一种鉴别A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌的荧光定量RT-PCR方法

摘要

本发明通过RNA‑seq技术获得A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌菌株的差异表达基因的方法，以及通过多杀性巴氏杆菌的差异表达基因或其产物检测A型多杀性巴氏杆菌或者鉴别A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌的应用。本发明还建立了基于差异表达基因鉴别A型和B型多杀性巴氏杆菌的荧光定量RT‑PCR方法。所述RT‑PCR方法包括对多杀性巴氏杆菌TadD基因进行扩增的步骤。本发明的方法可以高灵敏度、高特异性地检测A型菌株，灵敏度为10fg cDNA/μL，是常规PCR的1000倍，且不与其他种属的细菌反应，具有良好的特异性。本发明的方法通过特异性检测A型牛源多杀性巴氏杆菌和鉴别A型与B型多杀性巴氏杆菌，不仅可以对相关疫病进行鉴别诊断，也可为今后A型疫苗的免疫效力提供有效监测，具有重大的实用价值和应用前景。