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一种全能核酸内切酶的表达纯化方法

摘要

本发明公开一种全能核酸酶表达纯化方法,包括以下步骤:1)表达步骤:含目的基因的大肠杆菌在基础培养基生长,并加入诱导剂异丙基‑P‑D‑硫代半乳糖对目的蛋白进行诱导表达;所述目的基因含全能核酸酶序列,且全能核酸酶序列的前端具有编码6xHis标签;所述目的蛋白为包涵体;2)包涵体变复性:所述步骤1)得到的包涵体通过稀释变复性获得可溶的有活性的目的蛋白;3)纯化步骤:目的蛋白通过亲和层析纯化、酶切、反挂,得到高纯度的全能核酸酶。本发明提供的方法,可以有效降低全能核酸内切酶的生产成本,缩短纯化时间,获得高活性的全能核酸内切酶,有利于该全能核酸内切酶在科研和工业领域的应用。

著录项

  • 公开/公告号CN110468116A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2019-11-19

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海药明康德新药开发有限公司;

    申请/专利号CN201910836871.X

  • 发明设计人 李颖洁;刘一璇;杨青;

    申请日2019-09-05

  • 分类号

  • 代理机构上海浦一知识产权代理有限公司;

  • 代理人郑权

  • 地址 200131 上海市浦东新区外高桥保税区富特中路288号1号楼

  • 入库时间 2024-02-19 14:58:18

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2019-12-13

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N9/16 申请日:20190905

    实质审查的生效

  • 2019-11-19

    公开

    公开

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