一种结核分枝杆菌耐药性检测方法

摘要

本发明属于生物技术技术领域，具体的说是一种结核分枝杆菌耐药性检测方法，该方法包括如下步骤：裂解结核分枝杆菌用于PCR反应的模板；设计PCR引物，扩增全长的吡嗪酰胺酶(pncA)基因；浓缩扩增的pncA基因片段并定量；采用小麦胚芽无细胞表达系统表达pncA酶；测定表达的pncA酶转化吡嗪酰胺为吡嗪酸的活性，并与同样表达的结核杆菌标准敏感株和耐药株的pncA酶活性比较，测定结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性；本发明通过使用一对引物就能测定因pncA基因突变导致的耐药性；同时公开了即能从结核杆菌基因组上扩增全长pncA基因又适合小麦胚芽无细胞表达系统表达吡嗪酰胺酶的引物序列；进而实现快速、灵敏检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性，且无需细菌培养。