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【24h】

ゲタウイルスを用いたヒトインターフェロン測定の試み

机译:尝试使用getavirus测量人干扰素

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摘要

インターフェロン(IFN)の抗ウイルス作用を指標とした生物活性の測定は,感度が高く抗ウイルス活性を直接反映するため,従来用いられてきた測定法である.しかし測定に使用されるウイルスは水痘性。 炎ウイルス(Vesicular stomatitis viruS:VSV)に代表されるような,わが国では重要な海外病病原体や,シンドビスウイルスのようにヒトに重篤な感染症を起こす病原体であるため,IFNの抗ウイルス活性を測定する、場合はその安全性に配慮する必要がある.そこで,家畜や人に対して危険性の少ない国内病病原体のゲタウイルスを用いたIFNの抗ウイルス活性の測定を50%CPE抑制-クリスタルバイオレット染色法を用いて検討した.ヒトIFN-αの測定では,FL細胞(ヒト羊膜由来株化細胞)を用いると,ゲタウイルスを使用したIFNの測定感度がVSVを使用した場合よりも高く,測定した製品に記載された力価と同程度の測定感度を示した.単層になったFL細胞にIFN処理する単層処理法で測定したIFN力価が,IFN処理と細胞培養を同時に行うまき込み法で測定したIFN力価に比べ高かった.このことから,ゲタウイルスを使用した単層処理法を用いれば,少量のヒトIFNの検出が可能であることが示唆された.MDBK細胞を抗ウイルス活性の測定に用いた場合,IFNの測定感度はVSVの方がゲタウイルスを使用した場合よりも高感度であったが,測定に使用する細胞数およびウイルスカ価を調製すればゲタウイルスを使用した場合でも,VSVを用いた場合と同程度のIFN力価を示した.これらの結果より,ヒトIFNの測定にはゲタウイルスが使用可能であることが示された.
机译:以干扰素(IFN)的抗病毒作用为指标的生物活性的测量是常规使用的测量方法,因为它具有高灵敏度并直接反映了抗病毒活性。但是,用于测量的病毒是水痘。 IFN的抗病毒活性,因为它是日本重要的国外疾病病原体,例如火焰病毒(Vvesicular stomatitis viruS:VSV),以及可引起人类严重传染病的病原体,例如Sindbis病毒。测量时,必须考虑其安全性。因此,使用50%CPE抑制结晶紫染色法检查了使用对家畜和人类危害较小的家畜疾病病原体甲状病毒对IFN的抗病毒活性的测定。在人IFN-α的测量中,当使用FL细胞(人羊膜来源的应变细胞)时,使用格塔病毒的IFN的测量灵敏度高于使用VSV时的IFN,并且滴定度在被测产物中有所描述。测量灵敏度与之相似。通过单层处理方法对单层FL细胞进行IFN处理后测得的IFN滴度高于通过同时进行IFN处理和细胞培养的输注法测得的IFN滴度。这表明通过使用格塔病毒的单层治疗方法可以检测到少量的人干扰素。当使用MDBK细胞测量抗病毒活性时,VSV中IFN的测量灵敏度高于使用格塔病毒的情况,但应调整用于测量的细胞数量和病毒滴度。即使使用格塔病毒,IFN滴度也与使用VSV时相似。这些结果表明,getavirus可用于测量人类干扰素。

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