ЭКСПРЕССИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ АМИНОТРАНСФЕРАЗЫ, ПРИНИМАЮЩЕЙ УЧАСТИЕ В БИОСИНТЕЗЕ (З-ИНДОЛИЛ)УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ В КЛЕТКАХ БАКТЕРИЙ AZOSPIRILLUM BRASILENSE YU62

摘要

В Escherichia coli экспрессирован ген atrC. Методом Ds-Na-ПААГ-электрофореза показано, что продуктом этого гена является белок AtrC с молекулярной массой 45 кДа. С помощью электрофореза в неденатуриру-ющих условиях и при использовании L-триптофана в качестве субстрата обнаружено, что очищенный протеин AtrC обладал аминотрансферазной активностью. В то же время на электрофореграмме неочищенного экстракта из клеток Azospirillum brasilense Yu62 идентифицированы две белковые зоны с аминотрансферазной активностью и молекулярными массами 44 и 66 кДа. Сделан вывод, что очищенный белок AtrC идентичен протеину с молекулярной массой 44 кДа из грубого экстракта. Установлено, что оптимальные значения температуры и рН для протекания аминотрансферазной реакции, катализируемой очищенным AtrC, составляют 30° и 7,0 соответственно.