生細胞におけるクロマチン配置の可視化法

摘要

核内のクロマチン配置やその動態は，遺伝子の発現制御や環境ストレスに対するゲノムメンテナンスにかかわることが知られている.核内のクロマチン配置の研究はこれまで主に蛍光in situハイブリダイゼーシヨン(FISH)法によって行われてきた.FISH法は10 kb以上のラベルしたプローブを用いて，ゲノム中の任意の配列を可視化することができる有用な方法である.しかしながら，細胞の固定，プローブとのハイブリダイゼーシヨンのための高温による変性等の処理が必要なため，生細胞の観察に向いておらず，時空間的な解析が難しい，また処理が煩雑であり，元の構造の保存性の問題などがあった（図1).特に，植物は細胞壁の存在のために核を単離するなど強力な処理が必要であった.生細胞でクロマチンを可視化するためには，染色体タンパク質とGFPタンパク質の融合タンパク質を細胞内で発現させることが必要である.だが，この方法では任意のクロマチン領域をラベルすることはできない.そこで本稿では，固定を回避した，生細胞の特定のクロマチン配置を可視化する方法について紹介する.