Papet-disc法：PCRのためのイネいもち病菌 DNAの簡易調整法

摘要

現在は，イネいもち病菌の個体識別や薬剤耐性菌の遺伝子診断等の場面では，少量のDNAを铸型にしたPolymerase chain reaction (PCR)による検出法が主流とな つている。遺伝子増幅酵素の改良が進む一方で，DNA の抽出法の簡略化もすすめられている。本病菌では，菌 体や培地成分から溶出されるPCR反応阻害物質の影響 などが不明であることから，市販のキットによる抽出が 一般的である。し力、し，市販キットの使用により，収量， 質ともに安定したDNAが得られる力、時間とコストを 要することから簡便な抽出法とは言い難い。つまり，強（ 固な細胞壁を有する菌体からのDNA抽出は，キットを 用いても簡易には行えず，また，数回のPCRのためだ けに，キットを用いることは経済的であるとは言い難（ い。特に，モニタリングゃスクリ 一二ングのように多検 体を扱う場合は，キットを用いない簡易なDNA調整法（ を開発することがコスト削減のために不可欠である。筆（ 者らは，PCR反応に利用可能なイネいもち病菌DNAの 簡易調整法「Pape「disc法」を開発した（早野ら， 2015)。本稿ではPape「disc法によるDNA調整の概要 およびその注意点等について概説する。 （