血管内皮細胞傷害に対するプロテアーゼインヒビターによるサイトプロテクション効果

摘要

血管内皮細胞の機能破綻は,生体が侵襲に曝された際に引き起こされる多臓器障害等の発症のfirst stepである.その機序には酸化ストレスによる細胞傷害が深く関与するとされている.我々は,この細胞傷害にアポトーシス関連蛋白が関与すると想定し,培養した血管内皮細胞を用いて,この内皮細胞傷害のメカニズムを解明すると共に,現在,臨床応用されているプロテアーゼインヒビター(ウリナスタチン)が細胞傷害に対してどのように作用するかを比較検討した.血管内皮細胞にストレスドナーを与え,アポトーシス関連蛋白であるBaxおよびBcl-2の形質発現を,モノクロナール抗体を用いてflow cytometerで測定したところ,対照群と比較して刺激群の培養内皮細胞は,アポトーシス抑制蛋白であるBcl-2の発現が有意に減少しており,Bax/Bcl-2比はストレスのH_2O_2,濃度依存的に増加する傾向を示す結果を得た.この結果を踏まえ,プロテアーゼインヒビターを加えて共存培養した血管内皮細胞と単独培養した血管内皮細胞について,BaxおよびBcl-2の形質発現を比較した.単独培養群に比べて共存培養群の内皮細胞群では,Bcl-2の発現の減少が抑制され,Bax/Bcl-2比の増加傾向も抑制されていた.これらから血管内皮細胞の傷害にはアポトーシス関連蛋白であるBcl-2ファミリーが関与する可能性が示唆された.また,プロテアーゼインヒビターは酸化刺激により引き起こされるBax/Bcl-2比の変化を正常化することにより,細胞保護的に作用する可能性が考えられた.