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【24h】

Testes de ELISA e virus-neutralizacao na deteccao de anticorpos contra o virus da diarreia virai bovina no leite

机译:ELISA和病毒中和测试可检测牛奶中的牛病毒性腹泻病毒抗体

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摘要

O sucesso na estratégia de controle e erradicacao do virus da diarreia virai bovina (BVDV), passa necessariamente pela identificacao e eliminacao dos animais persistentemente infectados (PI). Como esses animais excretam continuamente o virus em suassecrecoes e excrecoes, a prevalência de anticorpos no rebanho, frequentemente é alta e com altos titulos. Devido a essas caracteristicas, amostras de tanques coletivos de leite, foram submetidas a duas técnicas sorologicas, a fim de estabelecer a maisadequada na realizacao de triagem de rebanhos.Para isso, 767 amostras coletivas de leite foram submetidas à analise por um kit ELISA indireto (teste referência) e pela técnica de virus-neutralizacao (VNT) adaptada (teste proposto). Devido aos efeitos toxicos do leite sobre o cultivo celular, a adaptacao consistiu no aumento do volume final na etapa de incubacao celular. Foram positivas, 177 e 139 amostras no ELISA e na VNT, respectivamente. Com isso, a VNT adaptada apresentou uma sensibilidade de 76,8% e uma especificidade de 99,5%. 0 indice Kappa (k) foi de 0,82, demonstrando uma otima concordancia entre as duas técnicas. A analise do coeficiente de correlacao entre os valores de absorbancia no ELISA (OD) e os titulos de anticorpos na VNT nas amostras positivas, demonstrou uma positividade moderada (r = 0,57) com p < 0,05. No entanto, varias amostras com titulos altos na VNT apresentaram ODs moderadas ou baixas. Por outro lado, algumas amostras com titulos neutralizantes baixos apresentaram ODs altas. Como a presenca de animais PI é sugerida por titulos neutralizantes > 80, conclui-se que a técnica de VNT adaptada é mais adequada para a realizacao de triagem em amostras coletivas de leite quando objetiva-se detectar rebanhos com altos titulos de anticorpos.
机译:控制和根除牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的策略成功涉及鉴定和消除持续感染的动物(IP)。由于这些动物不断在其分泌物和排泄物中排泄病毒,因此抗体在牛群中的流行率通常很高且滴度很高。由于这些特性,集体奶罐的样本接受了两种血清学检测技术,以建立最合适的牛群筛选方法。为此,对767种集体奶样本进行了间接ELISA试剂盒分析(参考测试)和改编的病毒中和(VNT)技术(拟议测试)。由于牛奶对细胞培养的毒性作用,适应包括增加细胞孵育阶段的最终体积。 ELISA和VNT分别为177和139阳性。因此,适应的VNT显示出76.8%的灵敏度和99.5%的特异性。 Kappa指数(k)为0.82,表明这两种技术之间有很好的一致性。阳性样品中ELISA(OD)的吸光度值与VNT抗体滴度之间的相关系数分析显示呈中等阳性(r = 0.57),p <0.05。但是,一些在VNT中具有高滴度的样品显示出中等或低OD。另一方面,一些中和效价低的样品显示出高OD值。由于中和效价> 80暗示存在PI动物,因此得出结论,当旨在检测具有高抗体效价的牛群时,采用改良的VNT技术更适合对集体乳样进行筛查。

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