PTD与牛体细胞重编程诱导因子的融合表达载体构建及其原核表达研究

摘要

2006年iPS技术的诞生标志着生命科学新的里程碑.为了避免体细胞重编程过程中,病毒载体携带的外源基因整合进靶基因组所带来的潜在危险,本研究小组曾构建了原核表达载体pProEx-HTa/TAT-人转录因子(OISIM/K)融合表达载体，转化大肠杆菌细胞，经IPTG诱导表达后，获得并纯化了TAT转录因子融合蛋白。并且发现这些融合蛋白可以跨膜进入到细胞内，但只有极其少量的蛋白，到达了细胞核内，而大部分的蛋白包裹于靶细胞的内含体内呈点状分布于细胞质。在本研究中，在融合表达载体的C端和N端分别添加了均有跨膜转导功能的TAT和9R，以期实现更加高效的跨细胞膜和核膜作用，将转录因子带入到靶细胞的细胞核，实现转录因子蛋白直接重编程，为家畜iPS研究提供科学资料。