％范围内，RSD＜10％，符合生物样本检测要求，血药浓度数据测定准确，结果可靠。 

4.3.7方法小结 

采用HPLC内标法测定Beagle犬血浆中法罗培南浓度，血浆中内源性物质不干扰样品的测定，线性范围：0.327～17.433μg/ml，定量下限为0.327μg/ml，法罗培南血浆提取回收率为72.12％～83.36％，批内和批间RSD均小于15％。该方法符合生物样品分析要求。 

4.4数据处理：根据所测得的法罗培南钠血药浓度-时间数据，采用DAS软件进行处理及统计分析，求出主要药物动力学参数。将C_max、AUC_0-t及AUC_0-∞经对数转换后进行方差分析和双单侧t检验，如受试制剂AUC的90％置信区间落在参比制剂80％-125％范围内，且Cmax的90％置信区间落在参比制剂70％-143％范围内，则认为受试制剂和参比制剂生物等效。T_max采用非参数法进行检验。 

5、研究结果 

5.1血药浓度-时间数据6只Beagle犬灌胃给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊和参比制剂法罗培南钠片后血药浓度数据见表10～表11。 

5.2血药浓度-时间曲线 

6只Beagle犬灌胃给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊和参比制剂法罗培南钠片后法罗培南的平均血药浓度-时间曲线(C-T)图见附图3。 

5.3药代动力学参数 

6只Beagle犬灌胃给予受试制剂和参比制剂后，药代动力学参数经DAS2.1软件计算结果见表12～表13。 

表126只Beagle犬灌胃给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊0.1g后法罗培南的药代动力学参数(T) 

表136只Beagle犬灌胃给予参比制剂法罗培南钠片0.2g后法罗培南的药代动力学参数(R) 

5.4法罗培南钠缓释胶囊的相对生物利用度 

现以AUC_0-12之比F为相对生物利用度的正式值，AUC_0-∞之比F′为参考值，结果见表14。 

表14受试制剂法罗培南钠缓释胶囊和参比制剂法罗培南钠片相对生物利用度及峰值浓度比值 

5.5法罗培南统计学分析 

5.5.1方差分析 

将法罗培南钠缓释胶囊和法罗培南钠片的药动学参数：ln(AUC_0-12)、ln(AUC_0-∞)、ln(C_max)进行方差分析，评价两制剂的差异。两种制剂的ln(AUC_0-12)、ln(AUC_0-∞)、ln(C_max)方差分析结果见表15～表17。 

结果表明ln(AUC_0-12)、ln(AUC_0-∞)、ln(C_max)在药剂间、周期间差异均无统计意义，在个体间差异有统计意义(P＜0.05)。 

表15-1两种制剂ln(AUC_0-12)方差分析结果 

表15-2两种制剂ln(AUC_0-12)个体间变异方差分析结果 

表16-1两种制剂ln(AUC_0-∞)方差分析结果 

表16-2两种制剂ln(AUC_0-∞)个体间变异方差分析结果 

表17-1两种制剂ln(C_max)方差分析结果 

表17-2两种制剂ln(C_max)个体间变异方差分析结果 

5.5.2T_max的非参数检验 

T_max的非参数检验结果见表14。 

表18T_max的非参数检验结果 

结果表明T_max的药剂间差异无统计意义，但从统计结果中可以看出受试制剂达峰时间明显比参比制剂达峰时间延迟。 

5.5.3双向单侧t检验 

将法罗培南钠缓释胶囊和法罗培南钠片的药动学参数：ln(AUC_0-12)、ln(AUC_0-∞)、ln(C_max) 参数进行双向单侧t检验，计算其置信区间。其结果见表19～表21。 

表19ln(AUC_0-12)双向单侧t检验结果 

表20ln(AUC_0-∞)双向单侧t检验结果 

表21ln(C_max)双向单侧t检验结果 

结果表明，受试制剂和参比制剂的ln(AUC_0-12)、ln(AUC_0-∞)经方差分析，两制剂间无显著性差异；经双向单侧t检验，两制剂的[1-2α]置信区间分别为81.9％～121.5％、80.4％～121.0％，表明两制剂在吸收程度上具有生物等效性。受试制剂和参比制剂ln(C_max)经方差分析，两制剂间无显著性差异；经双向单侧t检验，两制剂的[1-2α]置信区间为86.2％～114.0％，表明两制剂在达峰浓度上具有生物等效性。T_max经非参数检验，两制剂间无显著性差异，但从统计结果中可以看出受试制剂达峰时间明显比参比制剂达峰时间延迟，符合缓释制剂的特点。 

综上，Beagle犬单次经口给予受试制剂法罗培南钠缓释胶囊0.1g或参比制剂法罗培南钠片0.2g后，以AUC_0-12计算，受试制剂与参比制剂的相对生物利用度平均为104.6±35.2％；受试制剂采用胃漂浮技术，使生物利用度大大提高，给药剂量降低1倍，而生物利用度与普通制剂相当，且具有生物等效性。