摘要:绿色化学品的核心原则之一是减少化学品对人体和环境的危害,这与绿色毒理学中提倡不使用动物进行安全与功效评测的理念是吻合的.体外评测技术的进步不仅加速了化学品的评估速度,节约了动物测试成本,也促进了毒性评估技术的进步.标准化和个性化的非测试方法越来越多的应用于表面活性剂的安全性风险评估过程.本文提出了评价表活刺激性的体外方案,由定量构效关系评估、化学测试、细胞膜稳定性和毒性测试、系统生物学方法和整合风险评估五部分组成.化学测试方法采用体外生物蛋白模拟生物体,分析表面活性剂对蛋白质的作用,预测对人体组织的刺激作用,如玉米醇溶蛋白测试(Zein)、皮肤腐蚀的膜屏障试验(Corrositex)和刺激性的Irritection测试.MDCK细胞评测系统,利用其可以形成柱状上皮、屏障功能和细胞间链接的特性,测试不同结构表活的温和性,测试参数包括细胞间链接ZO-1、钙粘连素等,表活引起的炎性因子IL-1α、PGE2的变化.细胞膜稳定性测试可选用红细胞评测系统,通过溶血和蛋白变性观察表面活性剂的作用;也可用成纤维细胞的中性红饱摄放测试;或全细胞平面膜片钳技术测试电阻和细胞活性进行评估.进一步可采用线粒体功能进行机制性研究,通过细胞凋亡(Caspase3/7)、细胞内ROS测定、LDH细胞毒性检测、线粒体形态和膜电位变化、线粒体呼吸功能评价、细胞内ATP和ADP水平测定等,深入研究表活可造成细胞线粒体功能的变化.用上述方案研究和比较了十二烷基硫酸钠(SDS)、阳离子不同烷基三甲基溴化铵(CnTAB)、阳离子荧光十八基罗丹明B(ORB)、季铵盐(QAC)等表活的的温和性.体外方法不仅能够提供有价值的机制信息和开发更安全和更温和的产品,而且具有显著的时间和成本效益.