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川本法LMDとY染色体発現アレイを用いたヒロハノマンテマ性決定遺伝子の絞込み

机译:川本法使用LMD和Y染色体表达阵列缩小广汉性瘤性别决定基因

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摘要

雌雄異株植物ヒロハノマンテマ、Silene latifolia)は、XY型の性染色体をもつ。Y染色 体には性決定遺伝子として、雌蕊発達抑制機 能(GSF)領域と雄蕊伸長促進機能(SPF)領域が 存在すると推定されている。本研究では、組 織特異的な遺伝子発現情報を用いて、GSFと SPFの性決定遺伝子の絞込みを行った。ヒロ ハノマンテマの花は、雄花でも雌花でも、蕾 の発達ステージ6で雌蕊と雄蕊の両方の原器 が形成される。その後、雄花では雄蕊が発達 し、雌花では雌蕊が発達する。走査型電子顕 微鏡を用いた観察やBクラス遺伝子のin situ ハイブリダイゼ一シヨンなどから、GSFは雌 蕊原基が発達する直前(ステ一ジ2-3)の予定 雌蕊領域(Whorl4)で、SPFは雄蕊が発達す るステージ7-8の雄蕊原基で、それぞれ発現 すると考えられている。これらの組織をレー ザ一マイク口ダイセクション(LMD)で回収 し、Y染色体に連鎖する1741遺伝子を基にデ ザィンした発現アレイに供試することで、 GSFとSPFの候補遺伝子を選抜した。また、 重イオンビーム照射で作出した両性花変異体 や無性花変異体についても発現アレイを行 い、これらの変異体で癸現していない遺伝子 をそれぞれGSFとSPFの候補として絞り込 んだ。
机译:雄性和雌性异源植物Hirohanomantema(Silene latifolia)具有XY型性染色体。假定Y染色体具有雌性芽发育​​抑制功能(GSF)区域和雄性芽伸长促进功能(SPF)区域作为性别决定基因。在这项研究中,我们使用组织特异性基因表达信息来缩小GSF和SPF的性别决定基因。雄花和雌花的广汉花的花朵在芽发育阶段6形成雌芽和雄芽的原型。之后,雄芽在雄花中发育,雌芽在雌花中发育。基于使用扫描电子显微镜的观察和B类基因的原位杂交,GSF计划在雌芽原基发育之前(2-3期)位于雌芽区域(Whorl4)。 SPF被认为在雄芽发育的每个7-8阶段雄芽原生动物中表达。选择GSF和SPF候选基因的方法是:通过激光嘴切开术(LMD)收集这些组织,并在基于与Y染色体相关的1741基因设计的表达阵列中使用它们。我们还对重离子束辐照产生的两性花突变体和无性花突变体进行了表达阵列分析,并缩小了这些突变体中未表达的基因分别作为GSF和SPF的候选基因。

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