靶向编辑bcr-abl融合基因的gRNA序列及其应用

摘要

本发明提供靶向编辑bcr‑abl融合基因的gRNA序列及其应用，通过定位bcr‑abl基因中三段特异的靶序列位点DNA片段，并针对此特异位点构建gRNA表达质粒，将此质粒和FokI‑dCas9表达质粒及donor核转染K562细胞，可以使bcr‑abl基因发生定点断裂，并以供体DNA为模板进行同源修复，使其插入8个碱基最终导致bcr‑abl基因的破坏。本发明的显著优势表现在针对bcr‑abl序列中特异的靶序列位点构建的RFNs可高效靶向bcr‑abl基因发生DNA双链断裂，以HDR方式进行修复使bcr‑abl发生移码等突变而被破坏，从而丧失促增殖、抑凋亡等恶性转化潜能。