ハブトグロビン欠損者検出のための簡便なELISA法の開発

摘要

背景：ハブトグロビン（Hp）欠損は，国内における輸血アナフィラキシー発生の一因と考えられている．目的：サンドイッチELISAを用いた簡便なHp欠損の検出法を検討する．方法：被検患者血清，コントロール血清，スタンダードHpを，ウサギ抗ヒトHpポリクローナル抗体を固相化したマイクロプレートに添加して，10分間反応させ，プレートを洗浄後，結合したHpをHRP標識抗ヒトHpヤギ血清およびTMB基質で検出した?被検血清とスタンダードHpの示す吸光度を比較して患者がHp欠損か否かを判定した．結果：上記の方法で，血清中に存在する軸g/dL以上の濃度のHpを検出できた．また，ピークレートネフェロメトリー法で血清Hp含量が5mg/dL以下と測定された患者の中から，先天性のHp欠損者を検出することができた．判定は肉眼でも可能であった．結論：本法は，操作が簡便で，検出感度が高い．本法を用いれば先天性Hp欠損者と二次的に血中Hp含量が減少した患者の鑑別が可能である．頻回輸血を必要とする患者の輸血時のアナフィラキシー発生の予防や，将来のHp欠損者のためのドナープールの作製に有用な方法と思われる．