一氧化氮合酶2基因过表达慢病毒、相应基因载体及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种人源一氧化氮合酶2(NOS2)基因过表达慢病毒载体、NOS2基因过表达慢病毒及其构建方法和应用。本发明通过分子克隆技术，将普通质粒上的人源NOS2基因利用PCR扩增技术加上XhoI和BamHI酶切位点，并经酶切后连接到空载的过表达慢病毒载体上，得到NOS2基因过表达的慢病毒载体。再使用慢病毒包装质粒对NOS2基因过表达慢病毒载体进行包装，通过转染293T细胞，得到相应的慢病毒。本发明构建的NOS2基因过表达慢病毒对宿主细胞转染效率高，能特异性、持续、高效的促进人源NOS2基因在宿主细胞中稳定表达。同时，本发明构建的NOS2基因过表达慢病毒载体能特异性合成可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)，并带有绿色荧光蛋白标签，为进一步研究人源一氧化氮合酶2(NOS2)的功能和潜在作用机理提供了实验基础。