Estirpes floculantes de Saccharomyces cerevisiae geneticamente modificadas para a utilização da lactose : aplicação ao soro de queijo

摘要

Numa primeira abordagem construiu-se uma estirpe flocuiante de S. cerevisiaeNCYC869-A.3/Tl capaz de fermentar a lactose, atraves da utilizac;iio dosgenes de Kluyveromyces lactis, LAC4 (codificador para a ~-galactosidase) eLAC12 (codificador para a permease da lactose). A estirpe construida demonstrouuma boa capacidade fermentativa (com rendimentos pr6ximos dos teoricamenteesperados) e foi estudada em sistema continua de elevada densidadecelular. permitindo a obtenc;ao de cerca de 11 gl-1h·1 de etanol, valor 6 vezes superiorao obtido em sistemas continuos tradicionais. A estabilidade do sistemade fermentac;ao foi confirmada quer pelo tempo de operac;iio em continua (6meses) quer por um ensaio de contaminac;iio com uma estirpe de Escherichiacoli recombinante produtora da proteina GFP.Numa segunda abordagem, construiram-se estirpes flocuiantes capazes de excretar~-galactosidase de Aspergillus niger para o meio extracelular. Uma dasestirpes construidas apresentou produc;iio de ~-galactosidase comparavel a obtidaem sistemas comerciais de produc;iio por fungos filamentosos. Aplicou-se aestirpe construida a sistema continua de elevada densidade celular, obtendo-seuma produtividade cerca de 6 vezes superior a obtida em sistema descontinuo.Em ambas as estrategias utilizadas, o permeado de soro de queijo foi testadocomo substrata, observando-se uma reduc;iio superior a 90% na carga poluente.